氯霉素残留伏安免疫测试法的电化学条件

在间接竞争ELISA的基础上,建立了以碱性磷酸酶(ALP)-对硝基苯磷酸(pNPP)为反应体系的检测氯霉素(CAP)残留的伏安免疫方法,并对此法的电化学条件进行了详细的探讨。结果,在0.2 mol/L的B-R电解质溶液(pH3.0)中,当扫描速度为50 mV/s时,伏安法对硝基苯酚(PNP)的灵敏度最佳;且在1.2V处,该物质具有良好的氧化峰形。用此法测试CAP的检测下限达到0.064 ng/mL,检测线性范围为0.15~600 ng/mL。     

过氧化氢酶-氯霉素偶联物的合成及其结合比的测定

利用混合酸酐法合成了氯霉素琥珀酸酯衍生物．再用碳二亚胺将该衍生物与过氧化氢酶偶联,用紫外分光光度法测定已纯化的偶联物中氯霉素与过氧化氢酶的结合比。结果,偶联物中氯霉素与过氧化氢酶的结合比达到30．67:1,偶联物中过氧化氢酶的活性损失约30％。结果表明,该偶联物可作为竞争性ELISA法或免疫传感器法测试氯霉素时所需的酶标抗原。