兔死后角膜内皮细胞核DNA降解随死亡时间变化规律

目的研究兔死后角膜内皮细胞核DNA降解与死亡时间的关系。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,检测27只家兔死后48h内不同时间点角膜内皮细胞核DNA降解情况。结果家兔死后角膜内皮细胞产生彗星现象,彗星样细胞出现率于兔死后6h开始逐渐增加。死后6～18h彗星样细胞出现率增加缓慢,死后24～36h出现率上升较快;死后36～48h彗星样细胞出现率上升缓慢,但仍始终保持在较高的水平上(M185.4%),其回归方程为y=-0.0096x2+2.4548x+5.7964,与死亡时间呈正相关(R2=0.9743)。结论家兔死后角膜内皮细胞彗星样细胞出现率随死亡时间增加而逐渐增加。     

实验性小白鼠死后肝脏酶组织化学改变

作者用60只小鼠实验,分组观察环境温度为4℃和20℃、死后0、6、12、24、48和72h 肝脏的PPr、ATPase、CCO、ACP、ANAE、G-6-Pase、LDH、SDH、G6PD 和NADHD 等10种酶活性的组织化学改变。在4℃组,PPr 活性在死后6h 开始下降;死后72h,PPr 仅在少数肝细胞呈阳性反应;其余9种酶活性无明显改变。在20℃组,死后6h,PPr 活性明显下降,死后12h 变为阴性。死后48h,LDH 和ATPase 活性明显下降,死后72h 变为阴性。作者认为,死后组织中酶的改变规律有助于推断死后经过时间。     

死后不同时间的组织细胞DNA含量分析

本文应用流式细胞仪对大鼠死亡后不同时间的心、肝、肾组织细胞DNA含量进行了分析。结果显示:与死后0点细胞DNA含量值相比,6小时细胞DNA含量下降到99.5％,12小时为91.3％,18小时为87.1％,24小时为81.3％,30小时为76.7％,36小时为74.3％,48小时为72.3％。上述规律性变化,将可能对早期死亡时间的推断提供客观可靠的依据。     

TUNEL法检测大鼠死后心肌细胞核DNA断裂与死亡时间关系研究

目的用原位脱氧糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)观察大鼠死后心肌细胞DNA断裂与死亡时间(postmortem interval,PMI)的关系。方法建立SD大鼠死亡模型,在25.1℃,分别于死后6、12、24、36、48、60h提取大鼠心肌组织进行TUNEL检测,显微成像系统采集图像,经计算机图像系统分析及统计学处理。结果死后6~60h,心肌细胞核荧光染色依次由绿色、黄绿色亮度增强、亮黄色到荧光亮度减弱;形态由扁圆形或柱状,大小较均匀,到体积增大、呈毛虫状、多数核碎裂到形态不规整,大部分核形成碎片;心肌组织细胞核的IG,死后6h至36h依次增高,36h达到高峰,随后下降;心肌细胞核DNA的AG死后24h最高。结论死后各时间点,心肌细胞核的荧光颜色和亮度以及细胞核的大小和形态有一定的变化规律。     

利用尸体软组织生物力学性状时序性变化推断死亡时间

目的探讨尸体软组织生物力学性状时序性变化规律及其推断死亡时间的可行性。方法将实验大鼠用颈椎脱臼法处死,放置25℃恒温培养箱内即刻、6、12、18、24、30、36、42、48、60、72、96、120、144、168、192h,定时、定位、定向、定形切取大鼠胸部正中皮肤、腹壁肌肉、胸主动脉、结肠和小肠的生物力学试件,用电子万能材料试验机检测各试件的极限载荷、应变、应力生物力学参数。结果除主动脉外,尸体皮肤、肌肉、小肠、结肠的各项软组织生物力学参数均呈明显的死后时序性下降趋势。各参数下降趋势具有显著性差异的＂窗口期＂分别为：极限载荷：死后18h内皮肤、小肠呈下降趋势;24h内肌肉、结肠呈下降趋势;96～168h肌肉呈下降趋势;72～192h结肠呈下降趋势。应变：各组织在24h内均呈下降趋势,其结肠72～192h缓慢下降趋势。应力：皮肤18h内呈下降趋势,肌肉、小肠24h内呈下降趋势,结肠36h内呈下降趋势。结论大鼠尸体软组织各生物力学性状在不同的＂窗口期＂存在时序性变化规律,综合各指标可用于推断相应＂窗口期＂内的死亡时间。     

