伏基弗对黄牛人工感染肝片形吸虫童虫、日本血吸虫的杀虫效果

Closantel(译名伏基弗)是比利时杨森制药公司生产的一种能杀多种家畜寄生虫的有效药物。该药对肝片形吸虫成虫有效已有记载,但对日本血吸虫是否有效尚未见报道。本试验拟以日本血吸虫成虫和4周龄肝片形吸虫人工感染黄牛,以观察该药对这两种寄生虫的杀灭效果。     

合并用药治疗黄牛东毕属血吸虫和肝片吸虫病的试验

为了探索治疗东毕属血吸虫病和肝片吸虫病的高效药物及方法,我们于1986～1990年开展了本项试验,提出了合并用药治疗混合感染东华属血吸虫和肝片吸虫的药物组合、投药途径及适宜剂量,达到高效、安全、一针治疗两病的目的。现将结果报告如下。     

基于TPX和CatB4重组蛋白的绵羊肝片吸虫病间接ELISA诊断方法的建立

为了建立早期快速诊断绵羊肝片吸虫病的血清学方法,原核表达肝片吸虫TPX和CatB4重组蛋白。分别以TPX、CatB4重组蛋白作为包被抗原,建立2种检测肝片吸虫血清抗体的间接ELISA方法。采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量,同时对间接ELISA方法的其他反应条件进行了筛选。蛋白免疫印迹结果显示,重组蛋白具有良好的抗原活性。这2种间接ELISA方法批内和批间重复试验的最大变异系数均小于10%,且这2种方法与华支睾吸虫、日本血吸虫和捻转血矛线虫阳性血清均无交叉反应。对来自黑龙江省各地区的95份绵羊血清进行检测,阳性率分别为18.95%和22.11%。结果表明,本研究中建立的2种间接ELISA方法具有良好的特异性和敏感性,为肝片吸虫病的早期诊断和流行病学调查提供了必要手段。     

新血防片驱除黄牛枝睾阔盘吸虫的试验报告

国产新血防片,又名“血防846”,即六氯对二甲苯。该药已应用于治疗人的血吸虫病,对驱治家畜血吸虫、肝片吸虫、华枝睾吸虫、矛形双腔吸虫等病也有不同程度的效果。动物实验提示,本药可能通过原浆毒的作用,使虫体细胞变性,引起性腺萎缩,肌肉活动功能减弱等(上海寄生虫病研究所)。 目前,国内外对防治家畜胰吸虫病尚无可靠的方法和药物。报告者之一在黑龙江省参加了崔贵文同志主持进行的应用“血防846”等药物驱除羊只胰阔盘吸虫的试验工作。试验结果说     

可利苄对人工感染肝片吸虫绵羊的预防试验

我们于1983～1984年先后对56只人工感染肝片吸虫绵羊和4只自然感染肝片吸虫绵羊,应用陕西省化工研究所1981年合成的可利苄(Coriban)进行了驱虫试验。随后又于1984年底到1985年初,对28只人工感染肝片吸虫绵羊进一步用可利苄做了最小有效剂量的试验,同时对4只健康绵羊做了毒性试验。在肯定可利卡对不同日龄(特别是幼龄)肝片吸虫有特效、毒性低、安全系数大的基础上,采取小剂量、连续给药的方法,探讨了其对肝片吸虫感染的预防效果。     

可利苄对自然感染肝片吸虫绵、山羊的区域试验

1983～1985年,我们应用陕西省化工研究所1981年合成的可利苄(Coriban),对84只人工感染肝片吸虫绵羊和4只自然感染肝片吸虫绵羊进行了驱虫效果试验,并对4只健康羊做了毒性试验观察。确证可利苄对不同日龄肝片吸虫有很高的疗效,且用药安全。随后又对19只人工感染肝片吸虫绵羊进行了小剂量多次连续给药预防肝片吸虫感染的试验,取得了较满意的结果。为了验证可利苄在田间的应用效果,在实验室研究的基础上,于1985年11月,1986年9月分别在四川、吉林及甘肃省的部分肝片吸虫病流行区对绵、山羊进行了区域试验。     

