| 禽呼肠孤病毒99G株σB编码基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达 |
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| 引用本文： | 张云,郝雪,耿宏伟,郭东春.禽呼肠孤病毒99G株σB编码基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达[J].中国兽医科学,2008,38(5):407-411. |
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| 作者姓名： | 张云 郝雪 耿宏伟 郭东春 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法扩增禽呼肠孤病毒(ARV)99G株σB编码基因,序列分析表明,99G株σB编码基因与其他禽呼肠孤病毒的同源性为90%～99 9%,而与我国番鸭呼肠孤病毒S12株的同源性仅有60%;用BarnH Ⅰ和Xho Ⅰ酶将σB编码基因切下并克隆到表达载体pGEX-6p-1中,构建了重组表达质粒pGEX-σB;鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,σB基因在大肠杆菌中得到了高效表达,表达的融合蛋白占总蛋白的41.46%,融合蛋白的分子质量为66 ku,主要以包涵体形式存在;Western-blot结果显示,该融合蛋白能与抗ARV阳性血清发生特异性反应,表明重组蛋白具有良好的反应原性,可用于禽呼肠孤病毒病诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制.
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| 关 键 词： | 禽呼肠孤病毒 σB基因 原核表达 呼肠 病毒 编码基因 克隆 大肠杆菌 高效表达 Cloning Escherichia coli expression strain reovirus 疫苗 基因工程 诊断试剂盒 反应原性 重组蛋白 特异性反应 发生 阳性血清 显示 |
| 文章编号： | 1673-4696(2008)05-0407-05 |
| 修稿时间： | 2008年1月4日 |
Cloning of σB of avian reovirus 99G strain and its expression in Escherichia coli |
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| ZHANG Yun,HAO Xue,GENG Hong-wei,GUO Dong-chun.Cloning of σB of avian reovirus 99G strain and its expression in Escherichia coli[J].Veterinary Science in China,2008,38(5):407-411. |
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| Authors: | ZHANG Yun HAO Xue GENG Hong-wei GUO Dong-chun |
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