人体死后肝细胞DNA含量与死亡时间关系的研究

目的研究人体死后肝脏细胞DNA含量变化与死亡时间的关系及影响因素。方法选取46例已知死亡时间的人体肝脏,根据离体肝脏所处的环境温度分为12—19％（A组）和20—27％（B组）两组,每组23例。在死后24～72h内每隔4h穿刺取肝组织1次,制成细胞悬液,经RNA酶消化,PI染色后,用流式细胞仪测定被检测细胞中含不完整DNA的细胞数所占百分比,所得数据经Exp032V1．2软件计算N值。结果死后24～72h肝细胞N平均值,A组从10．91％增至49．72％,B组从16．22％增至69．63％。两组N平均值随死亡时间的延长均逐渐增高,与死亡时间有相关性,A组r值为：0．598,B组r值为0．77357。并且建立了不同环境温度对应的回归方程。结论在不同环境温度下,死后24～72h内人体肝脏细胞DNA降解均随死亡时间的延长和环境温度的升高而逐渐加快,相关数据可望为死亡时间推断提供一定参考依据。     

离体人肝细胞核DNA含量死后变化的图像分析研究

目的应用图像分析技术研究人肝细胞DNA降解与死亡时间的关系。方法选取18例已知死亡时间的人体肝脏,在死后4~36h内每小时进行细胞学涂片、Feu lgen-Vans染色,应用图像分析系统研究肝细胞核平均灰度、平均光度、积分光密度等参数在死后的变化规律。结果在4~36h内随死亡时间的延长,肝细胞核的平均灰度逐渐上升,平均光度、积分光密度逐渐下降,获得了36h内3个参数变化的回归方程。结论肝细胞核的平均灰度、平均光度和积分光密度均与死亡时间有明显的相关性,可望用于推断早期人体死亡时间。     

小鼠肝组织GAPDH mRNA降解与死亡时间关系

目的探讨小鼠在不同的死亡方式下肝组织管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)mRNA降解与死亡时间(postmortem interval,PMI)的关系。方法将60只NIH小鼠分别采用窒息法和断颈法处死,分别置于10℃和25℃温控系统内,利用两步法RT-PCR技术和核酸蛋白测定仪检测小鼠肝组织中GAPDH mRNA在死后0～48h的降解情况。结果在10℃温控系统内的小鼠死后0～48h及25℃温控系统内的小鼠死后0～36h肝组织均可检测到GAPDH mRNA,且其扩增产物呈规律性下降趋势。结论小鼠死亡后肝组织GAPDH mRNA降解与PMI呈负相关,可为PMI推断提供一种新的观测指标。     

死后不同时间红细胞内钾离子含量分析

分析了家兔死后不同时间心血红细胞钾离子含量,红细胞内钾离子含量随死亡时间增加呈线性下降(r=-0.829,p<0.025).在死后0～48h,红细胞内钾离子含量(Y,mmol/10~12RBC)与死亡时间(X,hours)的直线回归方程为:Y=7.56-0.071X或X=106.48-14.08Y.上述规律变化,有可能对早期死亡时间的推断提供客观依据.     

