抗弓形虫SAG2蛋白单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 |
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引用本文: | 聂福旭,王权,王治仓,贾志江,蒋蔚,陈永军.抗弓形虫SAG2蛋白单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定[J].中国兽医科学,2014(1). |
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作者姓名: | 聂福旭 王权 王治仓 贾志江 蒋蔚 陈永军 |
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作者单位: | 甘肃畜牧工程职业技术学院;中国农业科学院上海兽医研究所; |
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基金项目: | 公益性行业(农业)科研专项(200803017) |
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摘 要: | 为制备抗弓形虫SAG2蛋白的单克隆抗体(McAb),用纯化的rSAG2蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA方法筛选稳定分泌高效价McAb的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备单抗。用ELISA方法测定其效价;单克隆抗体类型鉴定试纸条鉴定其类型;Western-blot和IFA试验进行特异性鉴定。结果显示,筛选出2株能稳定分泌抗SAG2蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为5E2、2A8。间接ELISA测定其效价分别为1∶256 000、1∶128 000;2株单克隆抗体亚型均为IgG1型,轻链均为κ链;Western-blot与IFA试验表明,这2株McAb均能够特异性识别天然构象的SAG2蛋白,并且进一步说明此蛋白是位于弓形虫膜表面的蛋白。成功获得了具有较高特异性及敏感性的抗SAG2蛋白的单克隆抗体,并能特异性识别天然构象的SAG2蛋白,为弓形虫病免疫诊断及基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。
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关 键 词: | 弓形虫 SAG 单克隆抗体 |
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