肝蛭净防治春季羊肝片吸虫效果的观察

我省牛、羊肝片吸虫病流行的面积较广。每年春季牛、羊由于肝片吸虫侵害而死亡的数量相当大,直接影响着畜牧业生产的发展。为控制本病流行,我们于1988年采用对肝片吸虫发育各个阶段(感染后1～4周的早期幼虫、4～8周幼虫、超过8周的成虫)均有作用的肝蛭净,进行防治肝片吸虫最佳时间的观察,以在适当月份进行驱虫,达到羊只春季无肝片吸虫寄生。     

肝15号驱杀牛羊人工感染肝片吸虫童虫的研究

过去防治家畜肝片吸虫病主要使用硫双二氯酚、硫双三氯酚、硝氯酚、肝三号和肝九号等药物,这些药物主要用于驱杀肝片吸虫成虫,对童虫无效或效果不理想,最近国内出现的驱杀肝片吸虫新药双酰胺氧醚,因剂量太大而推广困难。肝15号是内蒙古兽医药品监察所研制成功的一种磺酰胺的卤化衍生物,是目前可用于临床的高效低毒兼具驱杀肝片吸虫成虫和童虫的特效药。羊按2～6毫克/公斤,牛按12毫克/公斤的剂量一次口服对4周龄肝片吸虫童虫具有100％的驱杀效果,所有受试动物无不良反应。     

肝片吸虫诊断候选抗原的筛选

旨在筛选出肝片吸虫诊断候选抗原,拓展诊断肝片吸虫感染引起的肝吸虫病的靶点。通过蛋白免疫印迹试验从肝片吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库中筛选出肝片吸虫特异性抗原基因,对阳性克隆进行测序和生物信息学分析。克隆特异性抗原基因,并连接表达载体pET-32a(+),构建重组质粒,转化至BL21(DE3)感受态细胞,通过IPTG诱导重组蛋白表达,用SDS-PAGE和Western-blot验证其表达情况。结果表明,共计获得了18个阳性克隆。通过候选抗原核酸序列同源性比较,发现肝片吸虫假定蛋白D915_000758具有完整的开放阅读框。经生物信息学分析,发现该蛋白cDNA全长为345 bp,编码114个氨基酸。成功扩增出该特异性抗原基因,SDS-PAGE结果表明重组蛋白pET-Fh以包涵体形式表达,分子质量大小约为32 ku;Western-blot证明该重组蛋白可以被肝片吸虫阳性血清特异性识别。结果提示,假定蛋白D915_000758可作为潜在的肝片吸虫病诊断候选抗原,应用于肝片吸虫感染引起的肝吸虫病的诊断技术中。     

三氯柳胺的合成及其对牛羊肝片吸虫的活性

卤代水杨酰替苯胺化合物在兽医抗寄生虫中已被广泛应用,国外商品很多,并且大多对肝片吸虫有优良的驱杀作用。 三氯柳胺(肝三号)化学名称为:3,4＇,5-三氯水杨酰替苯胺。是我们在筛选牲畜抗肝片吸虫药物中发现的一种新药。其对肝片吸虫成虫作用显著,对童虫也有一定的驱杀效果,是一高效、低毒的抗肝片吸虫药物。其生产工艺简单,原料易得,具有推广使用价值。     

甘南牧区肝片吸虫中间宿主的种类调查

通过生物学试验和形态学鉴定对甘肃省甘南牧区肝片吸虫中间宿主的种类进行了调查,首次发现青海萝卜螺Radix cucunorica(M(?)llendorff)为肝片吸虫的中间宿主,并证实了狭萝卜螺R。Lagotis(S'chrank)也是该地区肝片吸虫的中间宿主。根据试验结果对狭萝卜螺的地区性差异以及中间宿主螺与肝片吸虫病流行的关系等问题进行了讨论。     

