成年毛冠鹿大肠杆菌病的诊断

1990年12月初,我国1只成年毛冠鹿出现间断性流涎,经临床检查,未发现其口腔内有炎症或其它异常。血象检查:血色素11.59％,红细胞4.29×10~(12)/L,白细胞4.5×10~9/L,血小板1.24×10~(11)/L,中性粒细胞和分页粒细胞67％,淋巴细胞33％,到1991年3月初,发现该鹿逐渐消鹿,被毛粗乱,粪便常带粘液,但精神、食欲尚可。曾给红霉素、氯霉素、复方新诺明口服,效果不佳。1991年6月5日,该鹿突然不吃,呆立,次日清晨死于舍内。经综合鉴定,确诊为大肠杆菌病。     

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫程序研究

作者用猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗(以下简称猪瘟犊睾细胞苗)750个对兔感染量(以下简称感染量),在配种前40天至配种后45天内免疫母猪,所产亲代仔猪在20～28日龄时猪瘟间接血凝滴度(IHA)4~×( )占10/32、8~×占11/32、16~×占10/32、32~×占1/32;41～43日龄时,IHA滴度4~×占11/43、8~×占21/43、16~×占9/43、32~×占2/43;在55～58日龄时,IHA滴度4~×占9/33、8~×占17/33、16~×占7/33。用600、760、900、1500个感染量分别给20～28日龄、41～43日龄、55～58日龄仔猪实施免疫,免疫后6～8个月时,监测其抗体水平,结果表明:IHA滴度16~×以上者达100％。750个感染量免疫20～28日龄仔猪组,注苗后持续6个月,IHA滴度32~×以上者达100％;8个月时32~×以上者达87.5％,16~×占12.5％。用猪瘟石门系强毒攻毒,获100％保护。试验首次发现:用猪瘟犊睾细胞苗免疫母猪所产仔猪母源抗体明显低于猪瘟乳兔苗免疫母猪所产仔猪的母源抗体。对猪瘟犊睾细胞苗免疫母猪所产亲代仔猪在20～28日龄用该苗一头剂(750个感染量)进行免疫,8个月之内能抵抗猪瘟感染或强毒攻击,突破了以往认为仔猪用猪瘟乳兔苗免疫应在45日龄以后的常规,为猪瘟犊睾细胞苗的免疫提供了新的免疫程序。     

实验性牛大巴贝西虫病的研究

利用长角血蜱或大巴贝西虫感染血液,感染3头除脾牛和1头未除脾牛,感染后5～20天在血片中出现了典型的大型巴贝西虫。除脾牛临床主要表现呈稽留热,呼吸急促,血尿,眼结膜苍白黄染,高度贫血,个别牛血红蛋白量降至2g/100ml,红细胞数降至1.85×10~(12)/L,红细胞压积降至8％。尸体剖检主要变化为肺气肿,心内外膜、十二指肠、肺脏有出血点,肝肿大,膀胱有血尿等。并观察了病理组织学变化。未除脾牛临床上无明显变化。     

大熊猫的输血试验

最近,我们为一患恶性淋巴肉瘤的大熊猫进行了一次术中输血,结果令人满意。供血者为另一健康大熊猫。受血者大熊猫锦锦,雌性,8岁,体重80kg,曾怀孕3次,产仔5只。因发现腹部包块并进行性增大,而决定剖腹探查。手术前血常规检查:白蛋白26.0g/L,白细胞23.2×10~9/L,中性粒细胞86％,淋巴细胞14％,血红蛋白94g/L。以人用常规方法配血无禁忌,术中共输入另一大熊猫全血160ml,输血历时30分钟,滴速为160滴/分。输血前受血大熊猫血压230/195mmHg、心率85次/分、     

