鸡传染性支气管炎病毒四川分离株N基因DNA免疫质粒的构建

采用SDS 蛋白酶K法抽提鸡传染性支气管炎病毒(IBV)四川分离株SAIBWJ的基因组RNA,参照基因库中的N基因序列设计了1对引物,扩增出了单一的DNA产物。将该产物插入pUC18载体的HindⅢ和BamHⅠ酶切位点,构建了pUC NWJ质粒。序列测定结果表明,获得的克隆质粒包含了全部N基因。再将N基因亚克隆到pcDNA3.1( )载体的HindⅢ和XhoⅠ酶切位点,构建了IBVSAIBWJN基因的DNA免疫质粒pcDNA NWJ。     

加强班子团结应从四个方面着手

军队各级党委班子是部队统一领导和团结的核心.加强班子团结,既是贯彻落实科学发展观、全面推进部队现代化建设的应有之义和重要内容,更是履行我军历史使命的客观要求和关键所在。统一思想。明确方向,自觉打实团结的根基要实现志同道合,坚强团结,必须首先解决好三个问题:一是坚定政治信念。就是要自觉运用科学理论武装头     

猪囊虫抗原基因TS21的真核表达

构建了猪囊虫抗原基因TS2 1的VR10 2 0真核表达载体 ,以菌落原位杂交法筛选获得正确插入的重组质粒 ,用RNA印迹 (Northernblotting)和ELISA检测插入片段的转录及其翻译表达产物。结果 ,VTS2 1在真核细胞中能够转录TS2 1基因的mRNA ;兔抗猪囊虫超免疫血清可识别其蛋白表达产物 ,表明VTS2 1能正确表达猪囊虫抗原蛋白     

藏猪γ-干扰素基因cDNA的克隆及序列分析

将藏猪外周血淋巴细胞进行体外培养 ,在ConA的刺激下培养 70h后 ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR技术扩增藏猪淋巴细胞γ 干扰素cDNA(TPγ INF) ,并克隆到 pMD T载体上 ,进行测序。结果显示 :克隆的TPγ INFcDNA全长为 5 45个碱基 ,ORF为 5 0 1个碱基 ,编码 16 6个氨基酸 ,分子量为 19.4ku ,等电点为 10 .2 9。此cDNA与牛、马的γ INF同源性分别为86 %和 81% ,与猪的γ INF同源性为 10 0 % ,证明克隆到了藏猪的γ 干扰素cDNA。     

我为总书记讲坊城新村新变化

正5月11日下午,习总书记来到我们坊城新村考察脱贫巩固情况。总书记下车后,我上前首先作了自我介绍,并引导总书记来到移民搬迁新旧对比展板前,介绍了坊城新村的情况。总书记对着展板,用手指着我们旧村图片,问我":这都窑洞吗"?我说":是的"。后又指着一排相对整齐的窑洞问我":这是砖窑吗"?我说":是土窑用砖贴了个面"。总书记用手指着我们搬迁后的新村图片问我":这是你们搬迁房子吗"?我说":是的,每家三间瓦房共71平米,还有一个小院"。然后,总书记走进我们的黄花加工展厅、技能培训服务站、贫困户白高山家中。对于一名农村干部,能够当面聆听总书记的教     

大肠埃希氏菌和沙门菌氨基糖苷耐药基因PCR检测方法的建立

采用平板稀释法,选用氨基糖苷类药物链霉素、庆大霉素、卡那霉素和新霉素对22 株猪、鸡大肠埃希氏菌和30株猪、鸡沙门菌进行了药敏试验。结果显示,在4种药物中大肠埃希氏菌对卡那霉素的耐药率最高,达81.8%,而沙门菌则对链霉素的耐药率最高,达60%,两类细菌都对新霉素的耐药率最低。设计了5对引物,对耐药基因aph(3′) Ⅱ、aadA1、aadA2、aadB和aac(3) Ⅰa进行了扩增,获得的基因片段与预期的大小一致;序列分析表明,扩增产物与GenBank中的相应序列有很高的同源性(>99.8%)。采用建立的PCR技术,对22株猪、鸡大肠埃希氏菌和30 株猪、鸡沙门菌的耐药基因进行了检测,证实耐药基因普遍存在,在大肠埃希氏菌中aadA1 基因的检出率最高(12/22),在沙门菌中aph(3′) Ⅱ基因的检出率最高(18/30),在所有的菌株中都未能检测出aac(3) Ⅰa基因。     

成华猪淋巴细胞白细胞介素-4基因的克隆及序列分析

将猪外周淋巴细胞进行体外培养 ,在伴刀豆球蛋白A(ConA)的刺激下培养 48h ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 4(IL 4)基因 ,并克隆到pMD T载体测序。测序结果表明 ,IL 4基因的cDNA长度为 413bp ,开放阅读框为 40 2bp ,编码 13 4个氨基酸 ,分子量 15 .0ku ,等电点 8.2 4;与人和小鼠的IL 4基因编码的氨基酸序列的同源性分别为 60 %和 42 %。     

阳离子脂质体包裹CpG对猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗免疫效应的影响

对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细胞介素 2 (IL 2 )诱生活性和免疫细胞数量、血液IgG含量较仅注射三联疫苗的小鼠显著增加。说明阳离子脂质体包裹CpG能增强小鼠对三联疫苗的体液和细胞免疫应答反应 ,使疫苗的免疫原性增强     

企业办公室工作存在的问题及对策

企业办公室作为企业综合管理部门,担负着"参与政务,管理事务"的基本任务,并起着"上情下达,下情上报"的作用。办公室工作效率的高低,质量的好坏,直接影响着上级方针、政策和单位领导各种决策能否顺利贯彻。因此,正确认识办公室在企业中的位置,分析目前办公室存在的问题,采取切实有效的措施,确保办公室工作到位,使办公室工作更好地为企业领导、职能部门和职工群众服务,具有十分重要的现实意义。     

CpG序列对副伤寒疫苗免疫小鼠应答反应的影响

研究了CpG序列作为分子免疫增强剂 ,对常规副伤寒疫苗免疫小鼠后 ,小鼠体液和细胞免疫反应的变化情况。试验结果显示 ,CpG序列作为免疫增强剂 ,可以使免疫小鼠的总IgG含量、血清特异性抗体效价、淋巴细胞IL 2的诱生活性和脾淋巴细胞的增殖反应有明显的提高。结果表明 ,CpG序列能显著增强免疫动物对常规疫苗的免疫应答反应水平 ,可以作为提高疫苗免疫效果的有效途径