旋毛虫p46000抗原基因的转录及表达特性鉴定

根据旋毛虫p46000抗原基因和葡萄糖3一磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因序列设计特异引物,以不同发育时期旋毛虫总RNA为模板进行SYBR Green染料法实时定量RT-PCR检测p46000基因转录情况.制作不同发育时期旋毛虫虫体及感染组织石蜡切片,采用免疫荧光染色技术检测p46000抗原的表达及定位情况.结果显示,p46000抗原基因在旋毛虫不同发育时期均有转录,但转录水平有明显差异,转录高峰集中于成虫和肌幼虫期,新生幼虫期明显低于其他时期.天然p46000抗原蛋白定位于杆状体和虫体表面,表达高峰集中于成虫、肠道期及成囊期肌幼虫.表明,p46000抗原基因的转录与表达具有一定的时空特异性.该基因在旋毛虫的寄生过程中尤其在早期感染中具有重要作用且可能与旋毛虫的免疫逃避有关.     

旋毛虫5日龄成虫期特异性基因片段的克隆及鉴定

利用差减抑制杂交(SSH)技术,以旋毛虫5日龄成虫的cDNA为试验方(tester),以肌幼虫+3日龄成虫的cDNA为驱动方(driver),制备5日龄成虫差减cDNA,并与pT-Adv载体相连接,转入大肠埃希氏菌TOP 10F.以试验方的差减cDNA PCR产物+未差减cDNA为试验方探针,以驱动方的差减cDNA PCR产物+未差减cDNA为驱动方探针,对5日龄成虫差减cDNA克隆进行初步筛选,对筛选到的阳性克隆进一步用southern blot进行鉴定,并对其测序,进行序列分析.结果表明,获得1个大小为464 bp的旋毛虫5日龄成虫期特异性cDNA片段,经BLAST软件分析表明,该序列是1个未见报道的旋毛虫基因序列片段,可能编码1种表皮胶原蛋白.这为旋毛虫5日龄成虫期特异性基因全长序列的钓取、分析及鉴定奠定了基础.     

自觉强化“两种意识”做好部队财务工作

深入学习实践“三个代表”重要思想,认真贯彻江泽民国防和军队建设思想,是当前和今后一个时期党、国家和军队建设的首要任务。按照发展战略,由于受国家经济实力所限,我军军费供需矛盾突出的问题不可避免。新的形势、新的任务给军队财经工作带来了新的机遇和新的挑战,同时,也对财务干部、特别是机关财务干部提出了更新、更高的要求。作为军队财务工作者,必须强化“两种意识”,积极开创财务工作新局面,谋求财务工作新发展,以适应军队改革、建设和发展的需要。一、强化法规意识做好财务工作,说到底就是必须认真落实江主席关于治军一定要严的一…     

旋毛虫丝氨酸蛋白酶基因的克隆与分析

以旋毛虫感染猪血清为抗体探针,对旋毛虫3日龄成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的阳性克隆进行测序,用分子生物学软件对所得cDNA序列进行了分析.序列分析结果显示,阳性克隆Zh68 cDNA全长为1 372 bp,含有1个1 287 bp的完整的开放阅读框架,编码由429个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为47.5 ku,等电点为8.45.SMART分析表明,1～18位氨基酸为信号肽序列,37～277位氨基酸为典型的丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶类结构域,其中His88、Asp142、Ser233为催化中心的3个主要氨基酸残基,78～80位氨基酸为N-糖基化位点(NCS),另外还有6个保守的Cys形成二硫键.BLASTn同源性分析表明,与其他生物丝氨酸蛋白酶的基因序列无明显的同源性,为1个新的cDNA分子.BLASTp蛋白质同源性分析表明,与丝氨酸蛋白酶的同源性为30%左右.Southern-blot杂交表明,此基因在旋毛虫基因组中属于多基因家族,具有基因多态性.cDNA的PCR结果表明,此基因在旋毛虫肌幼虫、新生幼虫及成虫期均有表达.     

