猫细小病毒和猫疱疹病毒1型双重TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立同时检测猫细小病毒（FPV）和猫疱疹病毒1型（FHV-1）的双重荧光定量PCR方法,针对FPV的VP2基因、FHV-1的UL21基因设计特异性引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了双重荧光定量PCR方法,并绘制了标准曲线,其相关系数（R2）均为0.999,具有良好的线性关系。结果显示,FPV、FHV-1最低检测限分别为4.87和2.21 copies/μL;对猫的常见病毒及细菌均无非特异反应;批内、批间试验的变异系数均小于2%。证明该方法灵敏度高、特异性强、重复性好。用建立的方法对178份样本进行检测,结果,FPV和FHV-1的阳性检出率分别为73.65%和16.85%,二者混感阳性率为15.73%,与临床确诊结果一致。上述结果表明,本研究建立的方法可用于FPV、FHV-1感染的早期诊断、定量检测和流行病学调查等。     

非洲猪瘟病毒荧光量子点检测试纸条的研制

根据非洲猪瘟病毒（ASFV）VP72蛋白的氨基酸序列筛选合成多肽,并与载体蛋白BSA进行偶联,将以此得到的多肽作为抗原免疫小鼠,用来制备鼠源抗ASFV VP72蛋白的单克隆抗体。将上述方法制备的针对ASFV VP72蛋白的单抗作为荧光量子点标记的抗体,以与这种标记单抗互相配对的另一单抗包被检测线（T线）,采用山羊抗鼠二抗Ig G包被质控线（C线）,建立了一种简便、快速、准确的用于ASFV抗原检测的荧光量子点免疫层析试纸条。结果表明,制备的试纸条对于猪瘟等8种猪常见疫病免疫用灭活疫苗检测时无交叉反应;可检测到8μg/m L的VP72重组蛋白;与商品化的ASFV荧光定量PCR检测试剂盒进行比对检测,其对临床样品检测的阳性符合率为82.1%(23/28),阴性符合率为93.8%(75/80)。该试纸条特异性好、灵敏度高以及稳定性好,为ASFV的现场快速初步诊断提供了一种技术支持。     

猪凸隆病毒猪嵴病毒猪捷申病毒猪轮状病毒多重荧光RT-PCR方法的建立与初步应用

为建立一种同时检测猪凸隆病毒、猪嵴病毒、猪捷申病毒和猪轮状病毒的高特异性、高灵敏性的检测方法,根据这4种病毒的保守基因序列分别合成相应的特异性引物及TaqMan探针,采用One-Step法进行反应体系的优化,建立多重荧光RT-PCR方法,评估该方法的特异性、敏感性、重复性,并用于本地猪场腹泻样品中上述4种病毒的流行病学调查。结果显示：该方法特异性好,可特异性地检测上述4种病毒的单一模板及混合模板,其他对照株均无扩增信号;灵敏度高,上述4种病毒的最低检出限均为10¹ copies/μL;重复性好,批内及批间重复试验变异系数均小于3%。所建立方法还具有高通量、低污染和操作简便的优点,3 h内即完成全市猪场265份腹泻样品的检测,大大提高了检测效率。流行病学调查显示,厦门市养猪场猪嵴病毒、猪捷申病毒、猪轮状病毒和猪凸隆病毒这4种病毒均具有较高的检出率,阳性率依次为67.92%、65.28%、36.60%和27.55%。该研究将为猪腹泻病鉴别诊断及防控提供重要的技术支持。     

激光剥蚀电感耦合等离子体质谱技术检测车辆油漆金属元素

目的建立车辆油漆的激光剥蚀电感耦合等离子体质谱（laser ablation inductively coupled plasma mass spectrometry,LA—ICP—MS）分析方法。方法对38种车辆油漆样品采用激光剥蚀,电感耦合等离子体质谱进行测定,通过各油漆样品本含有金属元素种类和金属元素响应相对比值的差异对油漆样品进行区分。结果38种样品中有30种可直接依据所含金属元素种类的差异进行对其进行区分,其余8种依据元素间响应值比值的差异进行区分,方法重现性良好,精密度（RSD）小于10％。结论所建立的LA—ICP—MS方法简便快速、精密度良好、对样品微损,适用于法庭科学对车辆油漆的检测。     

