家鹅球虫种类的调查研究

1983年4～9月间在江苏省邗江县六圩公社顺江、马桥两个大队和西湖公社金圩大队先后发现三群鹅爆发球虫病。本报告重点研究这三群鹅爆发球虫病的球虫种类。经卵囊分离、培养、量度、详细观察、摄影等,鉴定为两属4种:鹅艾美耳球虫E.anseris,有毒艾美耳球虫E. nocens,多斑艾美耳球虫E. stigmosa和稍小太泽球虫Tyzzeria Parvula,其中艾美耳属三种,太泽属1种。经统计100枚卵囊,各占的比例鹅艾美耳球虫43％,有毒艾美耳球虫44％,多斑艾美耳球虫10％,稍小太泽球虫3％。前三种危害严重。     

毁灭泰泽球虫卵囊孢子化过程的超微结构观察

毁灭泰泽球虫(Tyzzeria perniciosa)属于复顶亚门孢子虫纲球虫目艾美耳科,是家鸭的一种致病球虫。刚从鸭粪排出的新鲜卵囊没有孢子化。孢子化后,卵囊内便形成8个子孢子,但无孢子囊。由于制备卵囊超薄切片的困难,球虫卵囊孢子化过程的超微结构研究被阻碍了许多年,直到1976年Andersen等研制出一种卵囊双切片技术,才成功地解决了这一难题。目前,已有布氏艾美耳球虫和龚地弓形虫卵囊孢子化过程的研究报道,毁灭泰泽球虫卵囊孢子化的细微结构尚无记载。故此,作者对该种卵囊孢子化过程的详细结构进行了研究。(一)材料与方法 实验所用卵囊是以纯种毁灭泰泽球虫卵囊接种无球虫小鸭,从收集的粪便分离得到。取新鲜卵囊在26℃条件下分别孢子化0、6、12和24小时,然后每份材料按照Andersen介绍的方法制作卵囊的超薄切片,染色后,在JEM100s电镜下观察。     

磁场对家兔球虫卵囊发育的影响

国内外不少研究人员对不同的气候条件、不同的温度、湿度、不同的理化因素处理给予球虫卵囊的影响做了大量试验,但磁场对球虫卵囊的作用尚未见报道。本试验初步探讨了恒磁场对于家兔球虫卵囊发育的影响。 (一)材料与方法 1.兔球虫卵囊:取自本所兔球虫病课题组第86-5-26号试验兔大肠内容物,以饱和盐水漂浮法富集卵囊显微镜下检查,含有四类球虫,即中型艾美耳球虫、小型艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫、新兔艾美耳球虫。     

小鹅感染柯氏艾美耳球虫的病理组织学观察

鹅球虫种类较多,而致病性较强的有E.truncata,E.arseris和E.kotlani(柯氏艾美耳球虫)。前二者发现较早,其病理形态的观察已有较详细的报道,后者于1964年为Grafner和Graubmann首次发现,至今还未见有详细的病理形态学的研究报道,为了弄清E.kotlani的致病力,以利于该病的防治,我们特进行了以下病理形态学的观察。 (一)材料和方法     

安徽省家畜家禽球虫种类调查

采集安徽省濉溪等１１个县市的１２种家畜家禽粪样，观察６１５６个球虫卵囊，共发现４属８４种球虫。其中艾美属（Ｅｉｍｅｒｉａ）７４种，等饱属（Ｉｓｏｓｐｏｒａ）３种，泰泽属（Ｔｙｚｚｅｒｉａ）５种，温扬属（Ｗｅｎｙｏｎｅｌｌａ）２种。有５２种球虫为安徽省首次发现；法尔氏艾美球虫（Ｅ．ｆａｒｒａｅ）、热带艾美球虫（Ｅ．ｔｒｉｐｉａｌｉｓ）为国内新记录；艾氏泰泽球虫（Ｔ．ａｌｌｅｎｉ）为首次在家禽中发现。     

地克珠利溶液剂防治鸡球虫病的药效试验

对14日龄海兰白商品代公雏鸡分别给予高、中、低剂量的地克珠利溶液剂及加福(马杜霉素铵盐)、地克珠利预混剂,15日龄时经口向嗉囊接种柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)卵囊悬液0.5 mL(含球虫卵囊1.0×105个).试验第8 d测定增重率、相对增重率、盲肠病变值、卵囊值、抗球虫指数等.综合评价试验结果,以地克珠利溶液剂的中剂量效果最好,增重率达74.9%,抗球虫指数达189.6,卵囊值为0.     

