非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的快速诊断方法,本研究根据ASFV SY18株p17蛋白的编码基因D117L的保守序列设计并合成引物和探针,建立了基于ASFV p17蛋白的编码基因D117L的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法的C_t值与标准品在1×10^9~1×10^1copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-3.192,检测下限为10 copies/μL,且与其他能引起相似症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.920 7%,重复性好。此方法可用于ASF的早期诊断和ASFV快速检测。     

关注人才歧视

人才歧视是目前人才市场中存在的一种普遍现象。这既不利于形成人才使用的综合效益,也不利于人才自身的成长进步和用人单位自身事业的发展。因此,只有更新人才观念,科学识才用才;畅通就业渠道,促进人才就业;加大改革力度,消除体制性障碍;加快立法进程,用法律保障人才地位平等,才能加快人才队伍建设,更好地实施人才强国战略。     

《新湘评论》能办成全国一流的地方党刊

《新湘评论》是一本融思想性、书卷气、可读性于一体的好党刊。杂志更名改版时间不长，但社会影响越来越大。毛主席亲笔题写刊名，封面设计开张大气，拿到更名改版后第一期杂志就觉得《新湘评论》有大刊气势。后来，经常在杂志上看到名家、读到精品，     

关注人才歧视

表现人才歧视是目前人才市场中一种比较普遍的现象,有着种种表现:1.年龄歧视。最常见的是要求年龄在35岁以下。如某用人单位招聘广告要求“男35岁以下、女26岁以下”。2.性别歧视。主要是歧视女性。去年4月,在哈尔滨某大学举办的毕业生招聘大会上,一家企业在招聘广告上竟堂而皇之的标明:“只招男生,女生免谈”。前不久,北京一场专为女大学生量身定做的招聘会,因邀请不到用人单位而宣告流产。也有部分服务行业招聘员工“只招女性”。3.学历歧视。用人单位要求“本科以上文化”、“全日制大学毕业”比较普遍,少数单位甚至提出只招“硕士、博士…     

多些“剪刀书记”

湖南企江县一位乡党委副书记周复坤，时常带一把剪刀走村串户，帮助农户修剪果树、传播农村实用技术，全乡许多农户依靠科技脱了贫，人们亲热地称他为“剪刀书记”。老周在当地威信很高，只要他一到场，群众就会自发‘丁周书记的”。周复神能赢得群众拥戴，最大的原因恐怕是他懂科技、用科技、依靠科技帮助群众解决了实际困难。乡村干部被群众称为“万金油干部”，擦在哪里都可“止痒消痛”，这就少不了科技知识。当今农村，单靠嘴皮子做工作已无法满足农民兄弟的要求。农民渴望更多的乡村干部带领他们学科技、学知识、学法律，引导他们种什…     

猴源天然免疫限制性因子SAMHD1单克隆抗体的制备与鉴定

为制备具有广谱反应性的SAMHD1单克隆抗体,通过提取Marc-145细胞的总RNA,采用RTPCR将SAMHD1全长编码基因定向克隆至pCold-TF原核表达载体中,成功构建了重组质粒pColdmSAMHD1。重组质粒转化大肠杆菌Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达并通过纯化获得了可溶性的重组SAMHD1蛋白。以纯化的重组SAMHD1蛋白为抗原,免疫8周龄BALB/c小鼠,通过间接ELISA和5次杂交瘤细胞亚克隆,筛选出1株针对SAMHD1蛋白的单克隆抗体,遂被命名为M2D9。Western-blot分析显示,M2D9能够与SAMHD1真核表达蛋白以及细胞内源性SAMHD1蛋白发生特异性反应,且具有很好的免疫沉淀效价。交叉反应性鉴定结果显示,M2D9抗体能够与人、鼠源细胞内SAMHD1蛋白发生特异反应。本研究成功获得了具有特异性和广谱反应性的猴源SAMHD1单克隆抗体,可用于ELISA检测、Western-blot分析和免疫沉淀试验,为SAMHD1蛋白功能的深入研究奠定了基础。     

攀登精神的高原

到底是一种什么力量，使党中央和毛泽东等老一辈无产阶级革命家，在极其艰难困苦的复杂环境中，始终保持着革命乐观主义精神，领导了抗日战争和解放战争，引领着中华民族从胜利走向胜利？     

下乡穿什么鞋

有单位组织干部下乡，临行前，组织者特意交待：大家要穿跑鞋或布鞋，不要穿皮鞋。由此，笔者不免疑惑：下乡到底该穿什么鞋？ 干部下乡注意在小节上贴近群众当然必要，正所谓“‘朴素的行装会说话”。一身便装、一包中低档烟、一席体恤关爱的家常话，这样的干部下来，即使没带来什么钱物，老百姓也是欢迎的。不能想像一个生怕皮鞋沾了点泥、裤子粘了点灰的下乡干部能为群众办多少实事。 但是，干部下乡关键是心里要装着群众。“剪刀书记”周福坤带把剪刀走村串户、指导农户发展果木；某“乡土法官”把法律送到田头地角，逐村逐组调处纠纷；…     

猪IFN-γ mRNA TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立一种检测猪γ-干扰素(IFN-γ)的荧光定量RT-PCR方法,针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A(CyPA)的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18-T-CyPA为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建猪IFN一γ mRNA和CyPA的荧光定量RT-PCR标准曲线.结果表明,建立的方法在1×101～1×107copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数r2均高达0.999,扩增效率均高于99.0%;可检测至少为100 copies的阳性标准品.该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复性好等特点,可应用于临床样品的检测.