多重置换扩增在病理切片DNA分型中的应用

目的探讨多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)技术应用于法医学组织病理切片DNA分型的可行性。方法采用重复拉丁方设计实验,按保存时间、组织类型、尸源年龄3个因素分7个水平进行随机分组,共制作98例病理切片。硅珠法制备DNA模板,对照组直接采用AmpFlSTR IdentifilerTM试剂盒进行PCR扩增,实验组进行MDA后再进行扩增。以新鲜尸体组织的分型结果为标准,对比分析切片实验组与对照组的基因座检出数与检出率。结果各保存时间切片实验组与对照组的基因座检出率相比差异有统计学意义(P0.01);组织切片保存时间为360 d以内,实验组的16个基因座检出率均可达到95%以上。各组织类型间的差异具有统计学意义(P0.01),而尸源年龄组间差异无统计学意义(P0.01)。结论 MDA可提高病理切片模板基因组量,相对降低PCR扩增抑制物浓度,减少等位基因脱扣现象,有效提高基因座检出率,MDA在法医切片DNA分型中具有运用价值,但应注意切片保存时间与组织类型等因素对分型结果的影响。     

皖南地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性

目前,短串联重复序列（short tandem repeat,STR）分型检测已被广泛应用于国内外法医学个人识别和亲权鉴定中。本文采用Identifiler荧光标记复合扩增系统对皖南地区汉族人群15个STR基因座（D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO、D3S1358、TH01、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、vWA、TPOX、D18S51、D5S818和FGA）遗传多态性进行调查,为法医学个体识别、     

酶标2G8单克隆抗体斑点ELISA快速检验人血痕G2m(23)因子

利用自制的抗人 G2m(23)酶标2G8酶标单克隆抗体,首次应用直接斑点 ELISA 方法检测血痕中 G2m(23)因子。该法最小检出量为0.000048μl 血清;整个试验可在15分钟内完成。对常见的13种动物血和8种鱼血无交叉反应;盲测450例干血痕结果全部正确。该方法具有快速、准确、灵敏、简便等特点,有较大的实用价值。     

人结合珠蛋白抗血清的制备

本文介绍了离子交换色谱及凝胶过滤色谱,从人血浆中初步纯化出人结合珠蛋白(HAPTOGLOBIN,HP)抗原,对家兔进行免疫制备出Hp粗抗血清,再经固相吸收精制获得特异性的抗Hp血清。     

抗人同种异型G2m(23)单克隆抗体研制及特异性鉴定

本文用快速液相色谱（FPLC）从G2m（23）阳性人血浆中纯化出IgG2蛋白，免疫BALB/c小鼠，建立了一株分泌抗人G2m（23）单克隆抗体的细胞株，定名为2G8。经抑制ELISA，双抗体ELISA及斑点ELISA分析，证明2G8抗体具有G2m（23）单一特异性。     

抗人同种异型G1m(3)单克隆抗体研制及特异性鉴定

用快速液相色谱仪从G1m（3）阳性人血浆中纯化IgG1蛋白，用其免疫BALB／C／小鼠．建立了一株分泌抗人G1m（3）单克隆抗体的细胞株（D7E8）。经抑制ELISA，直接ELISA及斑点ELISA分析，证明D7E8抗体具有G1m（3）单一特异性。其培养上清液效价为512倍，并初步应用于法医办案。