农牧宝消毒剂杀灭鸡球虫卵囊的试验

为了验证农牧宝在1:200浓度下,对鸡球虫卵囊的杀灭作用,于1988年7、8月进行了本项试验。 (一)材料和方法 1.试验用药:由国家机械委204研究所、陕西省凤县兽药厂联营生产的农牧宝——复合酚消毒剂。批号:(87)陕兽药字07126。 2.试验用卵囊:天津农学院牧医系寄生虫教研室保存的柔嫩艾美尔球虫(Eimeria lennlla)。 3.试验鸡:为34日龄无球虫感染的京白公鸡。     

次氯酸钠处理对柔嫩艾美尔球虫卵囊的影响

次氯酸钠处理对柔嫩艾美尔球虫卵囊的影响段嘉树，张秀云（北京农学院１０２２０８）在球虫的免疫学、生物学研究中常常需要大量纯化的卵囊，常用的方法有２种：其一是离心淘洗法，主要用于直接收集粪便中的卵囊；其二是酶消化法，主要用于收集宿主组织中的卵囊。无论哪种...     

复合益生素对鸡球虫致病性的影响

在试验鸡的饮水中添加复合益生素 ,同时用柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella)南宁株孢子化卵囊感染鸡 ,通过对试验鸡的增重、发病率、死亡率、每克粪便卵囊数 (EPG)、盲肠病变记分等指标的测定 ,计算其抗球虫指数 (ACI)。结果 ,在饮水中添加复合益生素的鸡比对照组鸡平均多增重36g ,发病率、死亡率分别减少 4 0和 2 5个百分点 ,EPG少 3.98× 1 0 5,平均盲肠病变记分少 1 5 .8分 ,试验组的ACI为 1 73,对照组的ACI为 80 .1 5。试验结果表明 ,在饮水中添加复合益生素的试验鸡感染强毒球虫卵囊后 ,在减少鸡的发病率、死亡率和EPG ,减轻球虫病对鸡增重的影响和盲肠病变的严重程度 ,降低鸡球虫病对鸡所造成的经济损失等方面均有良好的作用     

温度对鸡早熟艾美球虫孢子囊形成的影响

从混合鸡球虫卵囊中分离单卵囊,感染增殖后收获大量单一种类球虫卵囊,将卵囊分别置于10~36℃、38~39℃、40℃恒温箱内培养,研究了温度对鸡早熟艾美球虫孢子囊形成的影响。结果显示,10~36℃时,孢子囊形成时间随温度提高而提前,每小时孢子囊形成率和增长幅度也随温度的提高而上升。10℃时,77 h初次形成孢子囊,孢子囊形成率达19.047%,经98 h孢子囊形成率达92.360%;36℃时,5 h初次形成孢子囊,孢子囊形成率达26.471%,经8 h孢子囊形成率达94.180%;38~39℃时,孢子囊形成率达一定时就不再上升,且随温度提高孢子囊形成率反而下降。38℃时,最高孢子囊形成率为52.800%,39℃时最高孢子囊形成率为12.500%;40℃时,球虫卵囊不会形成孢子囊,39~40℃是球虫卵囊形成孢子囊的临界温度。将卵囊分别置于40~65℃恒温干燥箱内经0.5 h处理后又经25~30℃培养24 h的结果表明,卵囊经40~50℃处理后仍可形成孢子囊,而经55℃以上温度处理就被杀死,45~50℃是球虫卵囊的生死临界温度。     

