检验人精浆特异蛋白P30免疫胶体金试剂条的研制

目的制备用于检验人精浆特异蛋白P30-主要是来自法医学案件的免疫胶体金层析试剂条.方法选取针对不同抗原决定簇的抗P30单克隆抗体细胞株,并制备其小鼠腹水,分离纯化单克隆抗体.制备胶体金并以纯化抗体包被,制成免疫胶体金,以免疫胶体金浸泡玻璃纤维.选取适宜的硝酸纤维素膜并于其上不同位置以未金标的另一株P30单克隆抗体和羊抗鼠IgG包被.搭建试剂条并检测其灵敏度和特异性.结果所制成的试剂条灵敏度至少可达4ng/ml;对6人份混合的人精液物质在稀释20万倍后仍出阳性结果,且无非特异性反应.结论检验人精浆特异蛋白P30的免疫胶体金试剂条可对嫌疑人精物质做出排查,有利于法医物证检验.     

鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因的表达

目的 制备抗人转铁蛋白单链抗体。方法 拼装好并带有酶切位点粘性末端的鼠抗人转铁蛋白的单链抗体基因经凝胶电泳定量后,同载体pCANTAB 5E连接,以其转化E.coli TG1细胞,经辅助噬菌体M13K07挽救构建噬菌体抗体表面呈现文库、抗原包被固相材料富集选择阳性重组噬菌体克隆（Panning）。感染能产生可溶抗体片段的大肠杆菌菌株E.coli HB2151,制备可溶抗体,以Anti-E末端抗体进行Western blot、ELISA检验和分子量测定。结果 人转铁蛋白的单链抗体基因成功表达。结论 用基因工程抗体技术制备抗体是可行的。     

Yq11.21区域内5个Y-STR基因座等位基因缺失1例

<正>1案例资料1.1简要案情2010年11月,河南某县一废弃厂房内发现装有尸块的皮箱。提取尸块牙齿和疑似亲属(儿子)的血样,要求进行亲缘鉴定。1.2 DNA检验模板DNA提取挑选牙根完整的牙齿1枚,清洗表面污物,用刀片刮去牙根表层,切取获得碎屑约     

STR复合扩增技术在亲子鉴定中的应用

采用12个荧光标记STR位点复合扩增,进行双亲亲子鉴定和单亲亲子鉴定,取得满意效果.     

荧光标记复合扩增对中国汉族群体8个STR基因座的多态性

应用ＳＴＲ复合扩增技术对ＦＢＩ推荐的 8个ＳＴＲ基因座 ,即Ｄ5Ｓ818,Ｄ13Ｓ317,Ｄ7Ｓ82 0 ,Ｄ16Ｓ539,ｖＷＡ ,ＴＨ0 1,ＴＰＯＸ ,ＣＳＦ1ＰＯ ,进行荧光复合扩增 ,其产物经ＡＢＩ377ＸＬ序列分析仪检测 ,对 110名中国汉人无关个体进行频率调查 ,为大规模ＤＮＡ数据库的建立提供有益探索。1　材料和方法1 1　实验材料无关个体血样来自本室日常检案积累 ;扩增及检测试剂购自美国ＰＲＯＭＥＧＡ公司 ;ＡＢＩ377ＸＬ序列分析仪。1 2　实验方法〔1、2〕　1 2 1　ＤＮＡ模板的制备　 5%ｃｈｅｌｅｘ10 0 (Ｂｉｏ ｒａｄ)2 0 0ｍｌ处理 ,56℃孵…     

与时俱进 开拓创新 开创人防工程建设新局面

榆林市人防事业起步于六十年代末，走过了一条艰难曲折的发展道路，三十多年来，经历了“大打、早打”倡导下全民挖洞的热闹场面，也经历了以经济建设为中心后填洞堵口的冷落环境。《中华人民共和国人民防空法》和《陕西省实施〈中华人民共和国人民防空法〉办法》的颁布，     

AMEL基因座在STR分型中突变1例

1案例某日,某地发生一起火灾,现场勘查中发现已烧焦的具“男尸”。采用Chelex-100法提取1号尸体肌肉组织DNAIdentifiler试剂盒检测,结果见表1及图1。从表1及图1可看出,该尸体Amel基因座表现为XX。现场勘查时反复检查该尸体,男性解剖特征清楚明显。为进一步证实该尸体的“性别”,我们又采用“十五课题”研制的13-PlexY-STR系统试剂盒对该尸体肌肉组织DNA进行检测,结果见表2及图2尸体解剖及Y-STR检验结果均证实该尸体为男尸。表11号尸体肌肉组织Identifiler试剂盒检测结果基因座基因型基因座基因型D8S117913,15D2S133818,23D21S113…     

PMLJ14-HaeⅢ单位点DNA图谱技术在法医学中的应用

通过对269个无关个体DNA中PMLJ14探针的识别位点的HaeⅢ酶解多态性研究,经计算机系统统计处理,得出各片段的频率分布,计算出应用此方法在个人识别中的准确率为99～99.98％,在亲权鉴定中的准确率为91.4～98.6％。保存4年后条件较好的血斑和精斑仍能得到较为清晰的图谱。已将此方法应用于某些案件的鉴定之中。     

利用Identifiler分型系统推断同胞关系

目的探讨自主开发的同胞关系鉴定自动分析软件（ASI）对Identifiler分型系统进行同胞关系鉴定的可行性。方法应用本课题组所开发的软件ASI,对151对同胞及31 224对人工模拟无关个体进行Identifiler系统的15个常染色体STR基因座分型进行分析,计算亲权指数（PI）、同胞关系概率（WFS）和等位基因匹配情况,所获数据进行统计分析,自动计算排序。结果当WFS大于99.999%时,同胞个体占39.07%,无关个体占0%,两组具有显著差异,可以推断两个体同胞关系。当WFS介于1%~99.999%范围内,同胞个体和无关个体有部分重叠,同胞个体占60.93%,无关个体占21.3%,两者具有一定差异,可以通过增加检测STR基因座,再结合案情加作Y-STR、m tDNA检测,以推断两个体是否具有同胞关系。当WFS小于1%时,同胞个体占0%,无关个体占78.7%,可以推断两个体不具有同胞关系。个体间等位基因匹配结果表明：在检测Identifiler体系15个STR基因座时,当两个体常染色体STR基因座的全相同数目≥5时,或全不同数目≤1时,提示为同胞关系;当两个体全不同数目≥6时,或全相同数目≤1时,提示为无关个体,以此作为预测有无同胞关系的界值。结论Identifiler系统及同胞关系鉴定自动分析软件ASI可用于推断同胞关系。     

鼠抗人转铁蛋白抗体轻链与重链可变区基因库的制备

以纯化的人转铁蛋白免疫小鼠,测其血清效价,合乎要求后杀鼠取脾脏并以异硫氰酸胍和酚的混合溶液将其匀浆,再以氯仿抽提、异丙醇沉淀和乙醇洗涤,所得总RNA以oligo(dT)纤维素离心柱分离纯化制备mRNA,使mRNA达到eDNA合成所需的浓度后,反转录制备出eDNA,在合成的eDNA中加入轻、重链引物,扩增制备出小鼠抗人转铁蛋白抗体的轻、重链可变区基因库。