47个SNPs复合检测方法的建立及其法医学应用

目的建立47-plexSNPs复合检测方法，评价其在法医学中的应用价值。方法筛选46个常染色体SNPs和1个Y—SNPs，使用2个检测体系分别对47个SNPs进行单管内复合PCR扩增，采用荧光标记单碱基延伸法和毛细管电泳检测技术进行分型检测；并用建立的方法对260份广东地区无关个体血样进行47个SNPs分型。结果建立的47-plex SNPs的复合检测体系灵敏度高，种属特异性好；260名个体所有SNPs均能准确分型，群体内基因型频率分布均符合Hardy—Weinberg平衡，累积个人识别率大于0．9999，累积非父排除率为0．99982，累积偶合率为6．24×10一。结论本文47-plex SNPs复合检测方法能同时对47个SNPs进行快速、准确的检测，在法医学个体识别鉴定中具有良好的应用前景。     

两无关个体单亲亲子鉴定不排除1例

1案例资料2004年4月5日,黄埔分局送来在某医院提取的两名涉嫌被拐卖男童(均约6个月大)的口腔拭子,要求进行DNA检验,以确定是否有血缘关系。用Chelex-100法提取该两名儿童的口腔拭子DNA。先后用Identifiler试剂盒、PowerPlex 16试剂盒、FFFL试剂盒和PowerPlex Y试剂盒进行扩增。扩增产物用AB I 3100型遗传分析仪检测分型,并进行m tDNA L15997~L16401片段序列测定。经Identifiler系统15个常染色体STR基因座检验,两男孩的基因型不同,但每个基因座均至少有1个相同的等位基因,见表1。再使用Power Plex16和FFFL试剂盒检验,在增加的…     

广西地区3个少数民族15个STR基因座的遗传多态性

应用AmpFISTRIdentifilerTM 荧光标记复合扩增系统 ,对广西地区京族、毛南族及水族群体的D8S1179、D2 1S11、D7S82 0、CSF1PO、D3S135 8、TH0 1、D13S317、D16S5 39、D2S1338、D19S4 33、vWA、TPOX、D18S5 1、D5S818、FGA等 15个STR基因座进行了遗传多态性调查 ,获得了相关的群体遗传学参数 ,为法医学个体识别、亲权鉴定、DNA数据库建设 ,以及人类群体遗传学研究提供基础数据。1　材料和方法1 1　材料京族无关个体血样 (14 8例 )、毛南族无关个体血样 (10 8例 )水族无关个体血样 (182例 )分别取自广西东兴市江平镇、广…     

用拭子提取脱落细胞进行DNA检验

<正>随着DNA数据库的建立，法医DNA检验在刑侦破案中正发挥着越来越重要的作用。采用口腔拭子提取口腔脱落细胞进行DNA检验，取材简便又无创伤，成本低。国外不少实验室用该法提取有犯罪前科     

广州非洲籍人群15个STR基因座多态性分析

目的调查居住在广州的非洲籍人群的15个STR基因座多态性。方法应用Sinofiler TM荧光标记检测系统对122个无关个体样本进行分型检测,使用Powerstats V12、Genopop 3.4、Mega 3.4等软件进行统计计算与群体间遗传距离比较。结果居住在广州的非洲籍人群15个STR基因座的累积个体识别率为1-5.80147×10-18、累积非父排除率为1-8.6019×10-8,居住在广州的非洲籍人群与广州汉族人群遗传距离最远,与巴哈马群岛非裔混合群体间的遗传距离最近。结论该系统可满足广州地区非洲籍人群个体识别与亲权鉴定的需要,同时与广州汉族人群存在的较大统计学差异,在进行人群区分时具有重要意义。     

Y染色体SNPs及其在法医学中的应用

Y-SNPs综合了Y染色体和SNPs的特点,具有男性特异性,突变率低,日益引起法医学工作者的关注。本文综合介绍了Y-SNPs的特性、单体群的命名规范及在法医学中的应用价值。     

GPD1-L基因检测及其与青壮年猝死综合征的相关性

目的探寻甘油-3-磷酸脱氢酶样基因(glycerol-3-phosphate dehydrogenase 1 like gene,GPD1-L)的变异位点,讨论其与青壮年猝死综合征(sudden manhood death syndrome,SMDS)的关系。方法提取SMDS组及健康对照组血样的基因组DNA,采用PCR法扩增GPD1-L基因编码区外显子、外显子-内含子交界区以及3′侧翼区序列,直接进行DNA测序以明确遗传变异类型,并进行基因型频率和等位基因频率的统计学分析。结果在SMDS组中共检测到2个变异位点,c.465CT和c.*18GT,后者在SMDS组和对照组中基因型分布和等位基因频率存在一定差异,但无统计学意义(P0.05)。结论 GPD1-L基因变异与中国人SMDS发生的相关性尚有待进一步研究。     

19个常染色体与4个Y染色体STR复合扩增体系的建立

目的建立19个常染色体STR及Amelogenin和4个Y染色体STR基因座复合扩增体系,并对其效能进行评估。方法用五色荧光标记20＋4Y—STR基因座,建立同步扩增检测体系,用ABI3130XL遗传分析仪对扩增产物进行电泳,GeneMapperID3．2软件进行基因分型;检测体系的灵敏度、均衡性、稳定性、特异性、同一性和稳定性,并观察混合、降解及微量检材的分型情况。结果采用本文体系,DNA模板量在0．05～1．00ng时,分型准确,均衡性、特异性好;混合、降解及微量检材分型正确。该19个常染色体STR基因座的累计个人识别率大于0．999999999,三联体累计非父排除率达0．999999985,Y—STR单倍型多态性为0．592。结论本文建立的复合扩增体系分型准确,稳定,在法医学案件检验及数据库建设等方面有良好的应用前景。     

广东省瑶族人群15个STR基因座的多态性调查

目的调查广东省瑶族人群无关个体 15个STR基因座 (D3S135 8、TH0 1、D2 1S11、D18S5 1、PentaE、D5S818、D13S317、D7S82 0、D16S5 39、CSF1PO、PentaD、vWA、D8S1179、TPOX、FGA)的多态性 ,研究其在法医学检验中的应用价值。方法应用PowerplexTM16荧光标记复合扩增系统对 2 2 2例广东省瑶族无关个体血样DNA进行 15个STR基因座的复合扩增 ,用ABI 310 0遗传分析仪对扩增产物进行检测 ,用GeneScan、GenoTyper软件进行基因分型 ,统计计算 15个STR基因座的群体遗传学参数。结果PowerplexTM16荧光标记系统的 15个STR基因座在广东省瑶族人群的累积偶合率为 7 5 8× 10 - 17,三联体累积非父排除率为 0 999998,二联体累积非父排除率为 0 9996 6。结论本研究 15个STR基因座可满足广东省瑶族人群法医学的个体识别及亲权鉴定的需要。     

DNA数据库建设中批量样本直接扩增检验法的应用

目的研究批量样本直接扩增法在DNA数据库建设中的应用。方法打孔机打取血滤纸600份,剪取芝麻大小的口腔拭子300份,放入96孔扩增板,加入扩增试剂后直接扩增,并对其中200份血滤纸用磁珠法,100份口腔拭子用96孔板Chelex-100法,经DNA提取后扩增检验进行比较。结果血滤纸采用直接扩增法及磁珠法STR检测成功率均为100%;口腔拭子采用直接扩增法的成功率为95%,采用96孔板Chelex-100法的成功率为94%。结论血滤纸和口腔拭子通过直接扩增均能获得很好的DNA分型结果,该方法省时省力,可用于DNA数据库建设。