口蹄疫流行毒株与疫苗毒株的生物学特性

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、高度接触性传染病。该病病原为口蹄疫病毒 ,属于小ＲＮＡ病毒科口蹄疫病毒属 ,包括Ａ、Ｏ、Ｃ、ＳＡＴⅠ、ＳＡＴⅡ、ＳＡＴⅢ ,ＡｓｉａⅠ 7个互不免疫的血清型 ,这7个血清型的口蹄疫病毒在长期感染动物的过程中 ,产生了许多变异毒株 ,目前已有 6 0余个亚型[1] 。本病传播途径多 ,传染性强 ,曾多次在一些国家或地区发生大流行 ,危害极大。 2 0世纪 80年代 ,口蹄疫在欧洲、南美洲、亚洲的许多国家暴发[2— 4 ] ,但其疫源众说纷云 ,难以定论。随着分子生物学技术的发展 ,从分子水平上追踪口蹄疫暴发的根源已成为…     

减毒沙门菌载体在肠道黏膜免疫方面的研究进展

为了更好地发挥减毒沙门菌活载体在肠道黏膜免疫中的优势作用,结合国内外的研究成果,论述了黏膜免疫系统的组成、肠道黏膜免疫机制和沙门菌侵染过程及其在DNA疫苗方面的应用等几方面内容,为研发更有效的黏膜免疫活载体疫苗奠定了理论基础。     

高校思想政治教育亲和力提升研究

亲和力是教育主体与客体在思想政治教育互动过程中表现出的感染力和吸引力,内涵极其丰富:从构成要素看,由教育主体亲和力、教育方法亲和力、教育内容亲和力、教育环境亲和力等要素组成。提升高校思想政治教育的亲和力是国家掌握意识形态话语权的客观需求,是高校立德树人的铸魂工程的重要手段,是解决思想政治教育现实困境的必要途径。因此,增强教育者的专业性,提高教育方法的灵活性,注重教育内容的针对性,促进教育环境的优质性,为高校培养新时代社会主义建设者和接班人指引方向。     

口蹄疫联合免疫的研究进展

理想的疫苗应具有良好的免疫原性，一次接种则可产生巩固的终生免疫力，且无副作用。现在我们离这种“理想疫苗”的要求尚很远。除少数疫苗外，大多数疫苗都需要注射若干次，才能获得持久免疫力。在实际生产过程中，每头家畜都要接种多种疫苗，不仅接种次数繁多，而且容易...     

商品疫苗对FMDV O/YNGM/97株的免疫效果评价

利用血清学方法对我国流行毒株O/YNGM/97进行鉴定.并对其生物学特性和免疫学特性进行了研究.结果显示,该流行毒株为O型12蹄疫病毒(FMDV),其对乳鼠和BHK21细胞的适应性比较好,致病性较强,LD50.和TCID50分别为10-6.33/0.2 mL和10-4.75/0.05 mL.VP1基因序列的比较结果显示,O/YNGM/97株与国外FMDV参考毒株O/TAI/1/92的同源性为91.4%,与国内疫苗毒株OZ/93、OA/58和OY/80的同源性分别为79.2%、83.6%和78.99/6.用商品疫苗OZ株、OY株口蹄疫O型灭活疫苗和牛羊.口蹄疫O-Asial型双价灭活疫苗免疫的小鼠均可产生较高的免疫抗体,并对流行毒株O/YNGM/97的攻击具有较好的保护性.说明,使用现有商品疫苗完全可以预防该毒株在我国的流行.     

泛亚型口蹄疫病毒O/China/99缺失毒株全长cDNA分子克隆的构建

设计并合成了4条O型口蹄疫病毒(FMDV)泛亚型代表毒株O/China/99基因组的引物,利用RT-PCR扩增各基因片段,酶切后连接到pOK12载体上,然后人工合成一段缺失PKs的5′UTR序列,利用两端的限制性内切酶位点,将该基因片段插入到上述载体中。酶切、PCR和序列测定结果显示,O/China/99株全基因组由8 200个核苷酸组成,构建的感染性cDNA与原毒株的核苷酸序列同源性为99.1%。结果表明,O/China/99缺失毒株全长cDNA分子克隆的构建成功。     

口蹄疫病毒P12A*3C基因转化饲草玉米高效表达载体的构建

为了研究饲草玉米可饲口蹄疫疫苗,将O型口蹄疫病毒的VP1和2A基因序列按照玉米的偏爱性密码子优化后,再与P1的其他基因及3C基因连接.同时,通过使用高效的Ubiquitin启动子以及在P1的起始密码子处添加Kozak序列和在3C基因3'末端添加内质网引导肽序列等措施提高免疫原基因的表达.结果显示,高效植物表达载体pC1300P12A*3C构建正确,可以用于后续的饲草玉米可饲口蹄疫疫苗的研究.     

口蹄疫病毒AF72株3D聚合酶的三维结构模拟和功能分析

为了研究口蹄疫病毒(FMDV)3D聚合酶的结构和功能,以A型FMDV AF72株RNA为模板,反转录并扩增目的基因,将PCR纯化产物与pGEM-T Easy栽体连接并转化JM109菌株,对经凝胶电泳、PCR和EcoR I酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序.并与GenBank中登录的其他4株FMDV完整参考序列进行比较,以确定AF72株3D聚合酶的核苷酸和氨基酸序列的保守区域,然后利用同源建模的方法建立AF72株3D聚合酶的三维结构.结果显示,3D聚合酶含有孔状活性区域.拉马钱德兰图证明,构建的3D聚合酶的空间结构是合理的.     

口蹄疫O-A-AsiaⅠ型三价灭活疫苗免疫效力和最小免疫剂量的研究

为确定口蹄疫O-A-AsiaⅠ型三价灭活疫苗的安全性和免疫效果,按OIE口蹄疫疫苗效检标准和我国口蹄疫灭活疫苗质量标准,对实验室条件下制备的4批疫苗进行了安全性试验、免疫效力试验、免疫持续期试验、疫苗保存期试验和最小免疫剂量试验。结果显示,4批疫苗均对靶动物和实验动物安全,无任何毒副反应;对O、A、AsiaⅠ型口蹄疫的平均免疫效力分别为4.73、6.84和8.10 PD50/头份;一次接种的有效免疫期达6个月;2~8℃下的疫苗保存期为12个月;适宜的免疫剂量为,6月龄以上牛每头3.0 mL,6月龄以下牛每头1.5 mL。该疫苗对接种动物安全,免疫效果良好,一次接种可同时预防O、A、AsiaⅠ型3个血清型的口蹄疫。     

应用BALB/c小鼠评价口蹄疫灭活疫苗的免疫效力

用不同剂量的口蹄疫灭活疫苗免疫3组雌性BALB/c小鼠,同时设空白对照组,每组8只。免疫后每7 d采血一次,用液相阻断ELISA(LPB-ELISA)检测血清抗体水平;第28 d用800LD50同源强毒攻击,攻毒后36 h,每组随机选取3只BALB/c小鼠,采全血,分别用每只BALB/c小鼠全血注射12只乳鼠,每组共注射36只乳鼠,以乳鼠试验判定BALB/c小鼠的病毒血症和攻毒保护情况。结果表明,免疫组BALB/c小鼠均可产生特异性抗体,保护率分别为75.0%、63.9%、36.1%;对照组小鼠血清抗体为阴性。提示,BALB/c小鼠可以用来评价口蹄疫灭活疫苗的免疫效力。