新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法的建立及其活性鉴定

采用倒置相差显微镜、环境扫描电子显微镜对新生24 h内SD大鼠大脑皮质原代培养的神经元进行了形态学观察,建立了大脑皮质神经元原代培养方法。应用2.5μg/mL阿糖胞苷(Ara-C)对培养3 d的神经元进行24 h干预,去除神经胶质细胞、成纤维细胞、神经干细胞等杂质细胞,以提高神经元产率;用Nissl’s染色法进行神经元鉴定;利用微量滴定(MTT)法测定了一个培养周期(约10 d)的神经元活性分布。光学显微镜观察结果表明,培养至第4 h绝大多数神经元已贴壁生长,胞体上可见1~2个细小突起;培养至第3 d、第6 d时,Nissl’s染色结果显示,加Ara-C能显著提高神经元纯度(≥92%);MTT结合形态学观察结果表明,神经元培养至第6 d时活性最强,细胞呈卵圆形、蜘蛛状、锥体状等多种形态,细胞胞体饱满,光晕明显,神经网络形成完整。     

幼龄绵羊腺垂体分泌TSH的季节和昼夜动态研究

本实验采用RIA法测定分析了8只幼龄绵羊血清中促甲状腺素(TSH)含量的季节和昼夜动态变化。结果表明,血清中TSH的年平均含量为9.193±2.24μIU/ml,年平均值昼夜变化,下午17时血清中TSH含量最高,为9.812±2.32μIU/ml,明显高于早晨8时的昼夜最低含量8.830±1.66μIU/ml,(P<0.05)。四季中冬季血清中TSH的浓度最高,昼夜平均值为11.991±0.74μIU/ml,极明显地高于其它三个季度(P<0.01)。 其次是春、秋季昼夜平均值为9.896±0.52μIU/ml和7.989±0.41μIU/ml。夏季血清中TSH浓度最低,昼夜均值为6.896±0.87μIU/ml。各季度血清中TSH含量的季节变化,有极显著的统计学差异(P<0.01)。但各季度TSH含量的昼夜变化,未发现明显差异。大部小绵羊血清中TSH含量,有较显著的个体差异。     

双峰驼在不同饮水条件下血清中促甲状腺激素三碘甲腺原氨酸和甲状腺素含量的动态研究

双峰驼血清中促甲状腺激素（ＴＳＨ）和甲状腺素（Ｔ４）在不同饮水条件下的含量均是冬季高于夏季。ＴＳＨ的正常含量冬夏均值为１０．２９ｍＩＵ／Ｌ，在禁水期和暴饮后，含量虽有波动，但无统计学差异。三碘甲腺原氨酸（Ｔ３）和Ｔ４正常含量为０．９９５和９９．５１μｇ／Ｌ。夏季禁水后９ｄ，两者的含量下降为０．６０４和７９．５４μｇ／Ｌ；１２ｄ时迅速增加超过正常值；１５ｄ时又急速下降接近９ｄ的水平；暴饮后更明显下降低于正常水平。冬季禁水后Ｔ４含量的变化与夏季相反，但升降变化无明显差异。上述结果表明，双峰驼在禁水期，甲状腺机能有降低趋势，可使代谢产热减少，呼吸变慢，由呼吸蒸发的水分减少，这是双峰驼节水耐渴的重要途径之一。     

鸡胚胎腺垂体糖蛋白激素α亚单位细胞的发育及其变化

应用免疫组织化学方法,对第3.5～20.5天鸡胚腺垂体糖蛋白激素α亚单位(PGHα)细胞的发生及其在发育过程中的变化规律进行了研究。结果,鸡胚发育的早期(第6.5天),可观察到少量明显的PGHα细胞分布于腺垂体前、后叶,随着胚胎的发育,PGHα细胞数量显著增加(P<0.05),分布于腺垂体前、后叶和结节部,且后叶PGHα细胞数多于前叶。早期PGHα细胞体积小、细胞浆少、细胞核大,随着胚龄的增加,细胞体积增大、细胞浆增多、细胞浆浓染。结果表明,鸡胚腺垂体PGHα细胞发生于胚胎发育的早期,细胞的增殖和分化过程发生在胚胎发育的中后期。     