全封闭式饲养仔猪缺铁性贫血病的临床病理学研究

以铝合金全封闭式猪舍饲养的月龄杂交仔猪发生典型缺铁性贫血病。29窝209头仔猪发病率为90.9％,致死率为68.42％。病猪呈现典型贫血症状。血色素含量<30g/L,红细胞总数下降至1.65×10~(12)/L。尸检可见贫血、黄疸、水肿变化。组织学检查,肝小叶中心坏死,红骨髓红细胞系增生,脾、肝、淋巴结呈现髓外造血现象。肝、脾中铁的含量仅为正常的3.32％及11.72％,铜、钴含量接近正常。治愈及亚临床康复猪双月龄体重较正常低38.81％,饲料消耗增加29.13％。     

黄牛心肌巨大脓肿一例

病例介绍 沙某饲养的1头5岁母牛,体重约250kg,该牛自购入2个多月来,一直食欲不佳,行动迟缓,立多卧少,常出现战抖、呼吸迫促等症状,经多次治疗未见明显好转。临诊所见:患牛体躯消瘦,被毛蓬乱无光,精神呆滞,行动迟缓,颜面及颈部浮肿,颈静脉怒张。体温39.1℃,心跳114次/分,呼吸42次/分。心音混浊且节律不齐,呼吸浅表且以腹式呼吸为主。胸部叩诊见心浊音区扩大。瘤胃蠕动波每2分多钟出现1次,肠音微弱。强压触诊网胃区有轻微敏感表现。取腹腔穿刺液做李凡他氏试验结果为阴性。血液学检查:红细胞520万/mm~3,血红蛋白90g/L,白细胞1100个/mm~3,白细胞分类计数结果为:嗜中性白细胞39.5％,嗜酸性白细胞2.0％,嗜碱性白细胞1.0％,淋巴细胞56.0％,单核细胞1.5％。     

玉米赤霉烯酮免疫检测技术研究——分泌抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用F-2-BSA人工抗原免疫Balb/c鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,建立6株分泌抗F-2毒素的McAb杂交瘤细胞株。用间接ELISA法测定,细胞上清液抗体滴度为2084~×(4H_8)、256~×(6H_9、4H_3、2H_5、2C_8)、16~×(3F_(10));腹水抗体滴度为10~(-9)(4H_3、4H_8),10~(-8)(2H_5)、10~(-7)(6H_9)、10~(-6)(2C_8)、10~(-5)(3F_(10))。用竞争间接ELISA法测定6株McAb对F-2毒素的敏感度为0.8～0.3ng/ml。该抗体与同系物(玉米赤霉烯醇)交叉反应率为9.0％～1.3％。6株McAb均属IgG类。细胞体外传代培养和冻存复苏后,分泌抗体稳定。纯化抗体在37℃保存12天稳定。     

西藏环状病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为了建立检测西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV)的快速核酸检测方法,根据新分离的西藏环状病毒(DH13C120)Seg-10基因序列,设计了特异性引物及探针。通过优化反应条件,建立了检测西藏环状病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了检测。结果显示,该方法在2.31×10~8～2.31×10~2copies/μL质粒标准品浓度之间具有良好的线性关系,相关系数为0.999;组内与组间的变异系数均小于2%;最低检测下限为2.31×10~1copies/μL;对蓝舌病病毒、鹿流行性出血热病毒、阿卡斑病毒、盖塔病毒和流行性乙型脑炎病毒检测结果均为阴性,无交叉反应;对云南新分离的9株西藏环状病毒进行检测,拷贝数在3.23×10~5～1.54×10~6copies/μL之间,准确率为100%;对2013年采集自云南江城县的48份牛血液样品进行检测,检出西藏环状病毒阳性3份。结果表明,本研究建立的西藏环状病毒荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,适用于西藏环状病毒的快速检测,对西藏环状病毒的检测和流行病学调查提供了技术手段。     

