快速PCR扩增体系的建立及法医学应用 |
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引用本文: | 刘琳,项林平,胡志敏,董军磊,姜伯玮,白雪,赵蕾,欧元,赵兴春,叶健.快速PCR扩增体系的建立及法医学应用[J].中国法医学杂志,2015(1):32-35. |
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作者姓名: | 刘琳 项林平 胡志敏 董军磊 姜伯玮 白雪 赵蕾 欧元 赵兴春 叶健 |
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作者单位: | 厦门市公安局思明分局;中国人民公安大学;重庆市公安局巴南区分局;天津市公安局西青分局;公安部第一研究所;公安部物证鉴定中心 |
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基金项目: | 国家科技支撑计划课题(2012BAK02B04-1);国家自然科学基金资助项目(81202384);公共安全生物物证检验系列试剂研制与示范应用(Z131100004513007) |
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摘 要: | 目的建立快速PCR扩增体系,探讨其在法医实践中的应用价值。方法设置不同的缓冲液、酶浓度与Mg SO4浓度、热循环参数等,观察不同参数对扩增结果的影响,建立快速PCR扩增体系。使用该体系对常见检材进行STR分型,与常规方法扩增的结果比较,考察其分型准确性与扩增用时。结果本文建立的快速PCR扩增体系含DNA TyperTM19试剂盒的Primer Mix(5×)2μL;Ta KaRa试剂的Fast BufferⅡ(10×)1μL,Speed STARTMHS DNA Polymerase(5U/μL)0.3μL,Mg SO4(50mmol/L)为0.1μL。扩增程序为95℃120s;95℃2s、61℃15s,27个循环;72℃60s。结论快速PCR扩增体系分型结果准确,用时仅19min,缩短了常规扩增用时,有较大的法医学应用价值。
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关 键 词: | 法医物证学 DNA TyperTM19试剂盒 STR 快速PCR |
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