高原甘加藏羊发情周期GnRHR基因在垂体和卵巢表达规律的研究

探究高原甘加藏羊发情周期促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因在垂体和卵巢组织中的表达规律,选取处于繁殖期健康未孕高原甘加藏羊48只,分为4组,每组12只,分别于发情前期、发情期、发情后期、间情期从甘加藏羊垂体和卵巢组织中提取总RNA,应用荧光定量RT-PCR方法,以GAPDH为内参,研究高原甘加藏羊发情周期垂体和卵巢组织中GnRHR基因表达的差异。结果显示:高原甘加藏羊整个发情周期不同阶段GnRHR mRNA在垂体和卵巢组织中均有表达。在甘加藏羊发情前期、发情期、发情后期、间情期垂体组织中GnRHR mRNA的相对表达量依次为0.8246±0.1739、1.5100±0.4187、0.2923±0.0202、1.0000±0.2100,其中发情期的相对表达量最高,与发情后期差异极显著(P0.01),与发情前期、间情期差异显著(P0.05);在卵巢组织中,GnRHR mRNA的相对表达量分别为1.0910±0.7665、0.5420±0.0763、1.3799±0.7452、1.0000±1.1221,其中发情后期的相对表达量最高,与发情期差异极显著(P0.01),与发情前期、间情期差异显著(P0.05)。这一研究结果为在分子水平上研究藏羊生殖活动调控机理提供了科学数据。     

鸡盲肠传出神经元分布的研究

将100~150 mL/L HRP水溶液注入成年母鸡左侧盲肠的浆膜下,研究鸡盲肠传出神经元的分布。结果表明:支配盲肠的交感节后神经元位于T3 LS1交感干神经节(占64.7%),峰值位于T5 T6交感干神经节,少数位于肾上腺神经节(占17.8%)和内脏神经节(占 17.5%);在肠神经内有大量标记细胞;在延脑迷走神经核中未出现标记的神经元;在盆神经内未看到被标记的支配盲肠的副交感节后神经元。     

小山羊腺垂体—甲状腺轴内分泌活动的季节及昼夜动态研究

用RIA法对6只6～15月龄去势沙能公山羊血清中T_3、T_4和TSH含量的季节及昼夜变化的测定表明,血清中T_3的年均含量1.709±0.45ng/ml,T_4 113.315±7.60ng/ml,TSH3.199±1.02μIU/ml。冬季含量最高,昼夜均值T_3 2.259±0.18ng/ml,T_4 168.671±12.84ng/ml,TSH4.454±0.34μIU/ml。春秋次之,夏季含量最低,日均值T_3 1.208±0.17ng/ml,T_4 63.495±6.38ng/ml,TSH2.078±0.59μIU/ml。三种激素的季节含量变化有极显著的季节差异(P<0.01),且含量变化是同步平行的,与外界气温升降成负相关,与动物机体代谢成正相关。T_3、T_4和TSH含量的昼夜变化无明显差异(P>0.05)。T_3、T_4含量的昼夜变化是同步平行的,而TSH的昼夜变化则不与T_3、T_4同步。山羊血清中T_3、T_4和TSH含量在多数个体间有明显差别。     

用辣根过氧化物酶标记法对鸡盲肠传入神经元分布的研究

用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）逆行标记法研究鸡盲肠感觉神经元的定位。结果表明，被标记的支配盲肠的初级传入神经元位于Ｔ２～ＬＳ１和ＬＳ８～ＬＳ１２脊神经节，峰值位于Ｔ５，Ｔ６，ＬＳ９和ＬＳ１０脊神经节；在颈静脉神经节、结状神经节和脊髓内未见到标记细胞。     

鸡胚胎腺垂体促肾上腺皮质激素细胞的发生及其变化

为了研究鸡胚胎腺垂体促肾上腺皮质激素 (ACTH )细胞的发生及其在发育过程中的变化 ,分别在鸡胚胎发育的第 3.5～ 2 0 .5d采集鸡胚胎垂体 ,利用免疫组织化学方法对鸡胚胎腺垂体ACTH细胞的发生、数量和形态分布变化规律进行了研究。结果 ,鸡胚胎发育早期 (10 .5d)可观察到少量明显的ACTH细胞分布于腺垂体前叶 ,随着胚胎的发育 ,ACTH细胞的数量明显增多 ,分布于整个腺垂体前叶。早期ACTH细胞体积小、细胞浆少、细胞核较大、细胞界限不清 ,随着胚龄的增加 ,ACTH细胞体积增大、细胞浆增多、细胞浆浓染。结果证明 ,鸡胚胎腺垂体ACTH细胞发生于胚胎发育的中期 ,细胞的增殖和分化过程发生在胚胎发育的中期至出壳前 ,而ACTH细胞的分泌功能在胚胎后期最活跃     

辣根过氧化物酶标记法研究鸡直肠传入神经元的分布

采用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法研究了鸡直肠感觉传入神经元的分布,证明鸡直肠脊神经感觉传入神经元集中分布于双侧T5~LS3和LS7~LS12脊神经节,峰值位于T7和LS10脊神经节;LS7~LS12区段脊神经节内标记细胞明显多于T5~LS3区段脊神经节内的标记细胞;标记细胞为椭圆形和圆形。