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H11亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立
引用本文:罗思思,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢志勤,谢丽基,范晴.H11亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立[J].中国兽医科学,2014(10).
作者姓名:罗思思  谢芝勋  刘加波  庞耀珊  邓显文  谢志勤  谢丽基  范晴
作者单位:广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室;
基金项目:广西特聘专家专项(2011B020);广西科技攻关重大专项(1222003-2-4,14121003-4-2);国家百千万人才工程人选专项(945200603)
摘    要:利用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立一种特异、灵敏和快速的H11亚型禽流感病毒(AIV)RT-LAMP可视化检测方法。根据H11亚型AIV HA基因保守序列,设计6条特异性引物,优化反应条件,进行特异性、敏感性和临床样品检测。结果显示,该方法只能扩增H11亚型AIV,不与其他亚型AIV和禽病病原体发生交叉反应,表明该方法特异性强;对H11亚型AIV RNA的检测下限为10fg,表明该方法敏感性高;在63℃等温条件下作用1h即可完成全部扩增反应;对206份临床样品的检测结果与病毒分离一致。结果表明,本研究中建立的H11-RT-LAMP检测方法具有简便、快速和结果可视化的优点,尤其适合在基层兽医站和养殖场进行快速检测,具有非常广阔的应用前景。

关 键 词:H亚型禽流感病毒  环介导等温扩增  可视化检测
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