陕西省部分地区鸡肠道寄生虫感染情况的调查

为调查陕西省鸡肠道寄生虫的感染情况,采用饱和盐水漂浮法和希塞氏糖溶液漂浮法,对陕西省6个地区的18个养鸡场共336份粪便样品中的寄生虫卵/卵囊进行了检测。初步鉴定了这些地区鸡的粪便中存在艾美耳球虫卵囊、隐孢子虫卵囊、鸡异刺线虫卵和鸡蛔虫卵,其感染率分别为44.94%、0.89%、25.30%和1.19%。为鉴定隐孢子虫种别,以基于18SrRNA基因的巢式PCR对分离的隐孢子虫卵囊进行种类鉴定,结果发现,3份样本中所发现的隐孢子虫均为贝氏隐孢子虫。本研究结果表明,陕西省这6个地区鸡肠道寄生虫感染较为普遍,尤以球虫和异刺线虫的感染率较高。     

兔球虫搭载科学卫星的初步试验

1990年10月,我们将无残艾美尔球虫、肠艾美尔球虫和穿孔艾美尔球虫卵囊搭载在我国反回式科学试验卫星上,旨在探索空间条件对兔球虫的孢子化、致病力等方面的影响。 (一)材料与方法 1.试验用无残艾美尔球虫、肠艾美尔球虫和穿孔艾美尔球虫,均从球虫病兔的肠内容物经饱和盐水浮集获得,滴于直径为1cm的滤纸片上,密封于2个特制的塑料盒内。1盒搭载卫星,另1盒     

云南省山绵羊球虫种类调查

本项研究对云南省12个地、州、市的20个县565只(1.5岁以下)山羊及7个地、州、市的13个县327只(7月龄以下)绵羊的粪样中的球虫卵囊进行了检查。山羊检出艾美尔球虫10种,粪样中有3～5个种的占66％。它们是;Ei-meria ninakohlyakimovae(76.3％)、E.caprina(73.8％)、E.arloi-ngi(70.3％)、E.christenseni(59.3％)、E.hirci(53.1％)、E.alijevi(49.4％)、E.capro-vina(26.9％)、E.jlchijevi(6.9％)、E.apsheronica(6.0％)、E.punctata(5.1％)。绵羊检查艾美尔球虫12种,粪样中有3～6个种的占75.5％,E.crandallis(73.7%)、E.ahsata(71.9％)、E.ovinoidalis(68.8％)、E.parva(48.3％)、E.bakuensis(E.ovina)(36.4％)、E.weybr-idgensis(26.9％)、E.pallida(17.4％)、E.faurei(17.4％)、E.granulosa(14.7％)、E.in-tricata(14.6％)、E.gonzalezi(14.4％)、E.punctata(1.2％)。对卵囊各部位的大小进行了测量,列出了各种的主要鉴别特征,对山、绵羊的相似种进行了比较、讨论,绘制了卵囊形态图,并拍摄卵囊显微照片。     

特种经济动物球虫种类调查

从安徽、山东和河北省以及上海市郊采集梅花鹿、鹧鸪、獭兔、山鸡、北极狐、水貂、孔雀、海狸鼠、野鸭、野兔、天鹅等11种特种经济动物的粪样,观察了4104个球虫卵囊,共发现4属82种球虫,其中艾美属(Eimeria)74种,等孢属(Isospora)5种,泰泽属(Tyzzeria)1种,温扬属(Wenyonella)2种.     

兰州地区家兔球虫形态学观察

国内外学者对家兔球虫的形态学,作了大量的研究工作。据文献报道,目前世界各国在家兔体内发现的球虫有17个种,其中艾美尔属(Eimeria)15个种,等孢子属(Isospora)和隐孢子属(Cryptosporidium)各1个种,即斯氏艾美尔球虫E.stiedai、穿孔艾美尔球虫E.perforans、大型艾美尔球虫E.magna、中型艾美尔球虫E.media、无残艾美尔球虫E.irresidua、小型艾美尔球虫E.exigua、梨型艾美尔球虫E.piriformis,雕斑艾美尔球虫(仅据字义及卵囊特征试译名)E.scutpta、长型艾美尔球虫E.elongata、黄色艾美尔球虫     

