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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
引用本文:于洁,刘雪威,白娟,宋中宝,姜平.猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国兽医科学,2019(7):821-827.
作者姓名:于洁  刘雪威  白娟  宋中宝  姜平
作者单位:南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室
基金项目:江苏省重点研发计划重点项目(BE2018386);国家生猪产业技术体系专项(CARS-36);国家自然科学基金项目(31672565)
摘    要:为了鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白抗原表位,本研究将PRRSV N蛋白进行了原核表达和纯化,并用纯化后的N蛋白免疫BALB/c小鼠。利用淋巴瘤细胞融合技术和间接ELISA抗体筛选方法,制备获得4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株3D10、3G12、6E2和6F4,Western-blot和IFA鉴定其均能与PRRSV特异性反应。4株单抗均属于IgG1亚类,轻链均为κ链。ELISA结果显示,3D10、3G12、6E2和6F4之间的叠加系数均在50%以上。选择N蛋白3个主要抗原表位合成肽进行ELISA检测,证明4株单抗识别的抗原表位均为30~52 aa,提示4株单克隆抗体亲和力可能存在一定差异,为该病毒研究提供了重要材料。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  单克隆抗体  N蛋白

Preparation and identification of monoclonal antibodies against the N protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
YU Jie,LIU Xue-wei,BAI Juan,SONG Zhong-bao,JIANG Ping.Preparation and identification of monoclonal antibodies against the N protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Veterinary Science in China,2019(7):821-827.
Authors:YU Jie  LIU Xue-wei  BAI Juan  SONG Zhong-bao  JIANG Ping
Institution:(Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology of the Ministry of Agriculture/Nanjing AgriculturalUniversity,Nanjing 210095,China)
Abstract:YU Jie;LIU Xue-wei;BAI Juan;SONG Zhong-bao;JIANG Ping(Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology of the Ministry of Agriculture/Nanjing AgriculturalUniversity,Nanjing 210095,China)
Keywords:porcine reproductive and respiratory syndrome virus  monoclonal antibody  N protein
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