山羊IFN-γ和TNF-α基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中山羊γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的基因序列,设计特异引物扩增目的基因。将IFN-γ、TNF-α基因克隆至p MD-19-T载体,得到各自阳性克隆质粒,以2种阳性质粒为标准品建立标准曲线并进行熔解曲线分析以及灵敏性、特异性和重复性试验。应用所建立的方法检测刀豆蛋白A(Con A)刺激健康山羊外周血单核细胞(PBMC)后不同时间点IFN-γ、TNF-α基因转录量。结果表明,当质粒标准品稀释度为1×10~9copies/L~1×10~5copies/L时,扩增曲线的Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数分别为0.999和1.000;熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好。IFN-γ在第2小时和第48小时这两个时间点出现mRNA转录高峰,在第2小时检测到IFN-γ转录量为1.26×10~5copies/L,第48小时检测到转录量为8.56×10~4copies/L;TNF-α在0~24 h呈现下调的表达趋势,第48小时出现mRNA转录高峰,转录量为2.73×10~5copies/L;研究结果将为IFN-γ、TNF-α的定量分析提供技术平台。     

氯化钾注入后海穴治疗马属动物肠便秘57例的临床观察

我们在针刺和离子透入后海穴能治疗马骡肠便秘病的启发下,近年来采用后海穴注入10％氯化钾溶液治疗马属动物的肠便秘57例,治愈率达92.85％。 此法简便易行,无副作用。 (一)主要病例介绍 1.1981年7月23日,东风公社自卫大队一匹10岁母马,早5时发病,9时30分来院就诊。经检查体温39.4℃,脉搏80次/分,呼吸56次/分,精神紧张,食欲废绝,心悸,肺音粗厉,前蹄刨地,回视腹部,全身出汗,四肢震颤。听诊:两侧肠音减弱,腹痛剧烈。直检:直肠蓄积13个干粪球,小结肠粪便干固。确诊为     

吡喹酮三胃注射治疗血吸虫病患牛的血液生理和病理组织学观察

我县于1984～1986年,采用毗喹酮三胃注射治疗耕牛血吸虫病2627例,转阴率为98.72～100％,并对部分治疗牛进行了血液生理和病理组织学观察。 (一)材料与方法 1.试验耕牛及分组:由疫区松湖乡和昌良乡选用自然感染血吸虫的阳性牛共55头,其中水牛30头、黄牛25头。共分4个组:试验1组20头水牛,按10mg/kg剂量三胃注射;试验2组有黄牛15头,按15mg/kg剂量三胃注射;对照1组有10头水牛,按25mg/k6剂量口服;对照2组有黄牛10头,按30mg/kg口服。 2.测定项目和方法:分别在给药前及给药后1个月测定以下生理指数:红细胞数(试     

双歧杆菌对动物肠道细菌和内毒素移位的影响

将 30只豚鼠按随机数字表法分为感染对照组 (A)、感染治疗组 (B)和健康对照组 (C)。B组感染后灌饲双歧杆菌悬液 (CFU为 5× 10 12 /L) 1.5mL ,2次 /d。观察细菌或内毒素移位、肠黏膜菌群和肠黏膜损伤情况。结果显示 :①感染后第 3d ,A、B组细菌移位率分别为 39%和 15 % (P=0 .0 0 4 0 ) ,第 5d时分别为 31%和 7% (P =0 .0 0 2 0 ) ;感染后第 1d ,A组内毒素水平显著高于B组。②A组回盲部黏膜菌群中双歧杆菌量仅为C组的 1/ 10～ 1/ 6 0 ,B组双歧杆菌量明显增多 ;A组大肠埃希氏菌量在第 1～ 3d时增加约 2 0～ 30倍 ,但第 3d后B组大肠埃希氏菌量显著减少并接近正常水平。③回肠黏膜损伤以第 1～ 3d最为明显 ,A组感染后第 5d损伤评分仍明显高于C组(P <0 .0 5 ) ;B组第 3d时已明显修复 ,第 5d时已与C组无明显差异。提示 :补充外源性双歧杆菌能促进感染后受损肠黏膜屏障和生物屏障修复 ,有效防治肠道细菌或内毒素移位。     

