H11亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立 |
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引用本文: | 罗思思,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢志勤,谢丽基,范晴.H11亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立[J].中国兽医科学,2014(10). |
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作者姓名: | 罗思思 谢芝勋 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 范晴 |
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作者单位: | 广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室; |
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基金项目: | 广西特聘专家专项(2011B020);广西科技攻关重大专项(1222003-2-4,14121003-4-2);国家百千万人才工程人选专项(945200603) |
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摘 要: | 利用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立一种特异、灵敏和快速的H11亚型禽流感病毒(AIV)RT-LAMP可视化检测方法。根据H11亚型AIV HA基因保守序列,设计6条特异性引物,优化反应条件,进行特异性、敏感性和临床样品检测。结果显示,该方法只能扩增H11亚型AIV,不与其他亚型AIV和禽病病原体发生交叉反应,表明该方法特异性强;对H11亚型AIV RNA的检测下限为10fg,表明该方法敏感性高;在63℃等温条件下作用1h即可完成全部扩增反应;对206份临床样品的检测结果与病毒分离一致。结果表明,本研究中建立的H11-RT-LAMP检测方法具有简便、快速和结果可视化的优点,尤其适合在基层兽医站和养殖场进行快速检测,具有非常广阔的应用前景。
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关 键 词: | H亚型禽流感病毒 环介导等温扩增 可视化检测 |
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