| 结核分枝杆菌和牛分枝杆菌二重实时荧光PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 谢志勤,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢丽基,蓝如束,张振荣,黄海强.结核分枝杆菌和牛分枝杆菌二重实时荧光PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2010,40(8). |
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| 作者姓名： | 谢志勤 谢芝勋 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢丽基 蓝如束 张振荣 黄海强 |
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| 作者单位： | 谢志勤,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢丽基(广西壮族自治区兽医研究所,广西,南宁,530001);蓝如束(广西壮族自治区疾病预防控制中心,广西,南宁,530028);张振荣,黄海强(广西壮族自治区武宣县动物疾病预防控制中心,广西,武宣,545900) |
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| 基金项目： | 国家农业公益性专项，广西壮族自治区科技攻关项目，广西壮族自治区水产畜牧兽医局科研计划项目 |
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| 摘 要： | 根据结核分枝杆菌23SrRNA基因序列和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计了2对针对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重实时荧光定量PCR检测方法,并对建立的方法进行敏感性、特异性测定和临床样品检验。结果显示,该方法特异性好,能区分不同模板浓度组合的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;可检测到10copies模板的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;对保存的50份PPD检测阳性牛的鼻黏液、牛乳和淋巴结进行检测,结果6份结核分枝杆菌阳性,1份牛分枝杆菌阳性,其余均为阴性,与PCR的检测结果一致。由此可见,建立的二重实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、可定量检测等优点,适合用于结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的鉴别检测。
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌 二重荧光定量PCR |
Development of a duplex real-time PCR assay for differentiation of Mycobacterium tuberculosis from Mycobacterium bovis in dairy cow |
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