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根据已发表的PRRSV基因组序列,设计并合成了1对特异扩增ATCC VR-2332株的ORF6基因的引物.以ATCC VR-2332基因组为模板,通过RT-PCR扩增出586 bp的cDNA产物.将该cDNA片段经T-A连接插入pGEM-Teasy载体中,用重组质粒转化大肠埃希氏菌JM109,获得重组质粒转化菌.对重组质粒DNA进行PCR及酶切鉴定,证明插入的DNA片段与PCR扩增的DNA片段大小相符.对整个ORF6进行序列分析,将测序结果与已发表的ATCCVR-2332序列相比较,证实插入片段为PRRSV VR-2332的ORF6片段的cDNA. 相似文献
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将北京地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 分离株BJ2 和BJ4 的ORF 7 及部分3’端非编码区( UTR) 的RTPCR 扩增产物克隆连接于p GEMTeasy 质粒载体上,重组质粒经EcoR Ⅰ酶切鉴定后进行了双链测序。测定的基因序列与欧美标准毒株已知序列比较发现,BJ2 和BJ4 株与美洲VR2332 株非常接近,在其长度为555 bp 的cDNA 序列中,仅与VR2332 株分别相差1 和2 个核苷酸,其中ORF 7 的核苷酸序列与VR2332 株同源性分别高达100 % 和99 .46 % ,其推导的氨基酸序列与VR2332 株同源性分别为100 % 和99 .25 % ,3’UTR 则完全相同;而与欧洲LV 株则有明显差异,其核苷酸序列同源性仅为68 .00 % 和67 .00 % ,推测的氨基酸序列同源性仅有65 .00 % 和64 .00 % ,且BJ2 和BJ4 株与LV 株相比缺失了KKSTAPM 和ASQG 两段氨基酸序列,而3’UTR 则比LV 株多出38 nt 的一段特征性核苷酸序列。序列分析结果表明,BJ2 和BJ4 株属于同一基因型,且具有VR2332 株的基因特点 相似文献
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目的探讨建立室温保存10年队上大麻干叶及大麻树脂DNA提取方法。方法采用SDS及改良高盐低pH方法,改变提取缓冲液中β-巯基乙醇终浓度,增加用酚、氯仿快速抽提过程,提取新鲜和陈旧大麻(树脂)DNA,应用大麻叶绿体trnLintron引物进行PCR,琼脂糖凝胶电泳法检测扩增产物。结果用高盐低pH方法获得了10年以上大麻干叶及树脂清晰的电泳图谱,其中成功提取了1份23年陈旧大麻的DNA。结论高盐低pH方法操作简便、实用,可望用于陈旧、微量大麻植株的DNA检测,对于涉毒案件中特殊大麻标本的检验具有一定意义。 相似文献
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为进一步分析H7N2禽流感病毒(AIV)分离株血凝素(HA)基因的特性,参照已发表序列设计了1对引物,采用RT-PCR获得了1条约1.7 kb的DNA片段,测序后进行了同源性比较、HA基因系统发育进化树分析和氨基酸编码分析。结果表明,所测的2个分离株的HA基因全长1 664 bp,编码除信号肽以外的HA蛋白的全部544个氨基酸,其中包括HA1的323个氨基酸,HA2的221个氨基酸。2个分离株HA基因核苷酸序列的同源性为99.4%;与GenBank中AIV标准株A/Afri.Star./Eng-Q/983/79(H7N1)的同源性最高,分别为99.4%和99.0%;与美国A/Chicken/NewYork/13142-5/94(H7N2)株同源性很低(仅65.0%),而与以色列、意大利H7N2AIV的同源性较高(为96%~97%);2个分离株在HA基因进化树中均处于H7亚型AIV的欧亚群系分支内。推导氨基酸的序列分析表明,其HA蛋白裂解位点的氨基酸序列为-GR-GLF-,仅包含1个碱性氨基酸(R-)残基,符合低致病力AIV的基因特征。 相似文献
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义务教育阶段贫困家庭学生资助模式研究——以宁夏盐池县为例 总被引:1,自引:0,他引:1
中国各级政府在农村基础教育以及针对贫困家庭儿童的基础教育上做了大量卓有成效的工作,但农村贫困地区的一些贫困家庭的学生要完成义务教育仍需要得到政府和社会各界的资金帮扶,对盐池县的三种比较有代表性的贫困家庭学生资助模式进行分析,可以看出给予村民参与权有利于资助资金公平发放、采用教育券资助方式有利于保证资助资金有效用于教育。 相似文献
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对国有企业产权改革的经济学分析 总被引:1,自引:0,他引:1
李家周 《河南省政法管理干部学院学报》2005,20(5):149-152
股份制应成为公有制的主要实现形式,国有企业在股份制改革中,存量资产要明晰产权,不能流失。增量资产应以产权改革为基础,实现产权明晰化和股权多元化,完善股权结构,实现国有资产保值增值。 相似文献
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2009年11月12日.是刘少奇逝世40周年纪念日。刘少奇是伟大的马克思主义者.杰出的无产阶级革命家、政治家和理论家.是久经考验的卓越的党和国家领导人。刘少奇一生写了大量的著作.都成为革命历史文献。刘少奇的著作和思想.是毛泽东思想的重要组成部分.这是刘少奇遗留给后世的宝贵财富。 相似文献
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以人为本思想原则的实现方式是通过其观念化、社会化、制度化和文化化,推动和保证以人为本实践的经常化,使以人为本本身成为人们的一种内在需要,即成为满足人们需要的需要,成为人们处理问题和解决问题的一种根本态度、方式、方法和行动的自觉,由他律内化为指导人们行动的自律,成为人们的存在方式。本文就以人为本思想原则的观念化问题展开深入的探索。 相似文献