快速PCR仪与普通PCR仪扩增效果的比较研究

目的比较快速PCR仪与普通PCR仪的扩增效果。方法浓度为0.1、0.05、0.025、0.0125、0.0063ng/μL的9947A标准品各取样100例,采用Identifiler Plus试剂盒构建扩增体系,其中50例在普通PCR仪(9700型扩增仪)上进行扩增,50例在快速PCR仪(Speed cycler2扩增仪)上扩增,3500x L型遗传分析仪检测,对比每种浓度组两种扩增仪的检验结果。结果两种PCR仪的检出率均无差异(P0.05)。但当9947A的浓度为0.0125、0.0063ng/μL时,普通PCR仪检验样本的STR基因座检出数(13.7±1.0;11.3±1.5)均高于快速PCR仪(13.1±1.3;9.9±1.9),差异有统计学意义(P=0.029;P0.001);当9947A的浓度为0.1、0.05、0.025 ng/μL时,普通PCR仪检验样本的图谱峰高(18931±4625;13437±3165;5752±1344)均高于快速PCR仪(16929±4034;11815±4120;4865±1401),差异有统计学意义(P=0.023;P=0.030;P=0.002)。结论快速PCR仪可在较短的时间内达到与普通PCR仪相当的检出率,适合于实际案件中的应用;普通PCR仪检验获得的STR分型结果质量可能更高。     

A型H1N1及H3N2亚型流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

根据A型H1N1亚型流感病毒2009年北美变异株和H3N2亚型流行株的基因序列,设计了3套特异性引物、TaqMan探针,分别用不同的荧光基团标记,以构建的A型流感病毒及H1N1和H3N2亚型流感病毒基因重组质粒作为阳性对照,经反应条件优化,特异性、敏感性和重复性试验,筛选出3套不同的反应体系及同一个反应参数,建立了可同时检测A型流感病毒、H1N1和H3N2亚型流感病毒的实时荧光RT-PCR方法。结果表明,该方法可特异地检测H1N1(人源、猪源)、H3N2(猪源),禽流感病毒H5、H9等A型流感病毒,且与新城疫病毒、减蛋综合征病毒等其他病毒不发生交叉反应,具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,试验耗时仅3h。表明,建立的方法,一次试验即可完成A型流感病毒的初筛和H1N1、H3N2亚型流感病毒的初步确认定型。     

上下班途中的工伤

通过对现行法律规定的分析,并结合法理分析,职工在上下班途中,受到机动车事故伤害,被认定为工伤需要具备积极条件与消极条件.职工在上下班途中受到机动车事故伤害而被认定为工伤的,交通事故赔偿和工伤保险待遇赔偿应分开单独进行.     

美国行政赦免制度及其对死刑执行的限制

赦免是各国以外在于司法制度的方法干预司法的一项制度.美国行政赦免制度是美国行政干预司法的制度.美国联邦和部分州保留了死刑,其行政赦免在限制死刑执行中曾经起到了极其重要的作用.虽然自上世纪70年代以来,美国行政赦免在限制死刑执行中的运用已变得较为少见,但其仍是一个有效的限制死刑执行的制度.     

美国警察教育史迹及借鉴

美国警察教育的历史可以分为三个阶段,至今发展为学历教育与岗位培训相互独立、相互补充的关系。美国警察的学历教育由普通院校的专业系院负责,而岗位培训则完全由警察机关下属的培训机构负责。由美国警察教育的发展历史可以看出,美国警察教育中并不是没有学历教育,而是学历教育和岗位培训各自承担着不同的使命。警察教育特别是岗位培训的质量不仅仅取决于教育培训部门的质量,更为重要的是取决于生源的质量。     

廉政公署肃贪倡廉的经验与启示

香港经济的腾飞与廉政公署的廉洁、高效是密切相关的,廉政公署（ICAC）的成功之处在于其高度的独立性、三管齐下的措施、法律的保障以及其自身的高效廉洁。文章通过对香港廉政公署各部门的具体运作情况加以分析,以资借鉴廉署的成功经验,并为我国内地反腐败工作提出一些建议。     

Ali A Mazrui: a great man,a great scholar

In 2013, Ali A Mazrui gave a lecture in Muscat (Oman) about Barack Obama, the 44th president of the USA, in which he suggested that Obama was a great man but not yet a great president. Mazrui said we would have to wait and see if Obama would become a great president. I think Mazrui was right. But we would not have to wait any longer to say: ‘Ali A Mazrui: a great man, a great scholar’. On 12 October 2014, Ali Mazrui passed away at the age of 81. He was indeed a great man and an extraordinary scholar. This essay is a special tribute to him.     

经鼻给药沉香精油对单次长时间应激小鼠PTSD样行为及海马GluN2A、GluN2B表达的影响

目的 评价经鼻给药沉香精油对单次长时间应激（single-prolonged stress,SPS）诱导的小鼠创伤后应激障碍（posttraumatic stress disorder,PTSD）样行为的作用,并从突触的角度探讨其可能的作用机制。方法 通过气相色谱—质谱联用定性分析沉香精油主要成分;将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、沉香精油低剂量组、沉香精油高剂量组和阳性药组\[罗利普兰(Rolipram,ROL)\],每组8只。采用行为学实验评价SPS小鼠的PTSD样行为：分别通过恐惧记忆测试实验检测小鼠恐惧凝滞时间,旷场和高架十字迷宫实验评价小鼠的焦虑样行为。Western blot法检测小鼠海马组织N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR）2A亚单位（GluN2A）、2B亚单位（GluN2B）蛋白表达水平。结果 沉香精油样品中共检测到117种挥发性成分。动物实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠表现出强烈的焦虑样行为及恐惧记忆消退异常（P＜0.05）,而沉香精油及阳性药ROL可明显改善SPS小鼠的异常行为（P＜0.05）,并逆转GluN2A、GluN2B的异常表达（P＜0.05）。结论 经鼻给药沉香精油对SPS诱导的小鼠PTSD样行为具有改善作用,其机制可能与调控GluN2A、GluN2B蛋白表达有关。     

金黄色葡萄球菌Fc段受体结合蛋白A基因的克隆与原核表达

为研制葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)的相关免疫试剂盒,设计了1对引物,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出了876bp的细胞壁结合蛋白SPA基因,该基因编码292个氨基酸,包含了E、D、A、B、C 5个IgG结合结构域。构建了原核表达载体pET28a(+)-SPA,经IPTG诱导,表达出分子质量约35.0ku的SPA蛋白,并应用亲和层析柱纯化了SPA蛋白,Western-blot分析表明纯化的SPA蛋白具有生物学活性。     

口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的制备和鉴定

以原核表达并纯化的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3A免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得3株能稳定分泌抗3A蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为3H2、4B1、7F5,并对这3株单抗进行了生物学鉴定。结果显示,单抗3H2和4B1为IgG2a亚型,7F5为IgG2b亚型。单抗7F5针对的表位与3H2和4B1两株单抗的表位不一致;这3株单抗均能够与FMDV特异性结合,且单抗4B1与所有3A相关蛋白均反应。稳定性鉴定结果表明,获得的3株杂交瘤细胞均能稳定分泌单克隆抗体。研究结果为进一步探索3A蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。