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用重组腺病毒免疫方法制备伪狂犬病病毒gC蛋白单克隆抗体
引用本文:陈振海,杨金先,宋铁英,刘晓东,林天龙.用重组腺病毒免疫方法制备伪狂犬病病毒gC蛋白单克隆抗体[J].中国兽医科学,2007,37(8):684-689.
作者姓名:陈振海  杨金先  宋铁英  刘晓东  林天龙
作者单位:福建省农业科学院,生物技术研究所,福建,福州,350003
摘    要:将表达伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC基因的重组腺病毒经肌肉免疫BALB/c小鼠,测试了重组腺病毒免疫小鼠制备抗目的蛋白单克隆抗体的效果。ELISA分析表明,BALB/c小鼠接种重组腺病毒后能产生针对gC蛋白的特异性抗体。给BALB/c小鼠用大肠杆菌表达的gC融合蛋白MBP-gC-NC加强免疫后第3 d,取小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞在PEG4000作用下进行杂交融合,经筛选、克隆,获得了3株稳定分泌抗PRV gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1B4、1H4和2C8。单抗特性分析结果表明,1B4、2C8属IgG2a亚类,1H4属IgG1亚类;腹水抗体的ELISA效价为1∶2×105~1∶2×106;3株单抗都具有间接免疫荧光试验(IFA)和免疫印迹试验(Western-blotting)反应特性,能够特异地识别PRV gC蛋白。证实重组腺病毒免疫可用于制备目的蛋白单克隆抗体,为制备单抗提供了一种新的方法。

关 键 词:重组腺病毒  伪狂犬病病毒  gC蛋白  单克隆抗体
文章编号:1673-4696(2007)08-0684-06
修稿时间:2007年3月26日

Preparation of monoclonal antibodies against pseudorabies virus glycoprotein gC by immunization with recoimbinant adenovirus
CHEN Zhen-hai,YANG Jin-xian,SONG Tie-ying,LIU Xiao-dong,LIN Tian-long.Preparation of monoclonal antibodies against pseudorabies virus glycoprotein gC by immunization with recoimbinant adenovirus[J].Veterinary Science in China,2007,37(8):684-689.
Authors:CHEN Zhen-hai  YANG Jin-xian  SONG Tie-ying  LIU Xiao-dong  LIN Tian-long
Abstract:
Keywords:recombinant adenovirus  pseudorabies virus(PRV)  gC protein  monoclonal antibody
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