片形吸虫第一内转录间隔区DNA多态性的研究

以不同地区的片形吸虫虫株为研究对象 ,经PCR扩增出了ITS 1部分基因片段 ,采用单链构象多态性 (SSCP)方法 ,并结合序列分析研究了不同地区片形吸虫ITS 1DNA的多态性。不同地区的样品经SSCP分析 ,显示 3种带型 ,第 1种为大片形吸虫的带型 ,第 2种为肝片形吸虫的带型 ,第 3种为 2种带形的混合带型。广西区样品和大部分贵州省样品属于大片形吸虫带型 ;四川省、黑龙江省和部分贵州省样品为混合带型 ;南京市和甘肃省样品为肝片形吸虫带型或混合带型。测序结果表明 ,根据ITS 1基因的序列变异位点可区分 2种片形吸虫 ;表现为混合带型的样品在变异位点具有多态性。本研究结果显示 ,ITS 1片段可作为遗传标记用以区分大片形吸虫和肝片形吸虫 ,同时也证实 ,在我国除了这 2种片形吸虫外 ,还可能存在着“中间型”的片形吸虫     

片形吸虫线粒体nad1基因的序列分析及种系发育

为阐明来自中国、尼日尔、法国和美国的片形吸虫分离株在线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1基因(nad1)部分序列(pnad1)的遗传变异情况,并以pnad1序列进行种系发育研究,利用PCR扩增了中国、尼日尔、法国和美国片形吸虫分离株的pnad1序列并与GenBankTM中片形吸虫相应序列进行了比较,进行了种系发育分析.结果显示,所有片形吸虫样品的pnad1序列长度均为446 bp,中国、尼日尔、法国和美国肝片吸虫分离株与GenBankTM公布的肝片吸虫相应序列的种内变异为0.2%～0.7%,0.2%～0.9%,0.9%～2.0%,0.2%～0.9%;中国及尼日尔大片吸虫分离株与已报道的大片吸虫相应序列的种内变异为1.8%～2.7%,1.8%～3.4%;中国中间型虫株与中国及尼日尔大片吸虫分离株以及网上报道的大片吸虫的序列差异为5.6%～6.3%,5.6%～7.8%,5.7%～8.1%.中间型片形吸虫在遗传学上介于大片吸虫与肝片吸虫之间,但与大片吸虫的遗传关系更近.表明,片形吸虫pnad1序列可作为种间鉴定及种内遗传变异研究的标记;在中国的确存在中间型片形吸虫.     

肝蛭净对牦牛肝片吸虫的药效试验

四川省西北部牧区牦牛肝片吸虫感染率相当高 ,导致牦牛消瘦 ,生产性能下降 ,严重时可引起母牛不孕、流产 ,公牛繁殖力降低 ,甚至死亡。为选择高效驱虫药 ,笔者于 2 0 0 1年 7～ 8月 ,在川西北牧区两个牧场选择感染肝片吸虫的牦牛进行了肝蛭净的驱虫效果试验。　　材料和方法　在川西北牧区两个牧场选择感染肝片吸虫的牦牛 12头 ,采集粪便 ,用循序沉淀法进行肝片吸虫粪便虫卵检查 ,称重 ,按体重投服肝蛭净(瑞士汽巴 -嘉基有限公司生产 ,批号 6 0 80 0 5 ) 12ｍｇ/ｋｇ。投药后 7ｄ再采粪便 ,如上法检查肝片吸虫粪便虫卵 ,计算虫卵减少率 ,判…     

实验感染肝片吸虫山羊血浆中一氧化氮和肿瘤坏死因子的动态变化

选择6只平均体重13.75 kg±1.35 kg、8～12月龄的山羊.用硝酸还原酶法和放射免疫法测定山羊血浆中一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子(TNF-α),研究山羊血浆中NO和TNF-α正常值以及感染肝片吸虫后的动态变化.结果表明,山羊感染肝片吸虫后第3周血浆中的NO开始升高,持续至15周,TNF-α感染后第5周开始升高,一直持续至试验结束;病理剖检发现感染肝片吸虫的山羊肝肿胀,且有明显的损伤病灶.试验结果提示,NO和TNF-α可能参与了肝片吸虫损伤肝的过程.     

