糖尿病肾病血瘀证大鼠铁死亡相关基因GPX4、ACSL4表达水平变化

目的 探究糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）血瘀证大鼠肾损害与肾脏铁死亡的潜在机制。方法 将50只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、DKD组、DKD血瘀证组。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法复制DKD大鼠模型，采用尾静脉注射右旋糖酐的方法复制DKD血瘀证模型。实验过程中观察大鼠血瘀证表现及检测24 h尿蛋白、血清肌酐、血尿素氮、血液流变学指标，采用苏木精-伊红染色、Masson染色、PAS染色观察肾脏的组织形态，采用透射电子显微镜观察铁死亡典型细胞的线粒体变化；采用免疫组织化学法、Western blot法检测肾组织铁死亡相关蛋白［长链酯酰辅酶A合成酶4（Acyl-CoA synthetase long chain family member 4，ACSL4）、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）］及肾脏纤维化指标［纤维连接蛋白（fibronectin，FN）、Ⅳ型胶原蛋白（type Ⅳ collagen，Col-Ⅳ）］的表达水平。结果 与对照组比较，DKD组大鼠肾脏病理变化加重，线粒体损伤明显，24 h尿蛋白含量，血清肌酐、血尿素氮水平及全血黏度、血浆黏度明显升高（P＜0.05），肾脏ACSL4、FN和Col-Ⅳ及其mRNA表达水平明显升高（P＜0.05），GPX4蛋白及其mRNA表达水平明显降低（P＜0.05）。DKD血瘀证大鼠出现唇色黯淡、眼球黯红、耳廓紫红、舌下脉络紫黯等血瘀证表现，24 h尿蛋白和血清肌酐、血尿素氮水平明显高于DKD组，光学显微镜下可见肾脏出现明显的系膜基质增生、肾小球萎缩、肾间质胶原沉积和纤维化，电子显微镜下可见肾组织细胞线粒体损伤明显，嵴基本断裂，ACSL4、FN、Col-Ⅳ及其mRNA表达水平较DKD组明显上升（P＜0.05），GPX4蛋白及其mRNA表达水平较DKD组明显下降（P＜0.05）。结论 DKD血瘀证大鼠肾脏损害更加严重，其机制可能与GPX4、ACSL4介导的铁死亡有关。     

清热凉血法治疗血热型银屑病的疗效及对血清P物质、血管内皮生长因子的影响

目的 探讨清热凉血法治疗血热型银屑病的临床疗效及对血清P物质（substance P，SP）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的影响。方法 将43例血热型银屑病患者随机分为观察组（22例）和对照组（21例），在外用尿素乳膏的基础上，观察组予以口服清热凉血方剂，对照组予以口服复方氨肽素片，疗程均为8周。比较两组患者治疗前后银屑病面积与严重性指数（psoriasis area and severity index，PASI）、四条目瘙痒问卷（four-item itch questionnaire，FIIQ）评分、血清SP和VEGF水平，并评估临床疗效和不良反应发生率。结果 观察组临床疗效显著优于对照组（P＜0.05）。两组治疗后PASI、FIIQ评分、SP水平、VEGF水平均较治疗前显著降低（P＜0.05），且观察组降低程度较对照组更为显著（P＜0.05）。与对照组比较，观察组的不良反应发生率更低（P＜0.05）。结论 清热凉血法能有效治疗血热型银屑病，缓解瘙痒，降低血清SP和VEGF水平，且不良反应发生率低。     

慢传输型便秘中医证型与血管活性肠肽和P物质关系

目的 探究慢传输型便秘（slowtransitconstipation，STC）中医证型与血管活性肠肽（vasoactiveintestinalpeptide，VIP）、P物质（substanceP，SP）的关系，为中医辨证客观化寻找证据。 方法 纳入肠道实热证、肠道气滞证、肺脾气虚证、脾肾阳虚证、津亏血少证STC患者各15例，另随机选取15例健康人作为对照组。应用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血清VIP、SP水平。结果 STC患者血清VIP和SP水平显著高于对照组（P<0.05，或P<0.01）；STC虚证患者血清VIP和SP水平显著高于STC实证患者（P<0.01）； 3种虚证（肺脾气虚证、脾肾阳虚证、津亏血少证）患者血清VIP及SP水平比较，以及2种实证（肠道实热证、肠道气滞证）患者血清VIP水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）； 肠道气滞证患者血清SP水平显著低于肠道实热证（P<0.05）。结论 血清VIP、SP水平与STC中医证型有关，有利于鉴别STC虚证和实证。     

