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兔出血症病毒单克隆抗体的制备及鉴定
引用本文:刘怀然,秦海斌,刘家森,单安山,曲连东.兔出血症病毒单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国兽医科学,2009,39(2).
作者姓名:刘怀然  秦海斌  刘家森  单安山  曲连东
作者单位:1. 东北农业大学动物科学技术学院,黑龙江哈尔滨,150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部实验动物质量监督检验测试中心,黑龙江哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部实验动物质量监督检验测试中心,黑龙江哈尔滨,150001;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100
3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部实验动物质量监督检验测试中心,黑龙江哈尔滨,150001
4. 东北农业大学动物科学技术学院,黑龙江哈尔滨,150030
基金项目:黑龙江省博士后资金资助项目,国家科技部科研院所社会公益研究专项基金 
摘    要:为建立兔出血症病毒(RHDV)的检测方法及为变异株监测做储备,用蔗糖密度梯度离心法纯化的RHDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,以昆虫细胞一杆状病毒表达的重组VP60蛋白建立的间接ELISA法筛选抗RHDV单克隆抗体杂交瘤细胞,并对其主要生物学特性进行了鉴定.结果表明,筛选出6株单抗,它们分属于IgG1(AD4,AG10,DE2)、IgG2b(BC9,BE8)和IgM(BH3)亚类;这6株单抗杂交瘤细胞的平均染色体数为87~89条,将其冻存6个月后复苏,在体外传20代的过程中分泌的抗体效价变化不大,具有很好的稳定性;Western-blot及免疫荧光分析表明,单抗DE2、AG10识别线性表位,其余4株单抗识别构象型表位;竞争ELISA试验表明,这6株单抗可识别5种抗原表位.

关 键 词:兔出血症病毒  单克隆抗体  抗原识别位点

Preparation and identification of monoclonal antibodies against rabbit hemorrhagic disease virus
LIU Huai-ran,QIN Hai-bin,LIU Jia-sen,SHAN An-shan,QU Lian-dong.Preparation and identification of monoclonal antibodies against rabbit hemorrhagic disease virus[J].Veterinary Science in China,2009,39(2).
Authors:LIU Huai-ran  QIN Hai-bin  LIU Jia-sen  SHAN An-shan  QU Lian-dong
Abstract:
Keywords:
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