| 猪IFN-α1重组蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其生物学特性 |
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| 引用本文： | 和燕玲,陈国华,王佩雅,薛萍,房永祥,景志忠.猪IFN-α1重组蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其生物学特性[J].中国兽医科学,2010,40(10). |
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| 作者姓名： | 和燕玲 陈国华 王佩雅 薛萍 房永祥 景志忠 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，甘肃省农业生物技术专项，甘肃省科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 应用杂交瘤细胞技术,将用猪IFN-α1重组蛋白免疫的小鼠脾细胞经与骨髓瘤细胞融合、筛选和多次克隆化培养,成功获得了3株能稳定分泌抗猪IFN-α1的单克隆杂交瘤细胞株,分别将其命名为4E9、5B2和5H11。这3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体经ELISA检测,体外细胞培养上清的效价均可达到1∶104,体内腹水的效价均可达1∶105;SDS-PAGE分析显示,纯化的这3株单克隆抗体的重链分子质量均在60ku以上,轻链均在30ku以上,符合抗体IgG重链、轻链分子的大小;抗体亚类鉴定表明4E9、5B2为IgG2a类,5H11株为IgG2b类,且其抗原结合位点基本一致。细胞染色体分析表明,3株杂交瘤细胞株染色体平均数为88～96条,远高于骨髓瘤细胞或脾细胞的染色体数,从遗传角度证实获得了杂交瘤细胞株;在杂交瘤细胞的稳定性试验中,这3株细胞经多次冻存复苏和传代培养,不同代次细胞上清中的抗体效价均在1∶104～1∶105之间,说明该3株杂交瘤细胞分泌单克隆抗体的性能稳定。
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| 关 键 词： | 重组猪IFN-α1蛋白 单克隆抗体 生物学特性 |
Development and biological characteristics of hybridoma cell lines secreting monoclonal antibody against recombinant porcine IFN-α1 |
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| HE Yan-ling,CHEN Guo-hua,WANG Pei-ya,XUE Ping,FANG Yong-xiang,JING Zhi-zhong.Development and biological characteristics of hybridoma cell lines secreting monoclonal antibody against recombinant porcine IFN-α1[J].Veterinary Science in China,2010,40(10). |
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| Authors: | HE Yan-ling CHEN Guo-hua WANG Pei-ya XUE Ping FANG Yong-xiang JING Zhi-zhong |
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