鸡源霉形体的分离和鉴定

对乌鲁木齐市 2个大型鸡场鸡毒霉形体 (Mycoplasmagallisepticum ,MG)、滑液囊霉形体 (M .synoviae ,MS)感染情况用血清平板凝集试验 (SPA)进行了血清学抽样调查。结果表明 ,凝集抗体的阳性率分别为 6 6 .92 %和 35 .90 %,其中商品鸡场MG和MS的阳性率分别为 82 .5 0 %和 5 2 .5 0 %。从疑似MG、MS感染鸡的气管、肺、气囊、鼻裂和跗关节腔分离到 19株分离物。经初步鉴定 ,分离物均为霉形体属成员。用生化和血清学及其他生物学方法 ,对这些分离物进行了鉴定。结果 6株为MG ,3株为MS ,其余 10株也属于霉形体。     

我国山羊传染性胸膜肺炎病原的研究

本文按Freundt等(1979)介绍的方法,较系统地鉴定了我国山东、山西和新疆三个地区分离保存的山羊传染性胸膜肺炎病原,其中2株是经过山羊传代保存的强毒株,2株是经过鸡胚保存的毒力减弱株。结果表明,上述4株病原在形态特征、培养特性、生化特性和血清学反应等方面均与丝状霉形体山羊亚种国际模式株PG,相一致。因此,我国山羊传染性胸膜肺炎病原是丝状霉形体山羊亚种(M.mycoides subsp. Capri.)。     

牛霉形体PCR检测方法的建立

参考GenBank中牛霉形体和无乳霉形体P81基因的序列差异,设计了针对牛霉形体P81基因的PCR引物,建立了牛霉形体PCR检测方法.并对该方法进行了敏感性和特异性试验.该方法可以从100ccu/mL(ccu:color change unit,颜色变化单位)的牛霉形体培养物中检出目的片段;经对丝状霉形体丝状亚种SC型(MmmSC)PG1株、丝状霉形体丝状亚种LC型(MmmLC)Y-goat株、山羊霉形体山羊亚种(Mccp)87001株、无乳霉形体(M.agalactiae)PG2株、绵羊肺炎霉形体Y-98株等亲缘关系相近的霉形体纯培养物检测,结果证实该方法具有良好的特异性.利用建立的PCR检测方法可以从人工感染牛的鼻拭子和临床发病牛肺中扩增出目的片段,与分离培养结果完全符合,本方法为国内首次建立的敏感、特异、快速的牛霉形体PCR检测方法.     

广西鸡毒霉形体的分离与鉴定

从广西不同地区采集疑似鸡毒霉形体 (MG)感染的 46份病鸡病料中分离到 7个菌株 ,经分离培养、L形细菌检验、理化特性鉴定、血清学定型、人工感染试验以及PCR扩增检测等方法鉴定 ,确定 7个分离株为MG。     

内蒙古地区肉用仔鸡群中鸡毒霉形体感染情况调查及病原性研究

应用快速平板凝集试验(SPA)检测内蒙古地区有代表性的10个肉用仔鸡场鸡毒霉形体(MG),平均阳性率为52.7%;对部分阳性鸡进行霉形体分离鉴定,分得的15株霉形体中有12株为MG,将其中的1株接种24日龄肉用仔鸡,证明有很强的致病性.     

鸡毒霉形体弱毒疫苗的研究——鸡毒霉形体弱毒F株对鸡的致病性测定

用鸡毒霉形体F株新鲜培养物经点眼途径分别感染1、3和20日龄北京白鸡,以测定其对鸡的致病性。其中有部分鸡在感染F株的同时,感染前或感染后接种新城疫Ⅱ系苗或LaSota株疫苗以及鸡传染性支气管炎H_(120)株疫苗。试验结果表明:F株对各日龄鸡感染都不引起气囊病理损伤,不影响体增重;从感染鸡至少在感染后30日仍能分离到霉形体;接种新城疫疫苗和鸡传染性支气管炎疫苗不增强F株的致病作用。而感染鸡毒霉形体NB_(72)株的部分鸡出现气囊损伤。结果显示F株对鸡不致病。     

对《禽类霉形体简介》一文的意见

《兽医科技杂志》1983年第8期42～45页载有白浪同志“禽类霉形体简介”一文,概述了目前国外有关禽类霉形体的研究情况。笔者阅后提出如下意见。 (一)文中提到的没有正式命名的五个血清群,已由Jordan(1982)命名 血清群C命名为雏鸡霉形体(Mycoplasma pullorum);血清群D命名为家禽霉形体(M.gallinacum);血清群F命名为吐绶鸡霉形体(M.gallopavonis),血清群I命名为衣阿华霉形体(M.iowae);血清群L命名为鸽鼻霉形体(M.columbinasale)。此外,从鸡眶下窦分离出莱氏无胆甾原体,最初命名为莱氏霉形体无害变种(M.laidlawii var.inocuum)。它与莱氏无胆甾原体PG_8株的差异是能通过磷酸六糖途径代谢葡萄     

