氯霉素残留伏安免疫测试法的电化学条件

在间接竞争ELISA的基础上,建立了以碱性磷酸酶(ALP)-对硝基苯磷酸(pNPP)为反应体系的检测氯霉素(CAP)残留的伏安免疫方法,并对此法的电化学条件进行了详细的探讨。结果,在0.2 mol/L的B-R电解质溶液(pH3.0)中,当扫描速度为50 mV/s时,伏安法对硝基苯酚(PNP)的灵敏度最佳;且在1.2V处,该物质具有良好的氧化峰形。用此法测试CAP的检测下限达到0.064 ng/mL,检测线性范围为0.15~600 ng/mL。     

牛乳中氯霉素残留的聚乙烯亚胺-纳米金修饰电极测定

用聚乙烯亚胺一纳米金修饰玻碳电极,建立了检测牛乳样品中氯霉素残留量的高灵敏度的电化学新方法,并研究了氯霉素在该修饰电极上的伏安行为及测定方法.与裸电极相比,以导数循环伏安法(DCV)利用AU-colloid-PEI修饰电极进行氯霉素的电化学检测时,在-0.41 V处氯霉素的还原峰电流值极显著提高.运用这种修饰电极检测氯霉素的线性范围为0.017～12 mg/L,检测限达到1.15μg/L.详细讨论了其他条件对Au-colloid-PEI修饰电极测试氯霉素残留的影响.在优化条件下对牛乳样品的检测表明,该方法检测氯霉素的回收率达96.82%,准确率达99%以上,平均每份样品的检测时间为4 min.     

iNOS基因和VEGF基因在氟致甲状腺肿大鼠甲状腺组织中的表达

为探讨氟致甲状腺肿大的分子机理,选用4周龄SD大鼠饮用不同浓度的NaF水溶液,复制了氟中毒致大鼠甲状腺肿模型,光镜下观察了甲状腺的形态结构变化,并用RT-PCR技术检测了甲状腺组织中iNOS mRNA和VEGF mRNA的表达情况.结果,氟中毒大鼠甲状腺微血管明显扩张、增生,表现为明显的结节性甲状腺肿;与正常对照组大鼠相比,氟中毒组大鼠甲状腺组织中iNOS mRNA和VEGF mRNA的表达水平显著升高(P＜0.05).结果表明,长期摄入过量氟导致甲状腺发生结节性肿大的机理之一是,氟可刺激甲状腺中iNOS基因和VEGF基因的过量表达,进而造成甲状腺组织内微血管增生.     

铜缺乏乳牛脑脊液乙酰胆碱酯酶同工酶谱变化特征

选择铜缺乏症高发区具有明显摇摆症状的乳牛6头,用PAGE电泳法分离脑脊液乙酰胆碱酯酶(ACHE),经特异性酶化学染色后以双波长扫描法测定ACHE同工酶的活性,同时采集6头健康乳牛的脑脊液样品作为对照.结果表明,90 mL/L聚丙烯酰胺凝胶可将脑脊液胆碱酯酶分成4条区带;发病组乳牛脑脊液ACHE同工酶ACHEⅡ、ACHEⅢ、ACHEⅣ活性显著高于对照组(P＜0.05),其ACHE Ⅰ及ACHEⅢ/ACHE Ⅰ活性显著低于对照组(P＜0.05).表明乳牛脑脊液ACHE同工酶活性的改变与体内铜缺乏有关,并能够反映神经系统的损伤程度.     

氟对鸡甲状腺过氧化物酶活性的影响

选用1日龄蛋用鸡250只,随机分为5组,每组50只,饲喂相同的全价日粮.第1组为正常对照组,第2、3、4和5组在日粮中添加不同剂量的氟化钠,使日粮中氟的含量分别为500、1 000、1 500和2 000 mg/kg,试验期为150 d.每隔30 d采集血样,测定血清中氟含量及甲状腺匀浆中甲状腺过氧化物酶(TPO)活性.结果表明,本试验成功地复制出了不同程度的鸡慢性氟中毒模型,氟中毒各组鸡甲状腺匀浆中TPO活性均有不同程度的降低,而且TPO活性与血清氟含量呈显著的负相关(r=-0.778,P＜0.01).说明氟能抑制TPO的活性,破坏甲状腺中TPO的代谢.     

