薄层色谱法检测丁丙诺啡

目的建立丁丙诺啡薄层色谱分析方法。方法血浆先用乙醇除蛋白,尿、水剂样品则直接加pH10.8Na2CO3/NaHCO3缓冲溶液后用氯仿提取,提取液经净化浓缩后进行薄层色谱分析。结果选定碘化铋钾作显色剂,丁丙诺啡薄层色谱分析展开效果较好,检测灵敏度为0.5μg,血浆、尿液和水剂中检出限分别为0.7、0.7和0.6μg/ml。结论该方法适用于涉毒案件中丁丙诺啡的日常检验。     

PCR扩增3因素对低拷贝模板STR分型的影响研究

目的探讨低拷贝模板(low copy number,LCN)STR扩增方法,提高LCN检材的检验成功率。方法采用Profiler P lusTM试剂盒与9947A对照DNA,改变Taq酶量、体系、循环次数3个因素进行扩增检验,了解各变量对扩增检测的影响。结果对低拷贝模板DNA,单纯增加Taq酶量或反应体系,扩增效率改善不明显;增加循环数,显著提高检验灵敏度;低于0.01ng的模板DNA,同时增加扩增体系、Taq酶量、循环数在一定程度上提高扩增效率。结论对于影响扩增的Taq酶量、体系、循环次数3个因素中,循环数影响最大,但应慎用34次及以上循环数;三者同时增加,对于低于0.01ng模板DNA的扩增可有效改善。     

载脂蛋白E与脑损伤的研究进展

载脂蛋白E(apolipoprote in E,apo E)在脑损伤愈后过程中起着重要的作用,在损伤后不同时段,apo E含量及出现部位均呈现一定的波动性,而这些问题对探讨脑损伤的治疗及在法医学中推断脑损伤时间有十分重要的意义。本文现就这些问题的相关研究作一概述。     

正常人短音AEP反应阈与主观听阈之间关系的研究

目的研究正常听力受试者的纯音主观听阈、短音主观听阈和短音AEP反应阈三者之间的关系,旨在达到通过短音AEP反应阈评估不同频率纯音听阈的目的。方法选择主观检查配合的正常听力受试者40名(80耳),依次测试1000Hz、500Hz、2000Hz和4000Hz四个频率的纯音主观听阈、短音主观听阈和短音AEP反应阈。结果用短音诱发AEP时,在四个测试频率上,均可见一个正相波,其潜伏期在7~15ms之间,平均潜伏期在10ms左右,我们命名为P10。在500Hz、1000Hz、2000Hz和4000Hz四个频率上,短音P10波反应阈与纯音主观听阈之差的均值和标准差分别为23.38±10.09、23.63±8.23、17.38±8.86、16.50±7.04dB。四个频率上的短音P10波反应阈与纯音主观听阈之差一般在20dB之内。因此,用短音P10波反应阈减去0~20dB,可以评估纯音听阈。结论短音诱发的P10波反应阈可以评估各个频率的纯音主观听阈,弥补短声诱发的ABR的不足。     

大鼠死后不同时间坐骨神经雪旺氏细胞核DNA的变化

目的探讨大鼠死后不同时间坐骨神经雪旺氏细胞核DNA的变化及其与死亡时间的关系。方法应用Feulgen染色法及计算机图像分析技术,观测大鼠死后即刻至9d坐骨神经雪旺氏细胞核DNA染色变化及其图像分析参数,所得数据进行统计学分析。结果雪旺氏细胞核在死后6-18h细胞核呈紫红色、长椭圆形,轮廓清晰,其长轴方向与坐骨神经走向一致,死后24h着色变淡、着色面积变小,最终完全消失;在6h-9d内目标面积和积分光密度随死亡时间的延长而逐渐减小,且其均值均与死亡时间明显相关,并得出对应的回归方程。结论大鼠死后9d内,其坐骨神经雪旺氏细胞核DNA变化与死亡时间有一定的相关性。     

