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目的制备标准分子量DNA片段混合物。方法选取pMD18-T载体部分序列作为插入片段,设计引物,制备包含不同大小的标准分子量片段的克隆。大量培养细菌提取质粒,用双酶切、连接荧光接头的方法制备不同大小的带有荧光的标准分子量片段,混合,纯化,最终获得标准分子量片段混合物(内标)。结果用分子克隆方法制备出具有实用性的标准分子量片段混合物,其单个标准分子量片段大小分别为80bp、124bp、194bp、224bp、254bp、304bp、349bp、399bp、424bp、454bp。并且这些标准分子量片段混合物可以准确地对DNATyper15试剂盒的扩增产物进行检测。结论应用该方法制备了能满足研究和实验室要求的标准分子量片段混合物,为DNA分子量标准物标准品的制作提供了一种新的方法。 相似文献
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从血痕、血液、精斑中提取DNA对河南地区随机人群CSFIPO、TPOX和TH01基因座(CTT)进行了基因频率分布调查,现报道如下。1材料与方法137例血样取自河南省血液中心和本实验室检案材料;精斑为本实验室检案积累。采用Chexelx-100处理法提取DNA模板,混合斑中DNA的提取采用两步消化法(‘]。复合扩增采用Promega公司Geneprint试剂盒试剂,按试剂盒说明书操作。扩增产物用4%聚丙烯酸胺变性凝胶分离,恒功率40W电泳1.sh。检测用eromesa公司银染试剂盒,按其说明书操作。通过凝胶中标本扩增带与Promege公司提供的全等位基因标准… 相似文献
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毛发法医学检验的现状与进展 总被引:3,自引:0,他引:3
人类毛发和各种动物毛发一样,都是由表皮褪化而来的富有弹性的角质体.毛发可以自然脱落,或由外界因素影响而导致非自然脱落.在凶杀、斗殴、强奸或其它刑事案件中,由于当事人个体之间直接或间接的接触、扭打、摩擦、凶器打击等,可能使罪犯或受害人的毛发遗留在现场,附着在凶器或受害人的衣裤及身体等部位,它具有体积小,难于发现的特点.随着犯罪分子反侦破能力的提高,罪犯作案后采取破坏现场,毁灭物证等手段,使得许多刑事案件的现场有可能没有其它任何物证而仅留下一根或几根毛发,毛发在这类案件的侦察中就显得至关重要,毛发的… 相似文献
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目的验证PuriTyperTM纯化试剂盒各项性能指标和法医学应用价值。方法收集及制备抗凝血液、常见案件检材(唾液、烟头、精液、毛发、指甲、骨骼及组织块)、斑痕样本(血斑、唾液斑、精斑)以及模拟添加抑制剂和模仿自然环境中放置的血斑。采用PuriTyperTM纯化试剂盒提取纯化并进行DNA定量,IdentifilerTM复合扩增试剂盒扩增,产物经ABI 3130遗传分析仪进行检测,Genemapper软件分析结果,对该试剂盒灵敏度、稳定性、重复性、检材适应性进行测试。结果采用该试剂盒提取0.1~40μL血液分别获得0.042~26.45ng/μL的DNA。3种斑痕样本DNA产量平行试验结果稳定。不同类型检材重复检验所获IPC的CT平均值在27.60至28.03之间。常见案件检材所得分型与已知结果均一致。结论 PuriTyperTM纯化试剂盒能够满足法医DNA检验的要求,对法医学实践具有重要的应用价值。 相似文献
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