磷对成骨细胞超微结构及其GJIC和Ⅰ型胶原含量的影响

在体外培养成骨细胞(OB)的基础上,添加0、1、2、4mmol/L磷,作用2d后,采用电子显微镜观察OB的超微结构,采用划痕标记染料示踪技术观察细胞间隙连接通讯(GJIC);作用2、5、8d后,用BCA法蛋白定量试剂盒、Goat Anti-rat Collagen TypeⅠ试剂盒分别检测OB内总蛋白及Ⅰ型胶原的含量,并用DⅠ型胶原/D总蛋白表示Ⅰ型胶原的含量。结果显示,作用2d,4mmol/L磷组OB内线粒体减少、肿胀。4mmol/L磷组GJIC的荧光扩散距离减弱,1、2mmol/L磷组基本不变;就Ⅰ型胶原含量而言,除1mmol/L磷组在作用2d抑制其分泌外(P<0.05),在磷作用2、5、8d均促进其分泌(P<0.05)。结果表明,添加1、2、4mmol/L磷能促进OB的分泌Ⅰ型胶原;4mmol/L磷能抑制OB的代谢活性,且能抑制OB间通讯。     

Xuzhou—the "Athens of the Orient"

正LOCATED at the junction where north meets south and between Beijing and Shanghai,Xuzhou City boasts a long history,rich culture and gorgeous landscape.Its reputation as a famous Chinese historical and cultural city attracts tourists from far and wide.Wondrous Culture of the Chu and Han Dynasties Xuzhou has a history of over 6,000 years and was established as a city about 2,600 years ago.It is the hometown of Peng Zu,legendary figure in Chinese history,the place where Liu Bang,first emperor of the Han Dynasty,was born and the former     

Ancient Canal Town——Tai'erzhuang

正IN June 2014,the 2,500-year-old Beijing-Hangzhou Grand Canal,running a length of 1,797 kilometers,made the World Cultural Heritage list.The 42.5-kilometer-long stretch at Tai’erzhuang(now a district of Zaozhuang City,Shandong Province),at the junction of the upper and middle sections,is widely known as the sole east-west waterway of the Grand Canal.Qing Emperor Qianlong(1711-1799)once praised Tai’erzhuang as"the world’s most affluent town"     

李先念在红一、四方面军会师中的历史作用

在红军长征过程中，红一、四方面军的会师是规模最大的一次会师，在红军长征史上具有非常重要的地位。时任红四方面军第三十军政委的李先念，在这次会师中起了非常重要的作用。他受命疾驰懋功，积极做好各种准备，热情迎接红一方面军，所部成为两军会师的前锋。会师以后，从物质上帮助一方面军解决吃、穿、住的问题；从精神上对一方面军进行慰问和鼓励；在政治上开展向一方面军学习活动；在文化生活上开展部队联欢活动。他积极执行中央在两河口会议上确定的北上方针，率先头部队攻占包座，打开了通向甘南的北上道路。他拥护中央，顾全大局，维护两军团结，与张国焘的分裂主义作了坚决而灵活的斗争。     

健脾通里中药芪黄煎剂对胃切除大鼠肠上皮紧密连接的影响

目的 观察健脾通里中药芪黄煎剂对大鼠胃切除创伤模型肠黏膜紧密连接蛋白的影响，并探讨其作用机制。方法 将45只大鼠随机分为假手术组、标准肠内营养组、中药组，每组15只。假手术组大鼠仅腹壁切开，未切除胃；其余两组采用胃切除手术方案建立大鼠模型。假手术组术后正常饮食饮水，标准肠内营养组术后注射肠内营养液，中药组注射肠内营养液+中药煎剂。干预7 d后取材，透射电镜下观察大鼠肠黏膜上皮紧密连接形态及其结构的连续性和完整性，并测量肠黏膜上皮细胞间紧密连接宽度；实时荧光定量聚合酶链式反应法检测紧密连接蛋白（zonula occludin-1，ZO-1）、封闭蛋白、咬合蛋白mRNA表达水平。结果 与假手术组比较，标准肠内营养组大鼠肠黏膜上皮细胞紧密连接宽度显著减小（P＜0.05），小肠组织中ZO-1、封闭蛋白、咬合蛋白mRNA表达水平均显著下调（P＜0.05）；与标准肠内营养组比较，中药组大鼠肠黏膜上皮细胞紧密连接宽度显著增加（P＜0.05），小肠组织中ZO-1、封闭蛋白、咬合蛋白mRNA表达水平均显著上调（P＜0.05）。结论 芪黄煎剂可以减轻胃切除术后大鼠肠黏膜上皮细胞间紧密连接的损伤，其作用机制与调节ZO-1、封闭蛋白、咬合蛋白mRNA的表达有关。     

