用二步消化法提取指甲DNA

<正>在日常检案工作中，对腐败尸体的指甲进行DNA检验，扩增效果有时不稳定，特别是埋于泥土、弃于粪坑、污水等环境中的指甲检材，常需多次反复处理才能得到满意DNA检测结果。究其原因，可能与没有得到有效的DNA模板有关。作者采用“二步消化法”，可以去除表层降解DNA，减少PCR抑制物，从而可有效地提高了DNA模板质量，提高了指甲DNA的检验成功率。     

腐败尸体不同组织的DNA扩增效果

<正> 在法医实际检案工作中,经常需对腐败尸体进行DNA鉴定。提取腐败尸体组织进行DNA检验所需的检材,不同检验技术要求不尽相同。为提高腐败检材检出效率,本文作者对从高度腐败尸体上提取的软骨、指甲、肌肉、头皮、血液等进行DNA的提取、荧光标记STR复合扩增技术进行扩增分型,并比较分析了扩增效果,现报道如下。     

广州地区3个VNTR位点扩增片段频率分布及在法医学中的应用价值

本文根据国内外文献报导的多态性位点，从中筛选出多态性高，实用 性强，易于扩增分型的 ３个 ＤＮＡ位点（即 ＡＰＯＢ、ＰＭＣＴ１１８、Ｐ３３．６）。调查了各 位点在广州地区汉族人群中的分布频率、遗传特点及个体识别力，通过计算３位 点两无关个体基因型偶然相同的概率为 ２．３ × １０－５，可满足实际检案需要。作 者还对检材处理、实验方法等作了研究。     

一种用于降解DNA样本的性别鉴定方法

目的 建立一种采用PCR技术对降解DNA样本进行性别鉴定的新方法。方法 采用针对amelogenin基因X染色体外显子3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1,对在室温环境下放置5－15年的男、女血痕标本各50例、毛发各20例、骨骼各20例以及现场提取5－－20天的男、女腐败肌肉各10例标本中提取的降解DNA样本进行扩增。用PGA（9％T,3％C）电泳、银染显带检测扩增产物。结果 所有样本均得到正确结果,男性检材表现为83bp的Y特异性及80bp的X特异性2条谱带,而女性检材仅有1条80bp的X特异性谱带。结论 用针对amelogenin基因X染色体外显子3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1鉴定性别的方法灵敏、可靠、方便,是降解DNA检材性别鉴定十分理想的方法。     

一种用于降解DNA样本的性别鉴定方法

目的　建立一种采用PCR技术对降解DNA样本进行性别鉴定的新方法。　方法　采用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1,对在室温环境下放置 5～ 15年的男、女血痕标本各 5 0例、毛发各 2 0例、骨骼各 2 0例以及现场提取 5 - - 2 0天的男、女腐败肌肉各 10例标本中提取的降解DNA样本进行扩增。用PAG( 9%T ,3 %C)电泳、银染显带检测扩增产物。　结果　所有样本均得到正确结果 ,男性检材表现为 83bp的Y特异性及 80bp的X特异性 2条谱带 ,而女性检材仅有 1条 80bp的X特异性谱带。　结论　用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1鉴定性别的方法灵敏、可靠、方便 ,是降解DNA检材性别鉴定十分理想的方法。     

指甲垢的DNA检验1例

1案例资料1.1简要案情 2001年12月,燕某(女性)被杀。现场勘查未发现嫌疑人留下的痕迹。剪取死者的指甲,其中2枚指甲的甲垢浸洗液检验出另一女性DNA基因型,据此为突破口,进行排查,抓到燕某丈夫的姘妇叶某,对照检验证实叶某为本案凶手。     

D_(17)S_(30)VNTR位点扩增片段长度多态性及其法医学应用

目前法医ＤＮＡ检验技术，特别是聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）的应用越来越受重视。该技术适合于微量和部分降解的检材，且方法简便、快捷。本实验室继开展ＰＭＣＴ１１８、ａｐｏＢ、Ｐ３３．６三个ＶＮＴＲ位点的应用后又开展了Ｄ１７Ｓ３０ＶＮＴＲ位点扩增技术并应用于检案，取得满意结果。报告如下材料和方法１．实验材料无关个体的血液５０份，血痕、精斑、混合斑、组织标本各１０份，已确定亲生关系的父母子家系ＤＮＡ标本５例，由本室检案积累。案件由本市及邻近省市有关单位送检。２．实验仪器试剂ＤＮＡ扩增仪（ＰＥ２４００型）、…     

Chelex-100法提取脱落细胞检材DNA的实时定量研究

目的研究脱落细胞检材DNA检验的简便有效的提取方法。方法对76份包括帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水在内的7种脱落细胞检材采用Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从帽子（头套）中获得的脱落细胞DNA平均含量为8.31ng,眼镜擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.20ng,牙刷上获得的脱落细胞DNA平均含量为49.40ng,剃须刀擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.92ng、梳子擦拭物上获得的的脱落细胞DNA平均含量为10.68ng,口香糖的脱落细胞DNA平均含量为16.30ng,羊水的脱落细胞DNA平均含量为320ng。以上76份检材性别及10个以上STR位点分型成功率为75.8%。结论从帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水等检材提取的脱落细胞可用Chelex-100法提取DNA作STR分型。     

两无关个体单亲亲子鉴定不排除1例

1案例资料2004年4月5日,黄埔分局送来在某医院提取的两名涉嫌被拐卖男童(均约6个月大)的口腔拭子,要求进行DNA检验,以确定是否有血缘关系。用Chelex-100法提取该两名儿童的口腔拭子DNA。先后用Identifiler试剂盒、PowerPlex 16试剂盒、FFFL试剂盒和PowerPlex Y试剂盒进行扩增。扩增产物用AB I 3100型遗传分析仪检测分型,并进行m tDNA L15997~L16401片段序列测定。经Identifiler系统15个常染色体STR基因座检验,两男孩的基因型不同,但每个基因座均至少有1个相同的等位基因,见表1。再使用Power Plex16和FFFL试剂盒检验,在增加的…     

用拭子提取脱落细胞进行DNA检验

<正>随着DNA数据库的建立，法医DNA检验在刑侦破案中正发挥着越来越重要的作用。采用口腔拭子提取口腔脱落细胞进行DNA检验，取材简便又无创伤，成本低。国外不少实验室用该法提取有犯罪前科