猪生殖与呼吸综合征血清抗体重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立

以纯化的猪生殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)重组N蛋白作为包被抗原 ,通过对各项试验条件的优化 ,建立起检测PRRS血清抗体的重组N蛋白间接ELISA检测方法。用此方法检测了2 0 0份血清样品 ,并与IDEXX公司ELISA试剂盒的检测结果相比较 ,敏感性和特异性分别为 93%和95 % ,总符合率达 91%。 2种检测方法的结果之间差异不显著 (P >0 .0 5 )。试验表明 ,建立的间接ELISA检测方法具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点 ,可用于PRRS血清抗体的检测。     

与华沙体制相衔接的航空公司协议的效力问题

本文从一则涉外案例出发,提出了一个关于与华沙体制相衔接的航空公司协议法律效力的问题.从民事法律关系角度来看,与华沙体制相衔接的航空公司协议是自然具有法律效力的,仅仅基于与华沙体制相衔接的航空公司协议并非是国际法的渊源而简单地从法律适用的角度来否定其效力是不完整的.在这一结论的指导下,本案中<吉隆坡协议>应当被引以为据.     

我国特许经营发展滞缓的原因与对策

特许经营是一种企业快速扩张的有效的营销形式,虽然在我国出现已有十几年的时间了,但由于观念、立法、企业品牌知名度以及人才等原因,使其发展受到了很大的影响,作为职能部门应该采取切实可行的措施,推动我国企业特许经营的快速发展。     

自生自发的秩序?——哈耶克自由理路的迷思

哈耶克对自由秩序的论证其基本立场在于对唯理主义的批判,其理路是主张“否定性自由”。虽然哈耶克力图将英国式的经验主义与其反唯理主义的立场融合,但历史与现实的错综复杂性使得这种理路难以解释所有的社会冲突。哈耶克对自由理路的贡献除了其对于自由立场的坚定捍卫以外,还在于其从自生自发秩序入手而对制度所作的稳健、温和的建构,哈氏理路的这种建构性对于我们现实的法制建构具有借鉴意义。     

口疮病毒VIR蛋白多克隆抗体的制备及VIR蛋白的亚细胞定位观察

为研究口疮病毒VIR蛋白的生物学特性,构建了含有VIR基因的重组表达质粒pET-VIR和含有绿色荧光蛋白融合真核重组质粒pEGFP-VIR;诱导表达和纯化VIR蛋白,并用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,利用间接ELISA测定抗体效价,用Western-blot鉴定抗体的反应原性。利用脂质体介导法将pEGFP-VIR质粒转染绵羊睾丸细胞,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)进行细胞核染色后激光扫描共聚焦显微镜观察VIR在细胞内的表达和亚细胞定位。结果显示,表达和纯化了含有GST标签的GSTVIR蛋白,主要以可溶性形式存在,其分子质量约27ku,制备的多克隆抗体效价达1∶218;Western-blot分析结果显示,此多克隆抗体有较好的特异性反应;VIR蛋白主要定位于细胞核内。本试验结果为VIR生物学功能的深入研究奠定了基础。     

鸡Akt基因mRNA SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为快速检测鸡细胞的增殖能力,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术,建立鸡Akt基因mRNA的定量分析方法。根据GenBank中原鸡Akt基因和鸡β-actin基因序列,设计合成特异性引物,应用RT-PCR技术从DF-1细胞中扩增出目的基因的DNA片段,并将纯化后的PCR产物与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin。分别以重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin为标准品建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测的标准曲线。结果显示,建立的RT-PCR标准曲线具有良好的线性关系和特异的单个峰,能够对样品进行稳定可靠的定量检测。采用本方法检测DF-1-PrP和DF-1-count细胞系的Akt基因的相对表达量,前者为1.656 9×103,后者为2.257 4×102,DF-1-PrP细胞系的Akt基因表达量明显高于DF-1-cont细胞系(P0.01),说明PrPC及Akt在DF-1细胞系中的表达量呈正相关。结果表明,本研究建立的鸡Akt RT-PCR检测方法能够通过对Akt基因的转录量进行检测而评价鸡细胞的增殖能力。     

血府逐瘀汤辅助治疗重症闭合性胸外伤临床观察

目的 观察血府逐瘀汤辅助治疗重症闭合性胸外伤的疗效。方法 将60例重症闭合性胸外伤患者随机分为治疗组和对照组，每组30例。对照组在西医常规对症治疗的基础上进行纤维气管镜肺泡灌洗，治疗组在对照组疗法的基础上加服血府逐瘀汤。采用视觉模拟量表(visual analogue scale，VAS)评价患者的胸痛程度，通过检测外周血白细胞(white blood cell, WBC)及血清C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)水平评价炎症程度，采用血气分析评价肺通气和换气功能。结果 治疗组患者治疗后VAS评分降低程度显著大于对照组（P<0.05）。治疗组患者住院时间较对照组明显缩短（P<0.05）。治疗第3、7、12天末，治疗组患者血pH值、动脉血氧分压、血氧饱和度均显著高于对照组（P<0.05），动脉血二氧化碳分压、外周血WBC计数、血清CRP水平均显著低于对照组（P<0.05）。治疗组临床疗效明显优于对照组（P<0.05）。结论 血府逐瘀汤能提高重症闭合性胸外伤患者肺泡的通透性，改善肺组织的通气及换气功能，降低炎症反应。     

权责分立与风险分配:网格化管理困境分析

当前的网格化管理研究多从技术与治理角度探讨利弊,事实上,治理技术与技术治理之间存在治理组织与缺席环境的调节作用。回归治理情境,分析县域治理结构及组织激励机制和资源配置模式及公共治理任务可以发现,事务属性结构及其变迁,使得无论条块还是层级组织,均难以实现事务的清晰治理。县级组织为了规避治理风险,借用合法性强的网格化政策,实现了新时期调适性治理。网格化管理的问题在于,县域组织无法实现有效协同,从而加剧了基层权责不协调问题,引发"有组织不负责任"现象。放眼未来,只有当权责失调的治理问题逐步得到化解,网格化管理才能发挥其应有的技术效应。     

《难经》针法中的阴阳五行观

阴阳五行学说贯穿《难经》针法论述的诸多方面.在针刺取穴中重视从阴引阳、从阳引阴,针刺操作中注重阴阳相配、刚柔相济,针刺方法上注重取阴养阳、取阳养阴,针刺补泻方法提出"补母泻子"和"泻南补北"等,这些对后世针法理论的发展具有重要指导意义.