| 猪生殖与呼吸综合征病毒CH-1a株GP5蛋白基因的表达及其单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 周艳君,安同庆,薛强,仇华吉,童光志,刘金霞,田志军,王云峰,彭金美.猪生殖与呼吸综合征病毒CH-1a株GP5蛋白基因的表达及其单克隆抗体的制备[J].中国兽医科学,2005,35(11):859-864. |
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| 作者姓名： | 周艳君 安同庆 薛强 仇华吉 童光志 刘金霞 田志军 王云峰 彭金美 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30470072)，国家重点基础研究发展规划(973)项目(G1999011902) |
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| 摘 要： | 将猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株GP5蛋白基因信号肽部分删除后克隆于pGEX-6p-1载体上,并在大肠埃希氏菌中进行表达。经SDS-PAGE电泳分析发现,融合表达的rtGP5蛋白约42 ku,将融合蛋白rtGP5用PRRSV阳性血清进行Western-blotting分析,证实所表达的融合蛋白能被其特异性识别。收获融合表达产物rtGP5,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化,经腹腔免疫BALB/c小鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以融合蛋白rtGP5和GST蛋白为抗原,通过间接ELISA方法对融合细胞的上清液进行检测,筛选阳性克隆,结果得到了15株能稳定分泌抗rtGP5蛋白抗体的阳性细胞克隆株。经间接免疫荧光检测发现,获得的15株单克隆抗体都能与PRRSV感染细胞产生特异性荧光。15株单克隆抗体亚型鉴定结果显示均为IgG1型,且轻链均为κ链。
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| 关 键 词： | 猪生殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白 单克隆抗体 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)11-0859-06 |
| 修稿时间： | 2005年6月21日 |
Expression of GP5 gene of PRRSV CH-1a strain and development of monoclonal antibodies against GP5 |
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| ZHOU Yan-jun,AN Tong-qing,XUE Qiang,QIU Hua-ji,TONG Guang-zhi,LIU Jin-xia,TIAN Zhi-jun,WANG Yun-feng,PENG Jin-mei.Expression of GP5 gene of PRRSV CH-1a strain and development of monoclonal antibodies against GP5[J].Veterinary Science in China,2005,35(11):859-864. |
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| Authors: | ZHOU Yan-jun AN Tong-qing XUE Qiang QIU Hua-ji TONG Guang-zhi LIU Jin-xia TIAN Zhi-jun WANG Yun-feng PENG Jin-mei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine reproductive and respiratory syndrome virus glycoprotein5 monoclonal antibody |
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