| 山羊痘病毒糖蛋白基因ORF122的克隆及其原核表达 |
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| 引用本文： | 李春艳,郑敏,黎宗强,莫胜兰,屈素洁,梁媛,李向涛,秦保亮.山羊痘病毒糖蛋白基因ORF122的克隆及其原核表达[J].中国兽医科学,2010,40(8). |
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| 作者姓名： | 李春艳 郑敏 黎宗强 莫胜兰 屈素洁 梁媛 李向涛 秦保亮 |
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| 作者单位： | 李春艳(广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005;广西动物疫病预防控制中心,广西,南宁,530001);郑敏,莫胜兰,屈素洁,梁媛(广西动物疫病预防控制中心,广西,南宁,530001);黎宗强,李向涛(广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005);秦保亮(河南新乡市动物疫病预防控制中心,河南,新乡,453003) |
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| 基金项目： | 广西青年科学基金项目，广西科技创新能力与条件建设项目 |
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| 摘 要： | 以山羊痘弱毒疫苗毒株AV41的细胞培养物中提取的总DNA为模板,通过PCR扩增获得山羊痘病毒(GTPV)ORF122基因片段。另设计1对引物,经PCR扩增获得缺失跨膜功能区的ORF122基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-32a中,构建了重组表达质粒pET-ORF122,将其转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导,成功表达出分子质量为32ku的融合蛋白。免疫印迹试验证实,表达的融合蛋白可以被GTPV阳性血清识别。经对该重组蛋白进行纯化,结果其纯度达到90%以上,产量达5.5mg/L。上述结果为GTPV重组诊断抗原的筛选和新型疫苗的研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 山羊痘病毒 ORF122基因 克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of ORF122 gene encoding glycoprotein from goatpox virus |
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