Bcl-2蛋白在外伤性癫痫病灶中的表达

目的观察Bcl-2蛋白在外伤性癫痫病灶中的表达变化,探讨其作用机制。方法收集外伤性癫痫、非外性癫痫患者及交通事故死亡者脑皮质各15例,采用免疫组织化学和荧光免疫组织化学技术,观察各实验组Bcl-2蛋白表达水平,测定阳性表达的灰度值,数据采用SPSS 12.0软件进行统计分析。结果外伤性及非外伤性癫痫组Bcl-2蛋白表达水平均高于交通事故死亡组（P〈0.05）;而非外伤性癫痫组表达明显高于外伤性癫痫组,差异亦具有显著统计学意义（P〈0.05）。结论 Bcl-2蛋白能抑制神经元凋亡,对外伤性癫痫的发病过程具有抑制作用。     

胶带粘面手印荧光显现剂的研发与应用

目的根据胶带粘面上潜在手印的特点,利用染料和潜手印的理化性质,研究开发胶带粘面手印荧光显现剂。方法在各种胶带粘面上显现潜在手印,并与常规的碳素墨水染色法进行比较。结果在长波紫外线照射下手印呈黄色明亮荧光,手印纹线清晰、连贯,基本不受手印遗留时间、客体表面颜色和性质的影响。结论胶带粘面上的汗潜手印和血潜手印用荧光显现剂显现效果优于碳素墨水染色法,在实际案件的侦破中有较好的应用前景。     

用于潜指纹检测的激光扫描成像系统

潜指纹检测一直是物证检验鉴定工作中的难题,本文提出的激光扫描成像系统是以激光扫描共焦显微技术为核心的一种高灵敏度潜指纹检验装置,实验表明,该系统对经茚三酮和稀土混合物处理的潜在指纹成像,效果明显。     

印第安纳型水泡性口炎病毒实时荧光RT-LAMP检测方法的建立

利用ESE-Quant tube scanner监测平台,建立了一种基于实时荧光RT-LAMP技术的印第安纳型水泡性口炎病毒(VSV-IN)快速检测方法.根据VSV-IN的G基因序列,设计6条特异性引物,在63℃条件下,进行核酸扩增,反应时间为45 min.在扩增前加入SYBR Green I染料作为反应的指示剂,以S...     

新型农村合作医疗制度对农户医疗负担的影响——基于供给者诱导需求视角的实证分析

为了考察新型农村合作医疗制度对农户住院医疗费用负担的影响,基于供给者诱导需求视角,利用2012年福建省400份农户入户随机调查数据,运用两部分模型进行实证分析。研究结果显示:(1)高科技医疗服务与设施利用、住院时间会显著增加农户的住院费用;(2)新农合支付方式改革对农户住院医疗费用负担影响不具有统计显著性;(3)新农合给付结构对农户医疗费用负担的影响并不一致,尽管年度补偿封顶线有效降低了农户医疗费用负担,但是报销比例却不能有效地约束医疗服务供给方和需求方的道德风险,从而不能有效降低医疗费用支出。研究结论对于如何有效控制医疗服务供给方的道德风险、抑制其诱导需求行为,真正减轻农户就医经济负担具有重要意义。由于受数据可得性的限制,本文没有考虑医院层级与地区医疗资源充足性等因素对农户医疗费用的影响。     

机电再制造的追梦尖兵

韩金虎是河北瑞兆激光再制造技术股份有限公司冶金六队队长。13年来,他从一无所知的学徒工,逐步成长为政治坚定、技术精湛、能力突出的产业技术工人,获得全国劳动模范、河北省劳动模范、河北省五一劳动奖章等多项荣誉称号。勤奋好学不服输韩金虎刚入厂时只有初中学历,没学过机电再制造技术,也没有相关工作经验,一些知识点别的工友经师傅一点就透,而他却需要反复琢磨、反复练习。