| 马β2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的高效表达与纯化 |
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| 引用本文： | 童铁钢,刘光亮,徐树兰,王群,肖一红,孟庆文,吴东来.马β2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的高效表达与纯化[J].中国兽医科学,2005,35(11):851-855. |
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| 作者姓名： | 童铁钢 刘光亮 徐树兰 王群 肖一红 孟庆文 吴东来 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院,研究生院,北京,100081 |
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| 摘 要： | 为了构建马MHCⅠ四聚体分子,从马外周血单核细胞(PBMC)中提取总RNA,采用RT-PCR技术对去除信号肽部分的2βm基因进行了扩增,将其RT-PCR产物经纯化、BamHⅠ XhoⅠ双酶切后与经同样处理的原核表达载体pET-28a( )进行连接,转化入感受态细胞BL21(DE3)。将筛选出的阳性克隆进行测序、诱导表达并将其表达产物进行纯化。结果表明,去除信号肽部分的马2βm基因全长300 bp,含有1个开放阅读框,编码一由99个氨基酸组成的成熟蛋白;表达产物以包涵体的形式存在,经SDS-PAGE和Western-blotting分析,重组蛋白的分子质量约为15 ku,且具有免疫生物学活性。
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| 关 键 词： | 马β2-微球蛋白 基因 克隆 表达 纯化 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)11-0851-05 |
| 修稿时间： | 2005年8月16日 |
Cloning of equine β2-microglobulin gene and its expression-in-Escherichia coli and purification |
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| TONG Tie-gang,LIU Guang-liang,XU Shu-lan,WANG Qun,XIAO Yi-hong,MENG Qing-wen,WU Dong-lai.Cloning of equine β2-microglobulin gene and its expression-in-Escherichia coli and purification[J].Veterinary Science in China,2005,35(11):851-855. |
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| Authors: | TONG Tie-gang LIU Guang-liang XU Shu-lan WANG Qun XIAO Yi-hong MENG Qing-wen WU Dong-lai |
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| Institution: | TONG Tie-gang~ |
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