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| H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达 | |
| 引用本文： | 刘仁陆,周佩娇,朱事康,任涛,戴应基,李炳清,曹伟胜,罗卓军,程珏益,郑世萍,廖明.H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达[J].中国兽医科学,2005,35(12):942-945. |
| 作者姓名： | 刘仁陆 周佩娇 朱事康 任涛 戴应基 李炳清 曹伟胜 罗卓军 程珏益 郑世萍 廖明 |
| 作者单位： | 1. 惠州出入境检验检疫局,广东,惠州,516001 2. 华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642 3. 广东出入境检验检疫局,广东,广州,510623 |
| 基金项目： | 国家科技攻关计划项目(2004BA519A46,2004BA519A12)，广东省科技攻关项目(2003A20403) |
| 摘 要： | 利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析。结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B。再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1。经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21(DE3)(pLysS)感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白。用AIV多克隆血清做Western-blotting分析,发现来自2个等位基因群的NS1蛋白都具有较好的抗原活性。 |
| 关 键 词： | 禽流感病毒 H5N1亚型 NS1基因 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)12-0942-04 |
| 修稿时间： | 2005年8月10日 |
Cloning and expression of NS1 gene of H5N1 avian influenza virus |
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| LIU Ren-lu,ZHOU Pei-jiao,ZHU Shi-kang,REN Tao,DAI Ying-ji,LI Bing-qing,CAO Wei-sheng,LUO Zhuo-jun,CHENG Jue-yi,ZHENG Shi-ping,LIAO Ming.Cloning and expression of NS1 gene of H5N1 avian influenza virus[J].Veterinary Science in China,2005,35(12):942-945. | |
| Authors: | LIU Ren-lu ZHOU Pei-jiao ZHU Shi-kang REN Tao DAI Ying-ji LI Bing-qing CAO Wei-sheng LUO Zhuo-jun CHENG Jue-yi ZHENG Shi-ping LIAO Ming |
| Institution: | LIU Ren-lu~ |
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| Keywords: | AIV H5N1 subtype NS1 gene cloning expression |
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