大鼠多器官能量物质变化与死亡时间的联系

目的检测大鼠死后不同器官能量物质的改变情况,探讨死后能量物质的变化规律.方法用高效液相色谱检测死亡发生24h内不同时间点大鼠腓肠肌、心肌、肝脏组织中ATP、ADP和AMP的含量.结果发现腓肠肌中ATP随死亡时间的延长迅速下降,到死后8h基本检测不到或微量检测出;心肌、肝脏中组织中ATP含量受死亡方式影响大.ADP在整个检测时间点均能检测到,AMP的含量变化无规律.结论通过高效液相对磷酸腺苷的检测,显示24h内大鼠腓肠肌、心肌和肝脏组织中的ATP含量变化与死亡时间的联系,可为法医学死亡时间推断提供一种新的、客观的参考依据.     

失血死亡及休克早期心肌病理学研究

应用电镜,组织化学,免疫组化及形态计量分析等方法和技术,观察了失血致死和休克早期不同时间家兔心肌超微结构、琥珀酸脱氨酶（SDH）活性、肌红蛋白（Mb）脱失的变化特点。结果发现：失血致死和休克早期，不同时间兔心肌超微结构、SDH活性和Mb含量有不同程度的改变。病变程度随休克时间的延长而加重。本文还讨论了这些改变在法医学上的意义。     

Postmortem activity of the key enzymes of glycolysis. In rat brain regions in relation to time after death

The activities of the rate-limiting enzymes of glycolytic pathway were measured in various areas of rat brains kept at a temperature of +25 degrees C for various intervals after death by cervical dislocation. Hexokinase shows a substantial decline in activity over a period of 24 h, reaching 41%, 57%, 44%, and 51% of the controls in cerebellum, medulla oblongata and pons, cerebral cortex, and diencephalon, respectively. In the same areas the phosphofructokinase reached 28%, 61%, 60%, and 40% of the zero-time activity, respectively. Lactate dehydrogenase behaves differently in the four areas, with an increase in cerebral cortex and diencephalon and a decrease in cerebellum and medulla oblongata and pons. Pyruvate kinase activity was quite stable over the 24 h period studied. Therefore, the activities of hexokinase and phosphofructokinase in brain tissue were of little value for diagnosis of the time of death.     

大鼠乌头碱中毒心肌酶的研究(Ⅲ)——线粒体NADHD的组织化学和细胞化学研究

本文用组织化学和细胞化学方法分别对乌头碱染毒后不同时间组大鼠心肌NADHD进行了光镜和电镜观察。结果表明:乌头碱染毒后30分钟,2小时和4小时的大鼠心肌NADHD活性明显降低并有定位改变,而染毒后12、24小时的心肌NADHD活性有所回升。证实产能较多的NADH氧化呼吸链在乌头碱中毒时受到抑制。     

Enzyme activities of leukocytes in skin cut wounds with various wound ages

A study was carried out on leukocyte enzyme activity from prints of skin cut wounds of guinea pigs at various time intervals after the injury. The following enzymes were examined: alkaline and acid phosphatase, succinate, lactate, and glucose-6-phosphate dehydrogenases. Cytochemical analysis revealed a rapid increase in enzyme activity in the 4th h after the wound occurred, which can be explained by the alteration in leukocyte metabolism induced by the damaging agent, i.e., the skin trauma inflicted. The rise in lactate dehydrogenase and glucose-6-phosphate dehydrogenase activity is the most characteristic feature. In accordance with these changes in enzyme activity, some conclusions can be made about certain intracellular alterations. There is a close relationship between the course and the degree of these cellular changes and the time interval between the injury and examination of the enzyme activity. These changes make it possible to draw conclusions concerning the vital character and the interval after inflicting as well.     

Gastrointestinal Functionality of Aquatic Animal (Oreochromis niloticus) Carcass in Water Allows Estimating Time of Death

Postmortem changes have been previously studied in some terrestrial animal models, but no prior information is available on aquatic species. Gastrointestinal functionality was investigated in terms of indices, protein concentration, digestive enzyme activity, and scavenging activity, in an aquatic animal model, Nile tilapia, to assess the postmortem changes. Dead fish were floated indoors, and samples were collected within 48 h after death. Stomasomatic index decreased with postmortem time and correlated positively with protein, pepsin‐specific activity, and stomach scavenging activity. Also intestosomatic index decreased significantly and correlated positively with protein, specific activity of trypsin, chymotrypsin, amylase, lipase, and intestinal scavenging activity. In their postmortem changes, the digestive enzymes exhibited earlier lipid degradation than carbohydrate or protein. The intestine changed more rapidly than the stomach. The findings suggest that the postmortem changes of gastrointestinal functionality can serve as primary data for the estimation of time of death of an aquatic animal.     