骡肝血肿破裂致急性出血死亡一例

一头公骡患飞节内肿,1982年4月12日静注10％氯化钙100毫升、糖盐水500毫升,局部涂擦斑蝥强发泡膏(以飞节内为中心涂擦面积为8×10平方厘米)。到4月18日所涂斑蝥膏处皮肤自下而上逐渐烂脱,且皮肤渗出液及斑蝥残渣不断流经下部的烂创处。涂擦龙胆紫慢慢结痂痊愈。4月26日晚10时,患骡突来急诊,体温39.8℃、脉搏100次/分、呼吸40次/分,肩部肌肉震颤,全身大汗淋漓,可视粘膜苍白、稍黄,口色白如枯骨,舌面皱缩,心悸亢进,耳鼻、四肢发凉。诊为内脏大出血,当即用仙鹤草素等进行止血抢救;晚12时,肌颤停止,体温39.4℃、脉搏80次/分、呼吸20次/分。次日继续输液、止血,危症消失。从4月28日到5月6日,除输液、止血     

猪丁型冠状病毒TaqMan实时定量RT-PCR检测方法的建立和应用

根据GenBank中登录的猪丁型冠状病毒(PDCoV)N基因序列在保守区设计合成特异性引物和TaqMan探针,构建含有PDCoVN基因的重组质粒作为阳性标准品,通过优化各项反应条件,建立了检测PDCoV的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,并对该方法进行特异性、定量线性范围、敏感性和重复性等试验。结果显示,该方法仅对PDCoV出现特异性扩增反应,与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒及猪细小病毒均无交叉反应。该方法的标准曲线Ct值与2.2×10~9~2.2×10~1copies/L之间的质粒浓度具有良好的线性关系,标准曲线方程为Ct=-3.539×lg X+38.95,线性相关系数(R2)为1.0,检测下限为2.2 copies/L。对3个不同浓度(2.2×10~2、2.2×10~4、2.2×10~6copies/L)的pMD18-PDCoV-N进行2次重复检测,每个浓度重复试验的Ct值的变异系数均小于1.0%,表明该方法具有良好的重复性。应用建立的方法对64份广西临床腹泻样品进行检测,结果从其中18份样品中检出PDCo V,样品阳性率为28.1%,说明广西猪群存在PDCoV感染。结果表明,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法为PDCoV的检测和定量分析提供了一种快速、敏感和特异的技术手段。     

非洲猪瘟病毒LFD-RPA快速检测方法的建立

本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)B646L基因保守序列设计nfo RPA特异性引物和探针,建立了ASFV核酸LFD-RPA快速检测法。结果表明,该方法特异性强,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪A型塞内卡病毒(SVA)等病原核酸无交叉反应;最低可以检测到1.57×10~2copies/μL重组质粒pUC-B646L;检测时间短,其中RPA扩增20 min,LFD检测10～20 min。应用该法及OIE推荐的荧光PCR法对24个模拟样品进行检测,检测结果一致。对50份已知的临床样品核酸进行检测,阳性符合率为73.3%。上述结果表明,本研究建立的LFD-RPA快速检测方法操作简便,为ASFV现场快速检测提供了技术支持。     

氟对山羊成骨细胞增殖分化及钙化功能的调节

为探讨氟化物对反刍动物骨骼代谢的影响及对成骨细胞的作用机理,以初生山羊股骨骨膜为材料,采用半消化组织块培养法分离成骨细胞,进行传代培养,并通过形态观察、扫描电镜、碱性磷酸酶(AKP)和矿化结节染色进行鉴定。通过噻唑蓝(MTT)染色、AKP活性测定和钙化结节计数,研究不同浓度的氟对山羊成骨细胞增殖、分化及钙化的影响。结果表明,加氟48 h和96 h后,1.0×10-7~1.0×10-5mol/L氟可促进成骨细胞增殖,其中1.0×10-7及1.0×10-6mol/L氟与对照组差异极显著(P<0.01),高浓度氟(1.0×10-3mol/L)则抑制成骨细胞增殖(P<0.01);而1.0×10-4及5.0×10-4mol/L氟作用48 h对成骨细胞增殖无影响,作用96 h转而抑制成骨细胞增殖(P<0.01)。1.0×10-7~1.0×10-5mol/L氟能显著增强成骨细胞AKP活性及钙化能力(P<0.01),但氟浓度高于5.0×10-4mol/L时,AKP活性及钙化能力明显下降(P<0.01)。证实,低剂量氟能促进体外培养的山羊成骨细胞增殖分化及钙化,高剂量的氟则表现抑制作用。     