鸡感染鸡毒霉形体和滑液霉形体情况的调查

鸡毒霉形体感染和滑液霉形体感染是世界养鸡业中两种主要霉形体感染。毕丁仁(1984)自北京和南宁两地分离的49株鸡源霉形体中有27株是鸡毒霉形体,2株滑液霉形体,说明国内养鸡场中也存在着这个问题。但是国内这两种霉形体感染情况,却未见报道。作者在各兽医生物药厂监察室同志协助下,对来自20个省、市自治区的21个地区的鸡血清进行了血清学反应检测,对这种感染情况获得初步的数据。     

羊肺炎霉形体病调查

1992年在西北某地区的3个县10个牧场,对2160余只羊进行了羊肺炎霉形体病的调查,血清样品673份,检出阳性101份,阳性率为16％;并从发病地区羊群采集的2例山羊和1份鼻拭子病料中分离到3株霉形体。经系统鉴定和人工感染试验确诊为羊肺炎霉形体(M.ovipneumonia)。     

用血细胞吸附抑制试验快速鉴定鸡毒霉形体

鸡源霉形体的鉴定,通常用已知的标准阳性血清与分离物进行生长抑制试验(GI)、代谢抑制试验(MI)或用表面免疫荧光法(epi-IF)进行,前两种方法费时,往往需要1～2周才能得出结果;后一种方法需要荧光显微镜,不易普及应用。笔者根据鸡毒霉形体菌落有很强的吸附鸡红细胞的特点,试用已知的阳性血清进行菌落血细胞吸附抑制试验(HAI)来鉴定鸡毒霉形体。结果表明,这种方法与GI、MI、epi-IF一样具有很强的特异性,而且方法简单快速,对琼脂培养基表面的菌落2小时内可得出结果。(一)材料与方法1.抗血清:鸡毒霉形体抗血清、滑液霉形体     

鸡毒霉形体H3株TM-1基因与鸡白细胞介素2基因串联子在大肠杆菌中的共表达

运用DNA重组技术将鸡白细胞介素2基因和鸡毒霉形体H3株TM-1基因进行串联,插入到pET-30a( )质粒的EcoRⅠ和HindⅢ多克隆位点间,经PCR鉴定、双酶切鉴定和序列测定,表明已成功构建了含鸡毒霉形体H3株TM-1基因和鸡白细胞介素2基因的融合基因,将含有此融合基因的重组质粒命名为pET-30a( )-TM-1-IL-2。将此重组质粒转化E.coliBL21(DE3)菌株。经IPTG 37℃诱导表达4 h后,SDS-PAGE电泳结果显示,此融合基因得到了表达,所表达出的融合蛋白的分子质量约为43 ku,主要以包涵体形式存在。表达产物在尿素存在下经超声波处理,获得了纯化的融合蛋白。这为进一步研究鸡白细胞介素2及鸡毒霉形体的生物学活性奠定了基础。     

鸡毒霉形体血清学反应异常的探讨

诊断鸡毒霉形体血清学的方法主要有血清平板凝集反应、试管凝集反应和血凝抑制反应。这三种血清学反应也是美国农业部主持的国家家禽改良计划及其规定(1982)所规定的检测方法。1985年作者等在进行血清学检验时,发现一个鸡群出现血清平板凝集反应与血凝抑制反应不相符的反常例子,报告如后。 (一)材料和方法 1.待检血清:第一批是北京地区某鸡场兽医应用鸡毒霉形体全血平板凝集反应检出的阳性鸡血清,送我室复检;第二批是作者从该鸡场送检鸡中采来的。均置4℃冰箱内待检。     

霉形体对新城疫、鸡传染性支气管炎病毒疫苗株体外增殖的影响

霉形体是组织细胞培养中常见的污染物,它可引起病毒增殖改变,即有的病毒增殖被抑制,有的增殖反而增强,但也有的无明显变化。据报道,国内实验室现行使用的细胞中霉形体污染情况严重;国内用鸡胚和鸡胚细胞培养制造的活疫苗也被霉形体污染,而且证明其污染来源为鸡胚。但实际中霉形体污染对疫苗株病毒增殖的作用尚不清楚。本试验在鸡胚培养中,研究了自疫苗中分离的鸡毒霉形体对新城疫病毒Ⅰ系、Ⅱ系、LaSota系和鸡传染性支气管炎病毒H_(120)株增殖的影响。     

平板乳胶凝集试验快速检测猪肺炎霉形体抗体

我们在试管乳胶凝集(TLA)试验的基础上,又进行了平板乳胶凝集(PLA)试验检测猪肺炎霉形体抗体的研究。 (一)材料和方法 1.10％聚苯乙烯乳胶原液:购自上海市医学化验所。 2.菌种:猪肺炎霉形体ZC株、猪鼻霉形体、猪滑液霉形体冻干菌株均由中国兽药监察所提供。 3.抗原制备:按照本实验室方法自制。 4.血清:以下供试血清用前均经56℃水浴30分钟灭活处理。 (1)兔抗猪肺炎霉形体高免血清:按国际霉形体命名委员会推荐的方法自制。批号:     

