H9亚型禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立

通过分析流感数据库中123个HA序列,根据HA保守区序列设计并合成了1对引物,建立了一步法RT-PCR检测方法,预期扩增片段大小为732 bp。通过对H9亚型禽流感病毒(AIV)不同稀释度的尿囊液和棉拭子浸出液进行检测,证实病毒尿囊液的最低检出量为1×104.7EID50/mL;阳性棉拭子的最低检出量为1×102.5EID50/mL。用该方法检测H1~H15亚型AIV和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原,结果仅有H9亚型AIV出现特异性目的条带,而其他均未出现目的条带。脏器及咽喉、泄殖腔棉拭子样品在1∶10稀释度下,病毒分离和RT-PCR方法可以达到相同的阳性检出率。表明建立的AIV H9亚型RT-PCR方法具有较好的特异性和敏感性。     

禽流感病毒等RNA病毒鉴别基因芯片的制备

将克隆和鉴定的AIV的HA、NA、M、NS、NP基因以及NDV、IBDV,IBV的保守基因片段作为探针,同时以克隆的GAPDH基因作为阳性对照,利用芯片点样系统spotArray<'TM>24将探针与阳性对照、阴性对照和空白对照按照设计好的阵列点在基片上,制备了AIV等RNA病毒诊断芯片,并从点样条件和杂交条件两个方面进行了优化.结果显示,探针浓度在300～1 200 μg/mL时点样,Cy3-dUTP终浓度为0.05μmol/mL,杂交温度在42℃,杂交时间在8～12 h时,杂交信号比较理想.该方法对20份已鉴定的H5N1亚型禽流感病毒的检出率为100%(20/20);10份现地送检的疑似AIV样品的检出率为70%(7/10),检测结果与RT-PCR和鸡胚传代分离鉴定的符合率为100%.结果表明,制备的DNA芯片可有效诊断上述病毒.     

风雅词:用“别是一体”解“别是一家”

南宋词坛,姜夔所开创的风雅词继承了宋词柔媚婉转的特色,注重词律,保持了词作音乐的完整性。同时借鉴豪放派的风格,将抒发文人情怀注入词的表现内容之中,完成了对豪放和婉约的融合,并使词进一步风雅化。这种词风的形成,与南宋的社会状况、文人的布衣化倾向及有关。     

内蒙古县域经济工业化发展水平的差异分析

内蒙古自治区县域经济的工业化发展水平存在一定的差异性,本文将内蒙古县域划分为东部、中部和西部三部分地区,通过对三部分地区的GDP、工业增加值和工业化率等指标的比较研究,系统分析了不同地域特色的内蒙古县域经济的工业化现状,并进一步提出各旗县应该依托自身的区位优势和自然禀赋发展适合自身的强县战略,强化三地区经济合作,从而加快全区县域经济工业化发展的进程。     

蒙古文学中马形象的精神内涵

正马、人和草原是蒙古高原最动人的音符。草原文明数千年的发展进程中,一直是人不离马、马不离人。在北方草原,人和马肝胆相照、平等相待,共同走过了漫长的激情岁月。在血与肉、生与死的命运洗礼中,马以超越其天然兽性的灵性和悟性,成为草原人民最崇信的生命伙伴和最神圣的赞美对象。在草原文明创造者们的认知世界中,马不仅是五畜之首,更是生活相伴的挚友     

德育琐谈

德育是培养德智体全面发展高素质人才的主要形式,也是高校学生思想政治工作的重要组成部分。在新的历史条件下,如何教育引导高校学生树立正确的世界观、人生观、价值观,创新学生思想政治工作,是摆在高校德育工作者面前的重要课题。 首先,要与时俱进地把“三个代表”重要思想作为高校德育工作的重要内容,构建有效导控学生思想观念、道德情操和价值取向的新坐标体系。要求高校德育工作者立足     

清代内蒙古地区灾荒成因分析

清代内蒙古地区自然灾害发生频繁 ,且灾情较为严重 ,致使本区灾荒不断。本文在《清实录》这一主要史料来源的基础上 ,从自然环境及人类活动的视角 ,对清代内蒙古地区灾荒成因进行了剖析。文章旨在通过对灾荒的历史研究 ,了解本区自然灾害发生的历史状况 ,以希对现实的灾害预防及社会危害的减免有所启示     

价值观念的转型与中国的可持续发展

产业革命以来，在以片面追求经济增长为主要价值取向的传统价值观念的作用下，人们不合理的经济行为，为自己的生存与发展带来了一系列全球性生态环境问题，这些问题的产生已对人类自身在更高层次上的发展构成严重威胁。为此，认真反思传统价值观的负面效应，冷静厘定现实的价值座标和未来的价值取向，积极促进传统价值观向注重经济、社会、生态三位一体的新型模式转换，这对中国在实践层面上真正达到可持续发展，无疑具有重要的理论及现实意义。一、传统价值观的危害与新价值观的确立1、传统价值观念的危害传统价值观念以追求极大的物质丰…     

当代大学生自由意识探析

在公民学视角下,自由并不是为所欲为的,它受到法律、道德、规律、人的认识能力、社会风俗和舆论的限制和制约.大学生要想树立正确的自由意识,就需要在法理下追求自由,在现实的基础上追求自由,更要理性地追求自由.     

禽流感病毒N8亚型神经氨酸酶基因的克隆和全序列分析

用SPF鸡胚增殖禽流感病毒A/Duck/Australia/341/83(H15N8),通过RT-PCR获得了NA基因全长,连接并转化,增菌培养后,提取阳性质粒进行序列测定,获得了禽流感病毒N8亚型的NA基因序列,分析了NA8基因与其他流感病毒神经氨酸酶基因的相互关系。结果显示,所获得的NA基因片段全长1459bp,最大开放阅读框编码457个氨基酸残基,经Blast分析,该基因与GenBank中其他13株N8亚型毒株的NA基因核苷酸序列同源性为91.6%～73.3%。与其他8个N1～N9亚型NA基因进行遗传演化分析,N8亚型与N5亚型NA基因的亲缘关系最近,与N3亚型NA基因的亲缘关系最远。结果表明,禽流感病毒N8亚型NA基因序列的测定对N8亚型流感病毒的诊断和预防具有重要意义。