鸡堆形艾美球虫3-1E基因真核表达质粒的构建及其抗球虫免疫保护作用

应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从堆形艾美球虫SH株子孢子中扩增3-1E基因片段,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-3-1E.质粒纯化后体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光技术和免疫组织化学技术检测3-1E蛋白在转染细胞中的表达情况.将构建的重组质粒以及空载体质粒分别于14、21日龄分2次经腿部肌肉注射免疫SPF雏鸡,28日龄除非免疫非感染对照组外各组攻击性感染5×104个堆形艾美球虫孢子化卵囊,观察真核表达质粒对球虫感染鸡的免疫保护作用并探讨其免疫保护机理.结果显示,与载体对照组相比,质粒pcDNA3.1(+)-3-1E 2次免疫后可显著提高脾CD8 T淋巴细胞亚型数量,并具有一定的抗球虫免疫保护作用,可显著减少每克粪便的卵囊排出量,降低十二指肠病变记分,减少增重下降等.     

柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达

从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增EtSAG10基因,与pGEM-T Easy载体连接后转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,扩增不含N端信号肽的编码序列,分别插入表达载体pET-32a( )和pMAL-c2X,转化至E.coliRosetta,以IPTG诱导表达。结果表明,pET-32a( )-EtSAG10在E.coliRosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43%,融合蛋白分子质量约为47 ku,以包涵体形式存在;而pMAL-c2X-EtSAG10在E.coliRosetta中表达的重组蛋白为可溶性,表达产物约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白分子质量约为69 ku。以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg/只肌肉注射免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数(OPG)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)评价,免疫组相对盲肠卵囊产量为47.7%,抗球虫指数由86.79提高至152.13。提示,重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护。     

鹅多斑艾美球虫生活史及致病性的研究

给10只10日龄雏鹅分别经口接种2.0×105~6.5×105个多斑艾美球虫(Eimeria stig-mosa)孢子化卵囊,在接种后48~180 h分期剖杀,对多斑艾美球虫的生活史和致病性进行了动态观察。结果,在内生性发育过程中,多斑艾美球虫可能仅有1个世代的裂殖生殖阶段,每个裂殖体含3~5个裂殖子。在感染后第108 h左右,多斑艾美球虫完成裂殖生殖并进入配子生殖阶段。所有内生殖阶段均在肠上皮细胞核内发育。潜隐期为4.5 d,显露期为4 d。25℃下卵囊孢子化时间为36~48 h。多斑艾美球虫主要寄生于空肠、回肠、盲肠和直肠绒毛中部到顶部的上皮细胞中,引起轻微病变。感染鹅仅出现轻度拉稀,未发生死亡。结果表明,多斑艾美球虫对家鹅致病性较小。     

氯苯胍防治家兔球虫病

我们应用氯氯苯胍进行防治家兔球虫病的试验,结果如下: (一)通过对49只实验兔的治疗观察,认为每公斤饲料混入氯苯胍330毫克,日加饲料二次,让兔自由采食,对已患球虫病兔群,具有良好的治疗效果,从治疗8～14天的结果来看,球虫卵囊转阴率均为100％。因此,使用氯苯胍治疗家兔球虫病可以7天为一疗程。 (二)对治疗转阴的球虫兔群,按每公斤饲料混入氯苯胍160毫克进行预防试验(饲喂方法同上),投药后10天检查,均找不到球虫卵囊。以后将剂量减为130毫克,连喂3个月,亦未发现球虫卵囊。故将预防剂     

饱和食盐水漂浮法的改进

在鸡球虫病的免疫研究中,时常要从鸡粪便中分离出大量的球虫卵囊作为研究用材料。常用的方法是饱和食盐水漂浮法。Ryley,J.F.等(1976)报道,用这种方法回收卵囊经3～4次漂浮,只能回收粪便中46％的卵囊。在我们的研究中同样感到此法回收效率太低,而且费时较多,每漂浮一次大约15～20分钟,漂浮3～4次就得花费1个多小时。作为蠕虫病的一种诊断方法,此法操作简单,是大家公认的,但诊断效果.A.(1978)则认为不如达尔林法和切尔鲍维奇法,需要改进。以此法作为从粪便中分离回收球虫卵囊的常规