| H1N1亚型猪流感病毒HA基因的表达及单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 张祥斌,谢青梅,马静云,曹永长,冀君,李少璃,毕英佐.H1N1亚型猪流感病毒HA基因的表达及单克隆抗体的制备[J].中国兽医科学,2008,38(11). |
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| 作者姓名： | 张祥斌 谢青梅 马静云 曹永长 冀君 李少璃 毕英佐 |
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| 作者单位： | 1. 华南农业大学动物科学学院,广东广州,510642
2. 中山大学生命科学学院,广东广州,510275 |
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| 基金项目： | 广东省重大科技专项基金 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法扩增了H1N1亚型猪流感病毒(SIV)广东株的血凝素(HA)基因,测序后对HA基因进行了生物信息学分析。将HA基因克隆到高效可溶表达载体pBCX上,成功构建重组表达质粒pBCX-HA。将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达。诱导表达的HA融合蛋白分子质量约为94.0 ku,表达产物占菌体总蛋白的29.5%。经Western-blot分析证实可溶表达的融合蛋白与H1N1亚型猪流感病毒阳性血清具有良好的免疫反应性。用纯化的HA融合蛋白作包被抗原用于猪流感病毒单克隆抗体的筛选,成功筛选到2株针对HA蛋白抗原表位的单克隆抗体;ELISA结果表明,制备的SIV单克隆抗体ⅢF6A4C10与H1N1亚型SIV抗原具有特异的免疫反应性,为H1N1 SIV的鉴别诊断奠定了基础。
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| 关 键 词： | H1N1亚型猪流感病毒 血凝素 高效可溶表达 单克隆抗体 |
Expression of HA gene of H1N1 subtype swine influenza virus and preparation of a monoclonal antibody against HA protein |
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| ZHANG Xiang-bin,XIE Qing-mei,MA Jing-yun,CAO Yong-chang,JI Jun,LI Shao-li,BI Ying-zuo.Expression of HA gene of H1N1 subtype swine influenza virus and preparation of a monoclonal antibody against HA protein[J].Veterinary Science in China,2008,38(11). |
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| Authors: | ZHANG Xiang-bin XIE Qing-mei MA Jing-yun CAO Yong-chang JI Jun LI Shao-li BI Ying-zuo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | H1N1 subtype swine influenza virus hemagglutinin high soluble expression monoclonal antibody |
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