非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B羧基端多肽单克隆抗体的制备及鉴定 |
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引用本文: | 张璐,刘宁宁,吴海珍,高继明,肖一红,周恩民.非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B羧基端多肽单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国兽医科学,2011(7). |
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作者姓名: | 张璐 刘宁宁 吴海珍 高继明 肖一红 周恩民 |
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作者单位: | 山东农业大学动物医学院;西北农林科技大学动物医学院; |
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基金项目: | 国家行业科技计划项目(200903055); 国家自然科学基金资助项目(30871857,U0931003/L01); 山东省自主创新成果转化重大专项(2008ZHZX1A1101) |
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摘 要: | 为了得到能够特异性识别非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B(NMHCⅡ-B)的单克隆抗体,根据Marc-145细胞上NMHCⅡ-B羧基端的蛋白质序列,合成多肽,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA方法筛选阳性克隆;制备腹水并纯化;用间接ELISA和间接免疫荧光试验检测纯化抗体的特异性。结果显示,获得2株能稳定传代并分泌特异性抗体的杂交瘤细胞系;单克隆抗体的特异性鉴定显示,2株细胞系所产生的抗体能够特异性地与NMHCⅡ-B羧基端蛋白反应而且能与Marc-145细胞产生特异性的结合。这2株单抗的制备及鉴定为研究易感细胞上NMHCⅡ-B与猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的关系奠定了基础。
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关 键 词: | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B羧基端 单克隆抗体 鉴定 |
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