口蹄疫病毒Asia 1/JSWX株基因组全长感染性克隆的体外拯救与序列分析

通过反转录聚合酶链反应,获得了口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JSWX株基因组3′端长片段(长约7.5kb)和5′UTR中ploy(C)前后的2个短片段。5′UTR的2个短片段经融合PCR扩增得到长约710bp的片段。用引物在基因组5′末端引入AflⅡ酶切位点和T7启动子,在5′UTR内引入SpeⅠ酶切鉴定位点,在3′末端引入NotⅠ酶切位点,将融合片段和3′端长片段顺次连接到载体pSL1180。经T7体外转录系统获取的RNA转录本与脂质体共转染BHK21细胞。测序结果表明,构建的病毒基因组全长cDNA为8 197nt,分别包括1个长为1 095nt的5′UTR[含有1个17nt的ploy(C)];1个长6 990nt的ORF;1个长为93nt的3′UTR;之后是18nt的poly(A)尾巴。该全长cDNA克隆与Asia 1/Jiangsu/China/2005株基因组序列的同源性为98.4%。测序和酶切鉴定结果均表明,该口蹄疫病毒株全长cDNA克隆已构建成功,该方法极大地简化了获得FMDV全长cDNA克隆的过程。通过反转录聚合酶链反应、间接免疫荧光试验和蚀斑试验等鉴定,本试验获得了感染性分子克隆;体外拯救获得的基因工程病毒连续传代培养后,可致BHK21细胞产生病变。上述结果表明,构建的cDNA克隆可以作为基因操作的载体,为深入研究安全性好、稳定性高和免疫原性强的基因工程疫苗奠定了基础。     

牛O-A型口蹄疫双价灭活苗研究——效力试验和最小免疫剂量试验

用制备的６ 批牛 Ｏ Ａ 型口蹄疫（ Ｆ Ｍ Ｄ） 双价灭活疫苗对黄牛进行了安全性试验、效力试验和最小免疫剂量试验。结果表明：免疫牛对 Ｏ 型和 Ａ 型同源强毒（１００ ０００ Ｉ Ｄ５ ０） 攻击的近期免疫保护率分别为９１ ．３ ％ 和１００ ％ ;免疫后１８０ ｄ时,保护率分别为１００ ％ 和９３ ．３ ％ ;免疫后２４０ ｄ 时,保护率分别为６０ ．０ ％ 和５０ ．０ ％ 。疫苗经２ ～８ ℃保存３６５ 和５４７ ｄ 后,接种牛对 Ｏ 型同源强毒攻击的保护率分别为１００ ％ 和８５ ．７ ％ ;对 Ａ 型同源强毒攻击的保护率分别为９１ ．７ ％ 和１００ ％ 。免疫剂量为２ 和３ ｍ Ｌ 时,对 Ｏ 型同源强毒攻击的保护率分别为７５ ．０ ％ 和１００ ％ ,对 Ａ 型的保护率均为１００ ％ 。     

社会建设与中国共产党执政资源的新拓展

社会主义社会建设理论是以胡锦涛为总书记的党中央在新世纪新阶段提出的重大战略思想之一,是科学发展观的有机组成部分。从党的执政资源开发的角度看,社会主义社会建设理论坚持以人为本,追求社会公平,关注民生,强调“四位一体”,从多个方面表明党在执政资源开发方面实现了新的跨越。     

毛泽东对中国特色社会主义建设哲学的理论贡献——学习毛泽东《在南京、上海党员干部会议上讲话的提纲》

《在南京、上海党员干部会议上讲话的提纲》是毛泽东在探索中国社会主义建设本质,它明确提出了实践主题从革命向建设的转换问题;重申了社会主义矛盾学说;重申了统筹兼顾的原则;提出了建设社会主义社会秩序的问题。     

口蹄疫病毒O/China/99株VP1基因植物种子特异性表达载体的构建及农杆菌的导入

根据植物组成型表达质粒pBin438的限制性酶切位点及FMDVVP1的核苷酸序列设计并合成引物,从种子特异性启动子7S质粒pU82质粒中扩增7S启动子,经HindⅢ和BamHⅠ酶切,与经同样双酶切的植物组成型表达载体pBin438大片段连接,经酶切、PCR鉴定及序列分析,种子特异性表达载体p7SBin438构建完成。从FMDVVP1基因的pGEMVP1质粒中扩增VP1基因,经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,与p7SBin438质粒酶切后的大片段连接,经酶切、PCR及测序鉴定,FMDVVP1基因已置于种子特异性启动子7S下游,成功构建了FMDVVP1基因的种子特异性表达载体p7SBin438VP1。通过三亲交配法,将表达载体p7SBin438VP1导入根癌农杆菌,为研究FMD可饲疫苗奠定了基础。     

亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析

提取亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒总RNA,用特异性引物通过RTPCR反应获得了约750bp的核酸片段,将其与pGEMTEasy载体连接,并转化大肠埃希氏菌JM109。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序,证明所克隆的片段含有完整的VP1基因;将重组质粒与表达载体pcDNA3.1( )分别用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后连接,构建成重组表达质粒,转化宿主菌DH5α,筛选阳性克隆。测序结果证明,目的基因正确插入到表达载体中,命名为pcDNAV;用同样方法将IL18基因插入pcDNAV中,命名为pcDNAVI。用pcDNAVI免疫豚鼠,2周后加强免疫1次,每周用ELISA检测豚鼠血清中的抗体水平。结果表明,pcDNAVI可引发机体产生体液免疫。     

关于社会建设概念体系的研究

长期以来,我们党虽然十分重视社会建设,但明确提出"社会建设"的科学概念,则是与构建社会主义和谐社会理论紧密相连的。社会建设概念提出后,理论界展开了积极的研究,形成了许多成果,但是尚未形成统一的结论。通过对理论界关于社会建设研究的分析,明确提出了社会建设概念的内涵,并规范了社会建设研究的内容。     

论胡锦涛的社会建设思想

胡锦涛关于社会主义社会建设的思想,归结起来,就是创造性地回答了什么是社会主义社会建设和怎样推进社会主义社会建设的重大的根本问题。总括起来,包括社会建设的地位和作用、社会建设的基本规定和社会建设的实施与保障。胡锦涛关于社会主义社会建设的思想也极大地发展了马克思主义关于社会主义社会建设的理论。     

自考保险专业课程设置改革的可行性研究

自考保险专业课程的设置是适应社会发展需要,既要考虑保险学科的发展,又要考虑自然和社会科学发展应用于自考保险专业,符合特定人群的需求,推动自考教育发展。自考保险专业应设置学历教育和非学历教育,不同的教育有不同等级不同层次的课程,多编制保险案例供自学者使用的课程,彰显保险项目的核心技术,满足自考者的需要,以此促进自考者学以致用。     

马克思主义大众化发展的阶段性

马克思主义大众化是具有历史发展阶段性的理论与实践相统一的过程，其相互联系的三个发展阶段分别为：主要是先进知识分子掌握马克思主义的阶段，主要是政党政治灌输为主的阶段和人民大众主动接受并内化马克思主义的阶段。推动当代中国马克思主义大众化发展，必须实现由政治灌输向人民群众主动接受并内化的转变，而实现这种转变的关键则是不断解决和满足当前人民群众最直接、最现实、最迫切的需求。