脂磷壁酸体外诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症模型的建立与评价

旨在通过脂磷壁酸(LTA)诱导的方法,体外建立奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)炎症模型,为奶牛乳腺炎的研究提供合理模型。采用Ⅱ型胶原酶消化法分离培养BMECs,利用差时胰酶消化法纯化BMECs。通过测定BMECs骨架蛋白——角蛋白18对所培养的细胞进行鉴定,以确定其为BMECs,并用LTA侵染BMECs,以培养细胞的形态学特征和炎性因子作为炎症发生和发展的判断指标。用不同质量浓度(0、10、20、40、80 g/m L)的LTA对BMECs作用不同时间(12、24、48 h),采用MTT法检测细胞活力;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)快速检测奶牛肿瘤坏死因子(TNF-α)和奶牛白细胞介素1β(IL-1β)的蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎性应答标志TNF-α和IL-1β基因的表达水平,以确定建立模型的最佳质量浓度与时间。结果表明,在体外培养的BMECs特异性蛋白——角蛋白18表达呈阳性;MTT、ELISA和qRT-PCR试验结果显示LTA质量浓度为40 g/m L时处理BMECs 24 h可明显提高TNF-α和IL-1β的蛋白和基因表达水平。     

义务教育阶段思想品德课的异化——基于生命课堂视角的分析

生命课堂因其鲜活性、互动性、生成性巳被众多的教师和教育工作者接受，教师对生命课堂理念的学习和实践，既促进了思想品德课在学生发展中的作用，又降低了思想品德课在学生发展中的作用。教师对生命课堂鲜活性、互动性、生成性等的课堂特征的误解，使生命课堂上师生关系、教学交往、教学目标的设置、现代科技的使用等方面出现异化．使学生个体认识被过分夸大、膨大，取消了由个体认识转挟为社会历史认识的重要过程；学生不能有效地接受信患、掌握知识、创新思维，活动能力也难以得到纠正和发展；学生的发展失去可供依赖的基础；学生陷入由过去的“人灌”变成了如今的“机灌”的状态。