大鼠死后心血吗啡浓度变化的HPLC检测

采用高效液相邑谱分析技术（HPLC）检测治疗量及中毒量吗啡肌注大鼠死后心血中吗啡浓度变化。结果表明，以治疗量吗啡肌往大鼠，在死后96h内，心血中吗啡浓度随死后时间增加而显著升高（P＜0．01），吗啡浓度水平与死后时间里显著正相关；以中毒量吗啡肌注大鼠，在死后12h内，心血吗啡浓度无明显变化；死后24h、48h及96h，随死后时间延长，心血中吗啡浓度逐渐升高（P＞0．01），其递增强度不如治疗量吗啡组大鼠的明显.本研究证实，死后尸体心血吗啡浓度明显受生前剂量的影响，且在死后96h内，随死后时间增加．心血中吗啡浓度少数不断增高。     

损伤经过时间的实验研究

作者在全身麻醉及无菌条件下,通过在大白鼠背部皮肤造成的切创创口,于伤后不同时间杀死.每组中1只于处死前8小时注射秋水仙碱以观察核分裂.取损伤处皮肤,经福尔马林固定、石蜡切片、HE染色、Gorden和Sweet染色(网状纤维)、Weigert染色(弹力纤维)、PTAH染色(纤维蛋白)和Van Gieson染色,于显微镜下观察.结果发现创口逐日缩小,但其中24小时创口较12小时创口有所扩大,伤后第6～7日创口呈突击式缩小.通过组织学变化观察,作者对创口收缩现象在判断损伤时间的意义及形成机理作了讨论.     

大鼠乌头碱中毒心肌酶的研究(Ⅳ)——乳酸脱氢酶的组织化学和细胞化学定位

本文用组织化学和细胞化学相结合的方法,对乌头碱染毒后不同时间的大鼠心肌乳酸脱氢酶(LDH)进行了显微和超微结构定位。染毒后30min、2h 和4h,大鼠心肌 LDH 酶反应增强,至染毒后12h,24h 活性仍高于对照组。表明在有氧氧化障碍的同时,中毒鼠的心肌糖酵解增强,为乌头碱造成心肌能量代谢障碍的中毒机理进一步提供了证据。     

小鼠死后脑RNA降解与死亡时间的相关性

目的 探讨小鼠死后不同时间和温度下脑组织β-actin mRNA、18S rRNA的降解规律与死亡时间的关系.方法 将24只健康成年C57BL/6小鼠随机分为2组,每组12只,断颈法处死后分别置于不同的环境温度中(4℃、37℃),恒定环境湿度为80%.分别于死后即刻和0.5、2、6、24、48h取小鼠脑组织进行总RNA...     

家兔限制性体位窒息模型中的LDH/CHE活性变化

目的 探讨家兔体位性窒息模型中乳酸脱氢酶(LDH)和胆碱脂酶(CHE)活性变化与窒息死亡的关系。方法 建立动物模型，检测膈肌、腓肠肌，以及血清中LDH、CHE的活性变化。结果 实验组家兔膈肌与腓肠肌相比，LDH活性明显下降，且差异显著(P＜0.05)，CHE活性差异无显著性(P＞0.05)；2组膈肌比较，LDH活性明显下降，有显著性差异(P＜0.05)，CHE活性无显著性差异(P＞0.05)；实验组血清中LDH活性比对照组明显升高，有显著性差异(P＜0.05)，2组CHE活性无显著性差异(P＞0.05)。结论 膈肌中LDH活性的降低与固定双上肢悬挂体位具有相关性。