胸膜肺炎放线杆菌apx I A基因在不同宿主系统中的表达及密码子偏好性分析

用PCR方法从胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清1型参考株APP259的基因组DNA中,扩增了约954 bp的apx I A基因片段,分别构建了大肠杆菌表达栽体pGEX-4T-1/apx I A和毕赤酵母表达载体pPICZαA/apx I A.对目的基因密码子偏好性进行了分析,发现其中有4个大肠杆菌稀有密码子,占1.2%;有49个毕赤酵母稀有密码子,占15.4%.利用所构建的大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1/apx I A和毕赤酵母表达载体pPICZαA/apx I A分别进行表达.结果显示,目的基因在大肠杆菌中能以包涵体形式进行高效表达,其融合蛋白占菌体总蛋白的32%;在毕赤酵母中则以较低水平分泌表达至培养基的上清液中,40倍浓缩后方能检测到少量目的蛋白.证实,目的基因序列中的密码子偏好性影响其在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达.     

稳定表达马红球菌VapA蛋白细胞系的建立及其对巨噬细胞自噬的影响

通过构建稳定表达VapA蛋白的J774A.1巨噬细胞系,探究马红球菌VapA蛋白对巨噬细胞自噬的影响.构建vapA基因的重组慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-vapA,将其转染J774A.1细胞,经过嘌呤霉素筛选重组细胞,利用RT-PCR、Western-blot和免疫荧光鉴定重组细胞系中VapA蛋...     

德医双馨的博导祝淑钗

第九、十届河北省政协委员祝淑钗,现担任河北医科大学第四医院放疗科主任,是肿瘤放射治疗专业年轻的博士生导师。她在医疗战线上耕耘20载,背后是无数的艰辛和无怨无悔的付出。     

宋海新:“问题”明胶生产者

正宋新海一案引起社会的反思,不仅是对整个制药产业链,还有地方政府面对效益与民生时应如何权衡2013年3月29日,备受瞩目的河北阜城"明胶"一案,经阜城县人民法院审理,进行了一审宣判,河北学洋明胶蛋白厂负责人宋海新被判处17年有期徒刑,并处罚金200万元,其他13名被告人分别被判处六年以下有期徒刑、缓刑或处罚金。河北阜城明胶一案,不同于以往的个别企业、山寨厂生产问题食品、药品,毒胶囊案件反映出了整个制药产业链所存在的问题,此案件既暴露出企业基本责任的缺失,更反映出地方政府在效益与民生之间孰轻孰重应做好抉择。     

《大进军》中的荒诞思想和黑色幽默

在小说《大进军》中,多克托罗将荒诞思想和黑色幽默相结合,通过塑造一批小人物,表现了"战争就是赤裸裸的杀戮"这一本质。战争无视人的一切诉求,完全漠视生命和践踏生命。人的一切努力和理性诉求在战争面前都变得徒劳、可笑。世界是荒诞的,战争是疯狂的,多克托罗正是通过这些小人物引发了人们对这场战争的思考。     

教你看懂化验单

血清白蛋白：由肝脏制造并释放于血液中，是血浆蛋白中的主要成分。它的主要功能是通过调控血液渗透压来维持正常循环的血量。白蛋白也可以与药物及许多大分子结合担任输送的任务，所以又称它为“分子出租车”。     

不尽狗血滚滚来

"明胶门"事件的典型性,不在于情节之惊心或离奇,而在于它是全部环节的狗血性。"明胶门"刚浮现,查处过程就出现了狗血剧情。央视播出《每周质量报告》,涉事企业之一河北阜城县学洋明胶蛋白厂就发生大火,执法调查部门尚未进入,消防队就不得不出动。报道说,"火势持续了1个小时左右被扑灭"。县政府证实,该厂经理为隐匿销毁证据实施放...     

过荤过素都不好

<正>有人嗜肉如命,一餐不吃肉他就嘴馋;也有人谈肉色变,只吃素食。其实这些极端的饮食原则对健康都不利。过量食肉易患病关节炎免疫系统攻击关节黏膜所造成的风湿性关节炎给患者带来极大的痛苦。相对素食者而言,肉食者患关节炎的风险翻一番。红肉中的胶原质能激发免疫系统"攻击"行为。胆结石胆结石的患病原因之一就是饱和脂肪摄入过多。肉食者患胆结石的风险比素食者高出18%。老年痴呆症老年痴呆症和大脑     

重组纤维连接蛋白EDA-EDB融合蛋白的分子克隆

目的构建重组pET28a-EDA-EDB质粒,制备重组纤维连接蛋白EDA-EDB融合蛋白。方法采用基因重组技术,将EDA、EDB基因片段连接,再将该重组基因插入pET28a表达载体,表达重组融合EDA-EDB蛋白后,利用6×His/Ni-NTA纯化系统进行纯化,免疫印迹法检测。结果成功连接EDA、EDB基因片段,重组pET28a-EDA-EDB质粒;在大肠杆菌BL21(DE3)中高度表达重组蛋白,获得较纯的重组蛋白,免疫印迹法证实为FN的组分。结论EDA-EDB重组蛋白能采用pET系统在大肠杆菌中表达,并可通过6×His/Ni-NTA纯化系统进行纯化而获得免疫原。     

HSP70表达与脑挫伤经过时间的关系

目的观察大鼠脑挫伤后不同时间内HSP70蛋白表达的变化关系,探讨其与脑损伤时间的关系.方法应用免疫组织化学染色观察自由落体撞击大鼠脑挫伤后HSP70蛋白在伤后不同时间（0.5 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d、28 d）表达情况.结果0.5 h伤侧皮质挫伤灶周围HSP70阳性细胞表达开始增强,12 h达高峰,24 h降至较低,3 d又再次升高,以后逐渐下降,28 d恢复至正常对照组水平.结论HSP70免疫组化染色可以作为法医学推断早期脑损伤时间的敏感性指标之一;HSP70可作为判断脑损伤是否存在及区分生前和死后脑损伤的重要标志.