旋毛虫谷氨酸脱羧酶基因的原核表达及其活性研究

采用RT-PCR从旋毛虫中扩增出谷氨酸脱羧酶(TsGAD)基因全长,将其克隆到表达载体pET-30a(+)后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,应用比色法鉴定表达产物(rTsGAD)的酶活性,并用纯化的GAD蛋白制备多克隆抗体。结果显示,成功构建了重组质粒pET-30a(+)-TsGAD,经SDS-PAGE分析,rTsGAD蛋白的分子质量约为57ku。利用比色法测得粗提的rTsGAD具有酶活性,酶活力为1.5U。制备的多克隆抗体效价较高,可达1∶65 536。Western-blot分析结果显示,该多克隆抗体与TsGAD具有较强的反应性。结果表明,本试验成功原核表达了rTsGAD,并制备了多克隆抗体,为TsGAD定位以及进一步研究旋毛虫谷氨酸依赖型抗酸机制奠定了基础。     

代表建议推动构建和谐劳动关系

构建和谐劳动关系，切实维护广大劳动者的合法权益，是贯彻落实科学发展观、建设和谐社会的重要内容。随着经济社会的快速发展，因拖欠和克扣农民工工资而引发的劳动关系纠纷成为社会和群众关注的热点问题。在大连市甘井子区十六届人大一次会议上，人大代表提出的涉及劳动保障方面的建议、批评和意见达29件，占建议总数的14．6%。