| CELO病毒fiber1基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定 |
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| 引用本文： | 王凤雪,王云峰,智海东,王玫,童光志.CELO病毒fiber1基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定[J].中国兽医科学,2005,35(6):468-471. |
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| 作者姓名： | 王凤雪 王云峰 智海东 王玫 童光志 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA213020) |
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| 摘 要： | 根据鸡胚致死孤儿(CELO)病毒Phelps株的fiber1基因(GenBank序列号U46933)序列设计了1对引物,采用PCR扩增CELO病毒fiber1基因C端(包含Knobs区)的部分片段,并将其克隆到质粒表达载体pGEX6p1,获得的阳性克隆命名为pGEXAF807。序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列与CELO病毒Phelps株的fiber1基因序列完全一致。将pGEXAF807转化大肠埃希氏菌DH5α,经37℃、0.6mmol/LIPTG诱导表达5h,SDSPAGE分析超声裂解后的上清和沉淀。结果显示,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.6ku,目的蛋白量占菌体总蛋白的35.7%。用CELO病毒多克隆血清做Westernblotting试验,结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。
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| 关 键 词： | CELO病毒 fiber1基因 原核表达 抗原活性 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)06-0468-04 |
| 修稿时间： | 2005年3月25日 |
Cloning and expression of protein fiber1 gene of chicken embryo lethal orphan virus and identification of expressed protein antigenicity |
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| WANG Feng-xue,WANG Yun-feng,ZHI Hai-Dong,WANG Mei,TONG Guang-zhi.Cloning and expression of protein fiber1 gene of chicken embryo lethal orphan virus and identification of expressed protein antigenicity[J].Veterinary Science in China,2005,35(6):468-471. |
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| Authors: | WANG Feng-xue WANG Yun-feng ZHI Hai-Dong WANG Mei TONG Guang-zhi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chicken embryo lethal orphan virus fiber1 gene prokaryotic expression antigenicity |
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