| 大肠杆菌O157 LPS单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘红亮,李克生,陈学忠,杜惠芬,连晓雯,鲁学萍,袁明.大肠杆菌O157 LPS单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科学,2011(12). |
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| 作者姓名： | 刘红亮 李克生 陈学忠 杜惠芬 连晓雯 鲁学萍 袁明 |
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| 作者单位： | 甘肃省医学科学研究院; |
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| 摘 要： | 以热灭活的大肠杆菌O157∶H7(E.coli O157∶H7)菌体抗原为免疫原,E.coli O157∶H7菌体结合脂多糖(LPS)为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备E.coli O157∶H7LPS单克隆抗体。采用改良过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶(HRP)酶标抗体,并建立检测E.coli O157∶H7的双抗体夹心ELISA方法。结果,成功制备了9株稳定分泌E.coli O157∶H7LPS单克隆抗体的杂交瘤细胞,其中7F9和7G2为LPS O-特异性多糖(O-SP)单克隆抗体,与E.coli O157∶H7菌体具有较好的反应性。此双抗体夹心ELISA方法对与受试的非O157菌株没有交叉反应,对E.coli O157∶H7纯培养菌液的检出下限为3×104CFU/mL。结果表明,建立的ELISA检测方法对E.coli O157具有较高的特异性和灵敏度,该方法有望与其他方法相结合用于对E.coli O157∶H7的检测。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌O157∶H7 单克隆抗体 脂多糖 双抗体夹心ELISA |
Preparation of monoclonal antibodies for E. coli O157 LPS and development of a sandwich ELISA |
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| LIU Hong-liang,LI Ke-sheng,CHEN Xue-zhong,DU Hui-fen,LIAN Xiao-wen,LU Xue-ping,YUAN Ming.Preparation of monoclonal antibodies for E. coli O157 LPS and development of a sandwich ELISA[J].Veterinary Science in China,2011(12). |
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| Authors: | LIU Hong-liang LI Ke-sheng CHEN Xue-zhong DU Hui-fen LIAN Xiao-wen LU Xue-ping YUAN Ming |
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| Institution: | LIU Hong-liang,LI Ke-sheng,CHEN Xue-zhong,DU Hui-fen,LIAN Xiao-wen,LU Xue-ping,YUAN Ming(Medical Academy of Gansu,Lanzhou 730050,China) |
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