基于NF-κB/AHR通路探讨电针“足三里”和“内关”对肠易激综合征大鼠内脏高敏感的调节机制

目的 观察电针“足三里”和“内关”穴对肠易激综合征（irritable bowel syndrome,IBS）大鼠内脏高敏感的调节机制。方法 将40只新生SD大鼠随机分为模型制备组（n=32）和空白组（n=8），采用“母婴分离结合醋酸灌肠”复制内脏高敏感大鼠模型，将模型复制成功的内脏高敏感大鼠随机分为模型组、假刺激组、电针组，每组8只。假刺激组大鼠仅电刺激非经非穴部位，空白组及模型组大鼠仅抓取，不做其他干预；电针组大鼠给予电针同侧足三里和内关穴，每次30 min，隔日1次，共4周。观察各组大鼠一般情况，体质量，粪便性状评分，内脏痛阈值，血清白细胞介素-17A（interleukin-17A,IL-17A）水平，结肠组织中芳香烃受体（aryl hydrocarbon receptor,AHR)、细胞色素P1（cytochrome P1,CYP1)、核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB) P65蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组大鼠粪便性状评分显著增加（P＜0.05）,体质量显著下降（P＜0.05）,内脏痛阈值显著降低（P＜0.05）,血清IL-17A水平显著升高（P＜0.05）,结肠组织AhR、CYP1、NF-κB P65蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，电针组大鼠粪便性状评分显著减少（P＜0.05），体质量显著增加（P＜0.05），内脏痛阈值显著增加（P＜0.05），血清IL-17A水平显著降低（P＜0.05），结肠组织AHR、CYP1、NF-κB P65蛋白表达水平显著上升（P＜0.05）。结论 电针“足三里”和“内关”穴能降低IBS大鼠的内脏高敏感，其作用机制可能通过激活NF-κB/AHR通路，上调AHR、CYP1、NF-κB P65蛋白的表达而实现的。     

多花黄精多糖PcUER1基因的克隆与表达分析

目的探究安徽生产的多花黄精多糖3,5-异构酶/4-还原酶基因(PcUER1)的结构基因信息及其在多花黄精中单糖鼠李糖化合物生源路径中的表达调控机制。方法以多花黄精为研究对象,基于其转录组学数据,克隆PcUER1基因并针对该cDNA序列展开生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR方法检测多花黄精不同组织中PcUER1基因的表达水平。结果多花黄精多糖PcUER1基因的cDNA序列长度为900 bp,编码299个氨基酸;序列分析表明多花黄精与百合科虎眼万年青的相似度达到92.03%;实时荧光定量PCR检测结果显示,PcUER1基因在多花黄精的根、须根、茎、叶中表达水平逐渐降低,茎和叶中PcUER1基因表达水平的差异无统计学意义。结论多花黄精多糖PcUER1基因的活性位点有辅因子结合基序和催化四分体基序,其蛋白表达产物理化性质稳定。     