过氧化氢酶-氯霉素偶联物的合成及其结合比的测定

利用混合酸酐法合成了氯霉素琥珀酸酯衍生物．再用碳二亚胺将该衍生物与过氧化氢酶偶联,用紫外分光光度法测定已纯化的偶联物中氯霉素与过氧化氢酶的结合比。结果,偶联物中氯霉素与过氧化氢酶的结合比达到30．67:1,偶联物中过氧化氢酶的活性损失约30％。结果表明,该偶联物可作为竞争性ELISA法或免疫传感器法测试氯霉素时所需的酶标抗原。     

用于检测盐酸克伦特罗残留的免疫传感器感受器部件的研制

为研制用于检测农产品中盐酸克伦特罗残留的免疫传感器的分子识别元件———感受器 ,用二醋酸纤维素作为载体支架结构 ,戊二醛作为交联剂 ,己二胺作为制孔剂 ,对制备载体膜的最佳方案进行了筛选 ,制备出了符合标准的载体膜。而后用效价为 1∶4 0 0的抗盐酸克伦特罗抗体包被膜与酶标抗原偶联 ,在测定体系中检测过氧化氢的减少量 ,以衡量感受器部件的灵敏度 ,并用标准品测定其最低检测限 ,同时设质控膜。结果表明 ,质控膜和测定膜的电流变化值差异显著 (P <0 .0 5 ) ,感受器部件反应灵敏 ,最低检测限达 0 .3μg/L。     

唾液酸和糖胺多糖在鸡慢性氟中毒早期诊断中的意义

为探讨唾液酸(SA)、糖胺多糖(GAG)在鸡慢性氟中毒早期诊断中的意义,以期筛选出诊断慢性氟中毒早期的敏感指标,选用250只1日龄罗曼蛋鸡,随机分为5组,每组50只,饲喂相同的全价日粮.Ⅰ组为正常对照组,Ⅱ～Ⅴ组在日粮中添加不同水平的氟化钠,使日粮中氟含量分别为500、1000、1500和2000mg/kg,试验期为150 d,每隔30 d采集血样1次,测定血清中氟、SA、GAG的含量,观察试验鸡的临床表现.结果,试验成功地复制出不同程度的鸡慢性氟中毒模型;饲料中所加氟量与血清中氟含量呈明显的剂量-效应关系;氟中毒组鸡血清中SA含量均低于对照组,而血清中GAG含量则均高于对照组;血清中氟含量与SA含量呈显著的负相关(r=-0.773,P＜0.01),与GAG含量则呈显著的正相关(r=0.798,P＜0.01);各中毒组SA/GAG值与正常值相比降低30%以上.由此可见,氟中毒可明显影响机体内SA、GAG的代谢,血清中SA、GAG含量的变化可灵敏地反映氟对机体的损伤情况.可将SA/GAG值降低30%或更多作为鸡慢性氟中毒的敏感、可靠的早期诊断指标.     

犬胆囊X线造影检查方法的研究

为探讨犬胆囊和胆管X线造影检查的最佳途径及阐述造影影像与脏器部分生理功能之间的关系,按照自身循环对照设计对5只犬采用口服法及静脉注射法胆囊造影;用双盲法进行读片.结果表明,通过循环试验获得的投照条件表可用于各项造影检查,并取得满意效果.口服碘番酸法胆囊造影更好地显示了胆囊结构;而静脉注射胆影葡胺胆系造影更清楚地显示了胆道系统影像;运用盐酸山莨菪碱(654-2)可延迟胆管、胆囊显影时间,但使胆管显影效果更好.     

铜缺乏对乳牛细胞色素氧化酶组化特征的影响

为探讨铜缺乏对乳牛心、肝、肾细胞色素氧化酶(CCO)组化特征(分布特点及活性)的影响,本试验选择铜缺乏症高发区自然发病的乳犊牛6头,剖杀后采集心、肝、肾作冰冻切片及酶组织化染色,以6头同年生健康乳犊牛为对照.结果表明,铜缺乏病牛组织中CCO的活性显著低于对照组(P＜0.05),发病乳牛组织中CCO酶颗粒的分布也发生特征性的变化,表明铜酶活性的改变是导致乳牛铜缺乏症病理过程的重要原因.