弓形虫RH株热应激蛋白40基因的克隆与原核表达 |
| |
引用本文: | 路静,张念章,田维鹏,殷铭阳,王瑞爱,周东辉,朱兴全,翁亚彪.弓形虫RH株热应激蛋白40基因的克隆与原核表达[J].中国兽医科学,2014(1). |
| |
作者姓名: | 路静 张念章 田维鹏 殷铭阳 王瑞爱 周东辉 朱兴全 翁亚彪 |
| |
作者单位: | 华南农业大学兽医学院;中国农业科学院 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(31230073,31172316);甘肃省创新研究群体计划项目(1210RJIA006) |
| |
摘 要: | 为研究弓形虫热应激蛋白40(TgHSP40)的生物学特性,采用RT-PCR方法从弓形虫RH株中扩增出TgHSP40基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化入表达菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。结果显示,重组菌可表达出分子质量约46ku的重组融合蛋白,在37℃、IPTG浓度为1.0mmol/L、诱导6h的情况下表达效果最好。重组蛋白经纯化后进行的Western-blot分析证实,表达、纯化的弓形虫RH株HSP40蛋白具有良好的反应原性,与弓形虫基因Ⅰ型的RH株、基因Ⅱ型的PRU株以及基因型为ToxoDB9的TgC7株和GJS株的阳性血清均可发生特异性反应,预期可作为弓形虫病ELISA诊断方法的候选抗原。本研究结果为弓形虫病新型诊断方法的建立奠定了基础。
|
关 键 词: | 弓形虫 HSP蛋白 克隆 原核表达 反应原性 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|