| 猪肺炎霉形体热休克蛋白Hsp70单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 乔祖健,WANG Liang,李媛,CHEN Chao,辛九庆,LI Ji-chang.猪肺炎霉形体热休克蛋白Hsp70单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国兽医科学,2008,38(8). |
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| 作者姓名： | 乔祖健 WANG Liang 李媛 CHEN Chao 辛九庆 LI Ji-chang |
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| 作者单位： | 1. 东北农业大学动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
2. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 中国农业科学院所长基金 |
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| 摘 要： | 以肺炎霉体体(Mhp)Yin-1株为模板,利用所合成的引物扩增了伴侣蛋白DnaK(热休克蛋白Hsp70)C末端基因,将得到的目的片段分别克隆至表达载体pET-28a和pGEX-6P-1中,原核表达获得了重组蛋白6P-1-DnakC和28a-DnakC,经Western-blot分析,均能被Mhp抗血清识别.以28a-DnakC作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,以6P-1-DnakC为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠.筛选和鉴定了2株分泌抗DnaK的杂交瘤细胞株,命名为1AD10、2AF11.Western-blotting结果表明,这2株单抗与Mhp发生特异性反应而不与其他相关霉形体发生反应.抗体亚类鉴定结果显示,1AD10、2AF111分别为IgG2b和IgG2a亚类,且轻链均为κ链.相加ELISA试验表明,2株单抗能识别不同的抗原表位.
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| 关 键 词： | 猪肺炎霉形体 伴侣蛋白DnaK 热休克蛋白70 单克隆抗体 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against HSP70 of Mycoplasma hyopneumoniae |
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| QIAO Zu-jian,WANG Liang,LI Yuan,CHEN Chao,XIN Jiu-qing,LI Ji-chang.Preparation and identification of monoclonal antibodies against HSP70 of Mycoplasma hyopneumoniae[J].Veterinary Science in China,2008,38(8). |
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| Authors: | QIAO Zu-jian WANG Liang LI Yuan CHEN Chao XIN Jiu-qing LI Ji-chang |
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