黄连水煎液微粒体系对大鼠小肠上皮细胞紧密连接结构与紧密连接蛋白ZO-1表达的影响

目的 观察黄连水煎液微粒体系对大鼠小肠上皮细胞紧密连接结构与紧密连接蛋白-1（zonula occludens-1，ZO-1）表达的影响。方法 通过常规煎煮获得黄连水煎液，经高速离心得黄连水煎液微粒及去微粒水煎液。采用大鼠肠循环灌注模型，分别用空白Kreb-Ringers（K-R）液、黄连水煎液、微粒重悬液和去微粒水煎液对大鼠空肠段进行循环灌注。2 h后取下肠段，以透射电子显微镜观察细胞紧密连接结构的变化，采用免疫组织化学法检测空肠黏膜中ZO-1的表达水平。结果 空白K-R液组与去微粒水煎液组小肠上皮细胞间连接紧密无明显间隙，ZO-1蛋白呈蜂窝或点状聚集于上皮细胞周围；黄连水煎液组与微粒重悬液组小肠上皮细胞间隙增大，且ZO-1表达水平显著降低（P<0.05）。结论 黄连汤剂中活性成分肠吸收与黄连水煎液微粒体系调节小肠紧密连接结构和ZO-1表达水平有关。     

黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞缝隙连接蛋白43表达的影响

目的 研究黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell, GMC)中缝隙连接蛋白43（connexin 43，Cx43）表达的影响。方法 将体外培养的大鼠GMC分为6组：低糖组，高糖组，黄芩苷低、中、高剂量组，蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）抑制剂组。培养72 h后，收集细胞并提取细胞总蛋白，Western-blot法检测黄芩苷对高糖环境下GMC中PKC和Cx43表达的影响，用划痕标记染料示踪技术检测黄芩苷对GMC缝隙链接通讯功能(gap junction intercellular communication，GJIC)的影响。〖JP〗结果 Western-blot结果显示，与低糖组比较，高糖组中PKC蛋白表达量显著增加（P<0.01），Cx43蛋白表达量显著减少（P<0.01）；黄芩苷呈剂量依赖性降低PKC蛋白表达水平，升高Cx43蛋白表达水平。划痕标记染料示踪实验结果显示：与低糖组比较，高糖组GMC的GJIC功能缺乏，未向邻近细胞传输；与高糖组比较，PKC抑制剂组罗氏黄荧光染料向划痕两侧邻近细胞传输的层数较黄芩苷各剂量组明显增多，黄芩苷各剂量组呈剂量依赖性地增加传递的层数。结论 黄芩苷可剂量依赖性地抑制高糖环境下GMC中PKC的异常活化，从而上调Cx43表达，恢复GJIC的功能。     