旋毛虫新生幼虫cDNA文库的构建

为了克隆和研究旋毛虫新生幼虫功能性抗原基因,采用酸性异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取新生幼虫总RNA,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA,反转录合成第一链cDNA及第二链cDNA,用CHROMA SPIN-400柱离心层析纯化后,与载体λZAP Express连接.体外包装后得到中国猪旋毛虫(Trichinella spiralis)分离株新生幼虫cDNA文库.文库容量为2.0×106,重组率为98.6%,插入片段长度在0.4×103-2.0×103bp.     

卢强“不让美国大停电在中国重演”

自从1831年著名物理学家达拉第制造出世界上第一台发电机匕来，人类试图驾驭电力系统的努士就从来没有停止过。然而，随着现什科技的进步，人类对电力系统的信赖程度也达到了惊人的程度——频率的一个闪动会在工厂里造成堆私如山的废品，一次短暂的停电造成的损失不亚于一场大地震。如何保障电力系统的安全成为横亘在社会现代化进程面前的一道深渊。1984年秋，正在美国华盛顿大学从事最尖端的非线性系统微分几何理论研究的数学家们发现，研究小组里多了一位来自中国的电力专家。他勤奋地工作和学习，很快掌握了这一当时还没有公开发表的理论…     

操作系统双边平台交叉网络效应实证分析

双边市场理论的研究中，交叉网络效应是一个很重要的理论基础，而在交叉网络效应的研究中，学者们的研究大多从产业组织理论的角度进行了理论的分析和假设，而没有学者就交叉网络效应进行经验数据的计量经济学研究。本文以Linux操作系统软件双边平台为例，收集了两边市场的数据，通过分布式滞后模型以及Granger因果检验，证实了双边的市场数据具有明显的相关性和因果效应，较好地检验了作为双边市场理论基础的交叉网络效应的存在。     

旋毛虫cystatin-like基因重组蛋白诊断特性的鉴定

为鉴定旋毛虫肠道期肌幼虫cystatin-like基因重组蛋白的诊断特性,利用ELISA方法,以旋毛虫cystatin-like基因重组蛋白作为包被抗原,并以旋毛虫感染早期肠道6 h幼虫ES抗原作为阳性对照,用不同旋毛虫感染剂量、不同感染时间小鼠血清为一抗,检测血清中抗旋毛虫Ig G抗体的变化情况,利用Excel软件绘制出Ig G抗体消长规律曲线并进行数据分析,鉴定该基因重组蛋白作为诊断抗原时的敏感性及诊断效果。结果显示,在低剂量感染和高剂量感染时,该基因重组抗原分别从感染后第10天和第8天起可以稳定地检测出抗旋毛虫Ig G抗体;在感染后第11天至第45天一直呈"波峰波谷"式并维持较高水平;感染早期(第15~45天)低剂量感染组的Ig G抗体水平明显高于高剂量组。由此推断,旋毛虫cystatin-like基因重组蛋白具有很好的早期诊断特性,尤其对低剂量早期感染的诊断效果更佳,并推测该基因极有可能在旋毛虫感染早期对宿主的免疫抑制作用中起重要作用,其具体应用前景和生物学功能还有待于进一步研究。     

美国"亡羊",中国"补牢"次级债危机对中国房产金融市场的警示

信贷史上"最大的泡沫"破产 　　8月9日美国股市开盘瞬间就发生跳水,道琼斯30种工业股票平均价格指数比前一个交易日下跌387.18点,收于13270.68点,跌幅达2.83%,标准普尔500种股票指数跌幅2.96%,纳斯达克综合指数跌幅2.16%.同日,欧洲三大股指-伦敦股市《金融时报》100种股票平均价格、法兰克福股市DAX指数和巴黎股市CAC40指数也有较大幅度下跌.各国央行为了增强投资者信心,稳定金融市场,纷纷向银行系统进行大规模的注资,但此举并没有阻挡全球股票指数回落. 　　……     

提高高校思想政治教育实效性的方法探析

在高校思想政治教育中,实效性缺失成为亟待解决的问题。提高实效性应逐渐成为加强和改进大学生思想政治教育的关键。文章在对高校思想政治教育实效性缺失产生的原因进行分析的基础上,对改进高校思想政治教育方法,切实提高高校思想政治教育的实效性,提出了有针对性的建议。