禽霉形体感染的药物防治

感染禽类的霉形体种虽然较多,但由于鸡毒霉形体(Mycoplasma gallisepticum)、滑液霉形体(M.synoviae)和火鸡霉形体(M.meleagridis)在流行病学、致病性和经济意义方面的特殊位置,化学药物治疗方面的报道大都限于这3种霉形体所致的疾病。其他种的致病性不十分明确,因此尚未提到防治的高度。 (一)鸡毒霉形体(MG)感染的药物防治 关于鸡毒霉形体(MG)所致鸡与火鸡气囊炎(Air sacculitis)和窦炎(Sinusitis)的药物治疗有许多文献报道。Brunner等(1985)认为泰乐菌素(Tylosin)、螺旋霉素(Spiramycin)、壮观霉素(Spectinomycin)、泰妙灵(Tiamulin)以及林肯霉素与壮观霉素(Lincomycin—spectinomycin)的复合剂对MG的杀灭效能较好。Yoder等(1965)用     

禽霍乱SX-3号菌菌苗的研制

笔者于1985～1987年,先后从5个爆发禽霍乱的鸡场采取病鸡的肝、脾脏,分离野毒株,并筛选出具有免疫原性的菌株作为制苗菌种,制备菌苗,用于预防区域性发生的禽霍乱,效果良好。 (一)方法和结果 1.分离菌株:从刚死亡鸡采取肝、脾组织,用血液平板划线分离培养,并同时用马丁肉汤进行增菌。培养24小时后,挑选可疑为巴氏杆菌的菌落作纯培养。用马丁肉汤培养物对小白鼠作致病性试验;皮下注射0.2ml,多数于26～48小时死亡。从中挑选出致病力强的4株菌Sx-1、Sx-2、Sx-3和Sx-4号,进行鉴定。     

聚合酶链反应检测绵羊肺炎霉形体的研究

参照基因库中已发表的绵羊肺炎霉形体Y98株的 1 6SrDNA序列 ,设计合成了 1对引物 ,建立了聚合酶链反应 (PCR)检测绵羊肺炎霉形体的方法。结果显示 ,所建立的PCR能特异扩增绵羊肺炎霉形体的DNA ,而对照的菌株均为阴性 ;其敏感性可达 1pg。经对绵羊肺炎霉形体分离株HD 1的扩增产物进行测序 ,并与绵羊肺炎霉形体标准株Y98的 1 6SrDNA序列进行比较 ,发现有 6个碱基的差异     

关于国际标准菌株MGS_6株的探讨

鸡败血性霉形体(MG)国际标准菌株MGS_6株,是我国各生物药品厂制备MG抗原和高免血清的标准菌株,现已大量使用。有个问题值得注意,特提出讨论。 S_6菌株进行平板培养时,基本上可见到四种菌落:小脐型,大脐型,小无脐型,大无脐型。当用此菌株对雏鸡进行人工感染,可见到临床症状;并且于第10天到30天皆可分离到本菌,其菌落特征皆为小脐型(脐直径小于菌落直径二分之一);挑选抗原菌种时,选取小脐型菌落纯化亦可得到吸附鸡红血球能力极强与标     

鸡慢性呼吸道病的防治

鸡慢性呼吸道病(Ch- ronic Respiratory Disea- se,CRD)是由霉形体(M- ycoplasma)引起的一种接触传染性呼吸道病,以呼吸时发出罗音、咳嗽、流鼻涕和窦部肿胀为临床特征,多呈隐性经过,病程较长。其主要病原有鸡败毒霉形体(M.gallisepti-cum,MG)、滑液囊霉形体(M.synoviae,MS)和火鸡霉形体(M.meleagridis,MM)三种,并以MG危害最大(蔡宝祥,1980)。本病分布于世界各地,死亡率不高,发病率可高达90％以上。它使肉鸡存活率、活重下降,料肉比提高,蛋     

牛霉形体性乳房炎研究概况

目前牛霉形体性乳房炎已引起了人们的关注,特别是集约化的奶牛场其危害还是严重的。早在1960年英国的T.Davidson和P.Stuart等首次从发生牛乳房炎的病例中分离到牛生殖道霉形体。之后,由各种霉形体引起的奶牛乳房炎在各国都有报道。在美国,L.Carmichael、M.Fin-cher、H.Hale、D.Jasper等曾记载过霉形体性乳房炎的大爆发;在以色列(R.Bar-Moshe)、西班牙(B.Marcos)、加拿大(Ruhnke)、英国(Gourlay)和日本(清水)等均从乳房炎患牛分离出霉形体。1986年Ball等在北爱尔兰用从