苓桂术甘汤对急性心肌梗死后大鼠肠黏膜屏障损伤的保护作用研究

目的 观察苓桂术甘汤对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后大鼠肠道黏膜屏障损伤的保护作用.方法 采用冠状动脉结扎法复制A MI大鼠模型,将模型大鼠随机分别为模型组,苓桂术甘汤低剂量(2.1 g/kg)、中剂量(4.2 g/kg)、高剂量(8.4 g/kg)组,另设假手术组,连续处理4周,采用苏木精-伊红染色法观察心脏和回肠组织病理学变化,ELISA法检测D-乳酸、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(inter-leukin-1β,IL-1β)含量,Western blot法和RT-PCR法检测回肠组织闭合蛋白(Occludin)、带状闭合蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)及其mRNA表达水平.结果 与假手术组比较,模型组大鼠心脏出现明显的心肌损伤及炎症细胞浸润,回肠组织发生肠黏膜脱落,绒毛和腺体稀疏,炎症细胞浸润等病理学变化,血浆D-乳酸和LPS含量升高,回肠组织Occludin和ZO-1蛋白及mRNA表达水平下调,回肠组织TNF-α、IL-6、IL-1β及心脏组织TNF-α含量增加(P<0.05);与模型组比较,苓桂术甘汤各剂量组均可改善AMI后大鼠心肌和肠道组织损伤,降低血浆D-乳酸和LPS含量,上调肠组织Occludin和ZO-1蛋白及其mRNA表达水平,降低回肠组织TNF-α、IL-6、IL-1β及心脏组织TNF-α的含量(P<0.05).结论 苓桂术甘汤改善AMI后大鼠肠黏膜屏障的损伤与调节肠道通透性、降低肠道炎症反应有关.     

互联网背景下冲突规范连结点问题研究

连结点是冲突规范中借以确定涉外民事法律关系应当适用什么法律的根据,它是冲突规范系属中的一个很重要的部分。在如今这个科学技术突飞猛进的时代,经济全球化已经成为不可抗拒的历史潮流,互联网将人类社会带入了一个新的纪元,原有的冲突规范在这样的新形势下表现出了种种不适应,其中,连结点的问题尤为突出。如何使互联网背景下的冲突规范连结点得到合理有效的确定,对于促进国际私法适应于新时代的发展,具有十分重要的意义。     

桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性的保护作用及机制

目的 观察桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤的治疗作用，以及其对血脑屏障的保护作用和机制。方法 建立左侧大脑中动脉阻塞模型，将大鼠随机分为假手术组、模型组、桃红四物汤组和尼莫地平组。采用Longa评分法观察大鼠神经功能损伤程度，行为学实验观察大鼠的运动神经功能，2,3,5-氯化三苯基四氮唑（triphenyltetrazolium chloride，TTC）染色法观察大鼠脑梗死面积，苏木精—伊红染色观察大鼠缺血侧脑部皮质组织病理变化，干湿法测定脑含水率，伊文思蓝（Evans blue,EB）灌注染色法检测血脑屏障通透性，透射电子显微镜观察血脑屏障紧密连接超微结构，免疫组织化学法检测脑组织紧密连接蛋白occludin、胞质附着蛋白-1(zona occludens-1, ZO-1)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9, MMP-9)表达水平。结果 大鼠神经功能损伤程度与运动神经功能经桃红四物汤给药后呈现改善的趋势。TTC结果显示，与模型组比较，桃红四物汤与尼莫地平组大鼠脑梗死面积明显减少（P＜0.05）。苏木精—伊红染色显示，与模型组比较，桃红四物汤与尼莫地平组大鼠脑皮质组织神经元细胞质浓缩，核固缩、分裂或溶解，细胞排列紊乱，层次不清晰的情况得到改善。与模型组比较，桃红四物汤与尼莫地平组大鼠脑含水率、脑出血性转化程度以及EB渗出量显著降低（P＜0.05）。免疫组织化学检测结果显示，与模型组比较，桃红四物汤组大鼠脑梗死区occludin、ZO-1蛋白表达水平显著升高，MMP-9表达水平显著降低（P＜0.05）。透射电子显微镜观察发现，模型组大鼠血脑屏障紧密连接明显受损，桃红四物汤组和尼莫地平组大鼠血脑屏障紧密连接损伤明显改善。结论 桃红四物汤可改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能，缩小梗死面积及减轻脑水肿。其作用机制可能与改善血脑屏障紧密连接超微结构，减少紧密连接相关蛋白表达，进而降低血脑屏障通透性有关。