补阳还五汤黄酮类有效成分在Caco-2细胞单层模型的转运特征及对CYP450酶活性的影响

目的 研究补阳还五汤3个黄酮类有效成分（羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、芒柄花素）在Caco-2细胞单层模型中的转运特征及其在大鼠肝微粒体中对CYP450酶亚型活性的影响。方法 MTT法研究药物在Caco-2细胞单层模型的安全浓度范围，以Caco-2细胞单层模型研究黄酮类有效成分的双向转运机制，以表观渗透系数（Papp）为检测指标，考察时间、浓度以及P-gp抑制剂维拉帕米对转运的影响，利用Cocktail探针法研究药物对CYP450亚型的体外抑制作用。结果 从顶侧（apical, AP）到底外侧（basolateral, BL）（AP→BL），芒柄花素、毛蕊异黄酮的Papp>10-6 cm/s，表明其吸收性良好，羟基红花黄色素A的Papp为10-6 cm/s，表明其吸收性一般；且三者的转运量随浓度升高和时间延长而显著升高，BL→AP的转运量与AP→BL的转运量的比值小于1.5，其中芒柄花素、毛蕊异黄酮的转运都受到P-gp外排蛋白的外排作用；补阳还五汤黄酮类有效成分明显降低了CYP2E1、CYP1A2酶探针底物的代谢量(P<0.05)。结论 3种黄酮类有效成分在Caco-2细胞模型的转运方式均为被动转运，毛蕊异黄酮与芒柄花素明显受到P-gp的外排作用，补阳还五汤黄酮类有效成分可以增加主要通过CYP2E1、CYP1A2酶代谢的药物浓度。     

化瘀温经利湿法治疗慢性盆腔炎20例临床观察

目的观察化瘀温经利湿中药对慢性盆腔炎患者的疗效及对外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo调节性T细胞（regulative Tcells，Treg）的影响。方法将40例慢性盆腔炎患者按随机数字表法分为化瘀温经利湿中药治疗组20例和西药对照组20例，两组均以1个月为1个疗程，均治疗1个疗程，观察临床疗效及对症状出现率的影响；采用流式细胞术检测患者治疗前后外周血CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg的数量及其在CD4^＋T淋巴细胞中所占的比例；并检测治疗前后血沉（erythrocyte sedimentation rate，ESR）和C反应蛋白（C—reactive peptide，CRP）水平。结果与对照组比较，治疗组总有效率和CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平显著升高，ESR、CRP及症状出现率显著降低（P〈0．05）。结论化瘀温经利湿中药治疗慢性盆腔炎的作用机制，可能与其上调CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平，促进免疫调节，降低炎症反应有关。     

Lipidic compounds found in soils surrounding human decomposing bodies and its use in forensic investigations – A narrative review

Following decomposition of a human body, a variety of decomposition products, such as lipids, are released into the surrounding environment, e.g. soils. The long-lasting preservation in soils and their high diagnostic potential have been neglected in forensic research. Furthermore, little is known about the preservation, chemical transformation, or degradation of those human derived lipids in soils. To date, several studies identified various lipids such as long-chain free fatty acids and steroids in soils that contained decomposition fluids. Those lipids are preserved in soils over time and could serve as markers of human decomposition in forensic investigations, e.g. for estimating the post-mortem interval or identifying the burial location of a human body. Therefore, this review focuses on the current literature regarding fatty acid and steroid that have been detected in soils and associated with human body decomposition. After a short introduction about human decomposition processes, this review summarises fatty acid and steroid analysis applied in current case studies and studies related to taphonomic research. This review provides an overview of the available studies that have used fatty acids and steroids as identifiers of human decomposition fluid in soils in a forensic context and discusses the potential for developing this innovative field of research with direct application in a forensic context.     

灸预处理对乙醇诱导胃黏膜损伤大鼠TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白的影响

目的 观察灸预处理对乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤的影响，探讨灸法对胃黏膜损伤“未病先防”的作用机制。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组和灸预处理组，每组10只，先对灸预处理组大鼠进行艾灸“足三里”“中脘”，再对模型组和灸预处理组大鼠进行乙醇灌胃制备胃黏膜损伤模型。比较各组大鼠胃黏膜溃疡指数（ulcer index,UI）和病理学变化，ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素-6 (interleukin- 6，IL-6)水平，免疫组织化学法和Western blot法检测胃黏膜组织Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）、核转录因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）p65蛋白表达水平。结果 模型组大鼠UI显著高于正常组，灸预处理组UI显著低于模型组（P＜0.05），模型组大鼠胃黏膜上皮结构破坏严重，有出血灶和炎症细胞浸润；灸预处理组大鼠胃黏膜病理损伤低于模型组；与正常组比较，模型组和灸预处理组大鼠血清TNF-α、IL-6水平均显著升高（P＜0.05），胃黏膜组织TLR4、MyD88表达水平均显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，灸预处理组各项指标均显著降低（P＜0.05）。结论 灸预处理对胃黏膜具有保护作用，其机制可能是通过调控TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平实现的。