黑白花犊牛中耳炎一例

大家畜患急性中耳炎的病例较少,笔者偶见一例。杨陵区卜村一头40日龄黑白花母犊于1986年11月10日来院诊疗。主诉;该犊是15天前由广州购回,同群犊已售出,该犊因发烧、咳嗽、呼噜、鼻和两耳流脓未出售。 临床检查 被毛粗乱,营养中等,精神欠佳,两鼻孔流白色粘稠脓样鼻涕,两步外能闻及呼噜声,咳嗽,两耳壳内侧面附着黄白色脓痂,犊牛常有侧耳摇头动作,并有脓星飞溅。体温39℃,心跳120次/分,呼吸30次/分,心音亢进,肺部听诊支气管有湿性罗音,瘤胃蠕动尚好,口膜黄白色。 实验室检查 血红蛋白5.5克％;红细胞350万/mm~3;白细胞3000个/mm~3;白细胞分类:中性分叶占     

南阳黄牛肌注精破抗过敏反应一例

上庄乡范某的1头8岁黄母牛,在产犊后笔者用精破抗1500单位×6支(卫生部兰州生物制品研究所生产),行肌肉注射,约10～15分钟突然出现狂燥,呼吸迫促,42次/分,心跳115次/分,体温40.5℃,全身出汗,皮肤出现大小不等如指头大至核桃大的丘疹块,瘙痒不安,两耳根部肿胀,乳房呈暗紫色。治疗经过 皮下注射0.1％肾上腺素5ml,0.2％地塞米松磷酸钠20ml,30分钟症状缓和,随给荆防败毒散加减一剂(炒荆芥60g,炒防风60g,柴胡60g,茯苓60g,炒地肤子60g,川芎40g,红花15g,苦参60g,桔梗40g,茵陈60g,白鲜皮60g     

云豹病毒性肠炎的研究——病毒鉴定

本文报道对LPV株的第8代细胞毒(LPV_8)的特性鉴定:核酸型为DNA,对热、酸和乙醚有抵抗,对热MgCl_2稳定;蔗糖浮密度为1.17～1.20g/cm~3,CsCl浮密度为1.32～1.34g/cm~3,大小为20～22nm。在pH6.4和4℃下只凝集猪红细胞,不凝集人O型、绵羊、鸡,豚鼠、水貂和猫的红细胞;在血清免疫交叉上,HI试验与FPLV—FNF_8毒株存在交叉抑制,两者的γ为0.5,ID试验同样产生吻合的沉淀线,细胞NT参考株阳性血清与LPV的中和价为2~(-13)(对照为2~(-14))。由此表明,LPV系一株FPLV的新毒株,我们称之为FPLV—L株。     

口蹄疫O型弱毒疫苗毒价(病毒滴度)与免疫关系试验

本试验之目的在于明确疫苗的毒价与产生免疫之关系。当大量生产疫苗时毒价达到多少才能出厂(合格),既降低成本又能安全有免疫力,所以做此初步试验。 一、疫苗(为本所实验室制造): (一)6501批氢氧化铝苗:1965年9月14日制造,保存近8个月。含10％OMⅡF_(131)R_1毒。注射前对乳鼠毒价为:10~(-4)～4/4;10~(-5)～2/4;10~(-6)～0/4;10~(-7)～0/4,最小致死量为10~(-5.5)。