四氯苯磺酰替苯胺驱杀自然感染肝片吸虫效果观察

四氯苯磺酰替苯胺驱杀绵羊人工感染肝片吸虫童虫的效果观察已有报道。为了进一步观察对自然感染肝片吸虫的驱杀效果,我们于1988～1989年进行了对绵羊自然感染肝片吸虫的驱杀效果试验,并在此基础上进行了稳定性效果观察和大面积防治试验,均获得满意效果。     

实验感染肝片吸虫水牛血液和肝中NO和TNF-α变化的研究

用酶法和放射免疫方法测定２０ 头健康水牛血清及肝匀浆中一氧化氮（ Ｎ Ｏ） 和肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα） ,研究了水牛血液和肝组织中 Ｎ Ｏ 和 Ｔ Ｎ Ｆα的正常水平以及感染肝片吸虫后的动态变化。结果慢性、急性感染组水牛血清 Ｎ Ｏ 含量均从感染肝片吸虫后第３ 周开始逐渐升高,并在第５ 、７ 、１１ 、１３ 周显著高于对照组,以后一直在高于对照组的水平波动,直至试验结束;感染肝片吸虫的水牛肝组织 Ｎ Ｏ 含量也高于对照组。慢性和急性感染组水牛血清 Ｔ Ｎ Ｆα都从感染后第５周开始升高,并分别在第７ 、１５ 、２１ 周和１３ 、１７ 周显著或极显著高于对照组。且反映肝损伤的特征性酶谷草转氨酶（ Ａ Ｓ Ｔ） 、谷氨酸脱氢酶（ Ｇ Ｌ Ｄ Ｈ） 和γ谷氨酰转肽酶（ Ｇ Ｇ Ｔ） 在不同时期均有不同程度的升高。结果提示, Ｎ Ｏ 和 Ｔ Ｎ Ｆα可能参与宿主抗肝片吸虫和介导肝片吸虫诱导肝损伤的过程。     

肝片形吸虫体内谷氨酸的定性及定量研究

用反相梯度洗脱柱前衍生化荧光检测高压液相色谱法（ＨＰＬＣ），测得肝片形吸虫体内谷氨酸（ＧＡ）的含量为８２．３０μｇ／ｇ±９．５３μｇ／ｇ虫湿重，虫体尾部ＧＡ含量略高于头部。经体外培养证实，肝片形吸虫能摄取外源性ＧＡ。     

冬季饲喂蒸稻草提高硝氯酚对黄牛肝片吸虫驱虫效果

我县延边黄牛肝片吸虫病流行严重。据报道,稻草上附着的肝片吸虫囊蚴是感染的来源之一。为此,我们进行了冬春季节(10月至次年5月)饲喂蒸稻草和生稻草牛只的硝氯酚驱除肝片吸虫的对比试验。试验中只均为自然感染肝片吸虫的阳性牛,其中试验组10头牛,对照组24头牛,均每公斤体重投药6毫克。试验组于投药后7～125天、对照组于4～130天扑杀,检查肝脏、胆管及胆囊中的虫体,判定疗效。结论如下:     

国产“拜耳9015”对牛羊肝片吸虫病的疗效扩大试验

近年来驱杀肝片吸虫的药物较多,但疗效好而安全的药物却为数尚少。Boray氏和Happich氏(1968)曾用11种驱杀肝片吸虫的药物对绵羊人工感染肝片吸虫病做了效果比较试验,结果发现“拜耳9015”药物对牛羊使用,既安全,且又疗效高。国产“拜耳9015”是1971年武汉医药工业研究所合成的,兰州兽医研究所先后用该药进行了对绵羊肝片吸虫病的疗效和毒性观察(1971),对黄牛肝片吸虫病的疗效和毒性观察(1972、1973),以及