外伤性鼓膜穿孔面积测定方法及41例分析

目的探索外伤性鼓膜穿孔面积大小的测量方法并分析41例病例。方法用图像分析软件Photoshop分析耳内窥镜获得的外伤穿孔鼓膜照片,计算穿孔与鼓膜面积比例并分析外伤性鼓膜穿孔的法医临床学特性。结果外伤性鼓膜穿孔通常为小穿孔,边缘血污部分外翻,形状不规则,左侧居多。结论耳内窥镜可以清晰记录外伤性鼓膜穿孔,图像处理软件可以定量分析鼓膜穿孔大小。     

抗原修复法和固定液pH值对切创皮肤免疫组化染色的影响

目的比较不同抗原修复方法对不同pH混合福尔马林固定液固定的切创皮肤的免疫组化染色效果。方法小鼠皮肤切创后3d取材,分别用pH为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0的混合4%福尔马林固定液固定,经高压锅、微波、胰蛋白酶、胃蛋白酶、微波+胰蛋白酶法对抗原修复,观测caspase-3,caspase-6,caspase-7,IL-8,IL-10的免疫组化染色(SABC法)效果。结果热修复法阳性细胞率高于蛋白酶修复法,高压修复法阳性细胞率略高于微波修复;高压修复法的脱片现象高于微波修复,胃蛋白酶修复脱片高于胰蛋白酶修复;微波+胰蛋白酶双修复法阳性细胞率最高,不发生脱片现象;固定液pH值为7.0和8.0时,阳性细胞率最高,染色效果最好。结论pH7.0和8.0混合福尔马林固定液固定的切创皮肤,经微波+胰蛋白酶法修复抗原,免疫组化染色效果最佳。     

Genetic STRs variation in a large population from Tuscany (Italy)

Allele frequencies for 17 STRs, together with some parameters of forensic interest, were estimated in a sample of 835 unrelated individuals born in Tuscany, an Italian region. These data were compared with Italian, Chinese, Kosovo Albanian, Romanian and Tunisian populations, strongly represented in this area. No significant differences in single loci were detected, except for Chinese in comparison with all the other populations.     

大鼠实验性脑挫伤后不同时间脑apoE的表达

目的观察大鼠实验性脑挫伤后脑内apoE蛋白变化的时空性规律。方法采用自由落体撞击法致大鼠脑挫伤模型,观察伤后不同时间(0.5h、2h、6h、12h、24h、3d、7d、14d)apoE蛋白的变化,并用计算机图像分析技术作定量统计分析。结果伤后0.5h组脑皮质神经元apoE出现阳性表达,3d达到高峰,随后下降;伤后0.5h组在海马出现apoE强阳性反应,CA1区在伤后3d达到高峰,而CA2~CA4区在24h达到高峰,随后逐渐下降,伤后海马apoE表达以CA1区最强。结论挫伤后apoE时空性变化规律可作为脑损伤时间推断、早期诊断及生前伤和死后伤鉴别的一个新的参考指标。     

冠心病心肌线粒体DNA5.0kb缺失的检测

目的探讨冠心病心肌线粒体DNA5.0kb缺失的检测。方法120例心脏的左、右心室肌各1份,分为正常对照组、病例相关组和病例组,每组40例80个样本。用断裂点连接PCR分别扩增样本含线粒体DNA5.0kb缺失的片段,巢式PCR检测含5.0kb缺失片段的扩增产物的准确性,半定量PCR对该产物进行定量,聚丙稀酰胺凝胶电泳检测PCR产物。结果在对照片段扩增成功的样本中,正常对照组未检出线粒体DNA5.0kb缺失;病例相关组检出2例,占6.07%(2/33);病例组检出29例,占85.29%(29/34);左、右心室肌线粒体DNA5.0kb缺失量分别为0.0015%~0.7813%和0.0008%~0.3906%。病例组与其他两组缺失率经χ2检验,其差异具有极显著性意义(P<0.001);左、右心室肌的缺失量经t检验,其差异具有极显著性意义(P<0.001)。结论冠心病心肌多有线粒体DNA5.0kb缺失,缺血明显的区域其缺失量也较高。