JA1对体外培养的Hep细胞和小鼠皮下移植性Hep细胞凋亡的影响

采用噻唑蓝(MTT)还原法、流式细胞术、光镜及透射电子显微镜技术等检测了梯度浓度的JA1(沙冬青提取物)对体外培养的小鼠肝癌细胞株Hep增殖的影响及诱导Hep细胞凋亡的作用;并检测了JA1对小鼠皮下移植性Hep细胞的生长抑制及诱导凋亡作用.结果显示,JA1可显著抑制小鼠Hep细胞的增殖,且这种抑制有浓度和时间依赖性.流式细胞仪分析显示,JA1处理后的Hep检测样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生了改变,细胞在G1期被阻滞.同时,JA1对小鼠皮下移植性Hep细胞也有明显的抑制作用.JA1灌胃试验组瘤组织细胞DNA直方图有明显的凋亡峰,细胞在G1期也被阻滞,光镜和电镜下可见大量凋亡肿瘤细胞.     

猪生殖与呼吸综合征病毒多基因重组真核表达质粒的构建及诱导的小鼠体液免疫

根据猪生殖与呼吸综合征病毒已知序列设计了3对引物,采用RT-PCR方法分别扩增ORF3、ORF5和ORF6基因,并将其依次与真核表达质粒pcDNA4.0定向连接,构建了重组质粒pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5,经提纯后,给试验组小鼠后肢胫前肌注射,每只100ìg,2周后再注射1次.首免后每隔7 d采血1次,用间接ELISA检测血清抗体水平并测定其中和抗体水平.结果显示,所构建的重组质粒能够诱导小鼠产生很高的ELlSA抗体和中和抗体水平.     

小鼠PVM血清抗体I-ELISA检测法的建立及其应用

对实验小鼠感染小鼠肺炎病毒(PVM)用间接酶联免疫吸附试验(IELISA)进行检测,其敏感性、特异性、重复性和稳定性均达到满意效果。结果显示,用PVM接种BHK21细胞经初、高、超差速离心浓缩制备的抗原,与仙台病毒(Sendai)、小鼠肝炎病毒(MHV)和呼肠孤病毒3型(Reo3)的免疫小鼠血清抗体不产生交叉反应,阻断抑制率大于50%;IELISA与HI对50份小鼠血清检测比较,其阳性检出率分别为30%和20%;将制备的检测抗原在-20℃保存6个月效价稳定。IELISA操作简便,适用于大批样品的检测。     

甘肃棘豆生物碱对小鼠外周血免疫细胞活性及数量的影响

给 32只成年健康昆明系试验小鼠腹腔注射甘肃棘豆生物碱 ,测定其外周血T细胞数量及中性粒细胞吞噬率 ,以探讨甘肃棘豆生物碱对小鼠外周血免疫细胞活性及数量的影响。结果表明 ,小鼠在注射甘肃棘豆生物碱后 ,其外周血T细胞数量和中性粒细胞吞噬率均呈现初期升高、后期下降的规律 ,在一定时期内与对照组相比有显著或极显著的差异 (P <0 .0 5 ,或P <0 .0 1) ;转移因子虽然也能够提高外周血T细胞数量和中性粒细胞吞噬率 ,但对甘肃棘豆生物碱的效应没有明显影响     

用寡核苷酸探针对近交系小鼠DNA指纹图谱的分析

应用DNA指纹技术 ,用非放射性标记的寡核苷酸探针 (GGAT) 4对 3个清洁级近交小鼠品系C5 7、DBA/ 2、BALB/c进行检测 ,分析其DNA指纹图谱。结果显示 ,不同品系近交系小鼠的DNA指纹图谱有明显差异 ,而品系内小鼠之间的DNA指纹图谱基本一致。证明DNA指纹技术能够较好地检测出近交系小鼠的基因纯合性 ,反映其遗传质量 ,可以应用于对近交系小鼠的遗传质量监测。     

养生宝药效学研究

养生宝是以绞股蓝，黄芪，白芍等制成的冲剂。小鼠以生药０．９和２．２５ｇ／ｋｇ，大鼠以生药０．６和１．５ｇ／ｋｇ，ｉｇ结果对正常和失血性虚小鼠有明显的补血作用，可提高正常和免疫功能低下大鼠的Ｔ细胞和ＮＫ细胞数量及大鼠胸腺和脾脏重量。     

去掉卵丘细胞或切开卵透明带对小鼠体外受精的影响

探讨了去掉小鼠卵子的卵丘细胞和人工切开透明带对小鼠体外受精的影响.结果表明,与卵丘卵母细胞复合体相比,用透明质酸酶去掉卵子的卵丘细胞后的体外受精率显著降低(分别为56%和12%-23%);当人工切开部分透明带后,卵子的体外受精率增至56%-87%(P＜0.01);与细胞质均质的卵子相比,细胞质不均卵子即使切开透明带也仅有19%-22%的卵子受精.结果表明,用透明质酸酶去掉小鼠卵子的卵丘细胞后,选择细胞均质的卵子并人工切开透明带,可提高小鼠的体外受精率.     

影响小鼠腔前卵泡体外发育因素的研究

通过在培养液中添加胎牛血清(FCS)、牛血清白蛋白(BSA)及卵泡刺激素(FSH),对小鼠腔前卵泡进行体外培养,观察卵泡腔的形成及雌二醇(Estradiolam,E2)和睾酮(Testosteroni propionas,T)的分泌情况.     

印楝油对小鼠的急性毒性试验和蓄积毒性研究

采用改良寇氏法进行了印楝油的急性毒性试验,采用固定剂量蓄积毒性系数法进行了蓄积毒性试验,以评价印楝油的安全性。在急性毒性试验中,给试验组小鼠灌服不同浓度的印楝油,观察给药后14d内小鼠的活动情况及死亡情况,采用改良寇氏公式计算LD50及可信限,测定了印楝油经口给药的LD50。蓄积毒性试验中,试验组小鼠采用固定剂量(1/5LD50)连续经口给药28d后,以蓄积系数评价其蓄积毒性,并对各组小鼠心、肝、脾、肺、肾的脏器系数及饲料利用率进行了测定。结果显示,印楝油经口的LD50为31.95g/kg;蓄积系数K大于5;试验组与对照组相比,饲料利用率与各脏器系数无明显差异(P0.05)。结果表明,印楝油属于实际无毒物质,且在小鼠体内几乎不具有蓄积毒性作用。     

双酚A对雄性小鼠睾丸发育和生殖激素分泌水平的影响

为研究不同剂量的双酚A(BPA)对雄性小鼠生殖系统的损伤作用,将25g左右的雄性小鼠40只随机分成对照组、BPA(10、50、100mg/kg)染毒组,每组10只,连续7d对小鼠腹腔注射BPA,对照组注射等量的橄榄油,1次/d,染毒结束后摘取并称量大鼠睾丸、附睾质量并计算脏器指数;光镜检测睾丸病理学改变;酶联免疫法检测血中睾丸酮、黄体生成素水平。结果显示,与对照组相比,小鼠睾丸重量、附睾重量及其脏器指数显著降低(P0.05,P0.01);双酚A组中的曲细精管部分支持细胞与生精细胞分离,生精细胞松散,无规律,各层细胞发生紊乱;随染毒剂量的增加,小鼠血清中睾丸酮和黄体生成素的含量逐渐降低,50mg/kg和100mg/kg两个剂量组睾丸酮和黄体生成素的浓度与对照组相比差异极显著(P0.01)。结果表明BPA可引起雄性小鼠生殖系统的损伤。