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对于新鲜或量足的血痕,采用文献报道的Chelex-100直接处理提取DNA,一般都能获得满意结果,但在日常检案过程中,陈旧而量少的血痕检材经常遇到,而且载体可能有泥沙、色素或吸附力强等PCR扩增抑制物的存在.这类检材DNA采用普通的Chelex-100快速提取法,有时很难奏效.针对以上问题,本文结合两例检案,对血痕DNA的Chelex-100快速提取法进行了一些改良,显著提高了检出率,使检案成功,报告如下:1 材料与方法1.1 材料:取自本实验室检验的两案例中的22份血痕. 相似文献
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目的采用Identifiler Direct PCR试剂盒直接扩增法进行棉签擦拭血痕、肋软骨和烟蒂唾液斑DNA分型检验,并评价其应用价值。方法收集棉签擦拭血痕、烟蒂各20份,肋软骨10份,采用Identifiler Direct PCR试剂盒进行直接扩增及分型检验,以相同检材采用磁珠法/Chelex-100法提取模板DNA后扩增检验结果作为对照,对两组所得结果进行比较分析。结果棉签擦拭血痕和肋软骨一次检测完整分型率均为100%,分型结果与对照组一致;烟蒂上唾液斑有2份检材第一次未能完整分型,调整方法再次检验后获分型成功。结论实际检案中的棉签血痕、肋软骨和烟上唾液斑,采用直接扩增法检测,方法简单、快速、稳定、检材用量小,可在实际检案中选择使用。 相似文献
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美国AB I公司的Profiler PlusTM试剂盒和Identifi-lerTM试剂盒在当前法医DNA检案中应用广泛,但价格昂贵。本实验利用5μl体系进行PCR扩增取得满意效果,降低了检验成本。1材料与方法1.1材料法医DNA检案中常规检材,血痕、精斑、烟蒂和毛发(带毛囊)各20份。Profiler PlusTM试剂盒和IdentifilerTM试剂盒(AB I,USA)。1.2方法1.2.1 DNA提取上述检材采用Chelex-100法[1]提取模板DNA。取9mm2血痕加入5%Chelex-100150μl,56℃2h;精斑经两步法视镜检精子量多少酌情加入5%Chelex-100 150~250μl,PK 10μl(2mg/m l),DTT 10μl(1mol/L… 相似文献
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采用杨军意报道方法[1],笔者检测了1993年至1995年24例实际案件共75件血痕检材,获得满意的效果。现将应用情况作一回顾分析。案例应用1.案件性质24例实际破案,凶杀16例,抢劫2例,伤害2例,交通肇事4例。共提取可疑血痕检材75件。2.载体条件水泥墙上ZO件,石灰墙上10件,铁器上15件,木质上8件,衣服上Ic件,玻璃上2件,纸张上3件,橡胶上2件,皮革塑料上5件。3.血痕时间最短1天,最长1年,一般3天至2周。4.检村提取能直接提取的直接提取,不能直接提取的转移到脱脂纱线上。5.检验及结果按杨氏‘’文中介绍方法,配成聚乙二醇一抗… 相似文献
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正作者对濮阳市1992-2002年间未破命案进行了梳理,收集了其中10起命案的生物学检材,进行STR检验,得到较理想的结果,并侦破了4起命案,现报道如下。1材料与方法1.1样本来源10起未破命案检材30份。(1)精斑类检材10份(内衣4份、阴道擦拭物4份、床单2份);(2)血痕类检材11份(木质载体2份、金属载体3份、棉纱载体6份);(3)接触类检材9份(提包1个、手表5只、 相似文献
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目的分析188份接触DNA检材的提取、送检和检验结果,探讨接触DNA检出率及可能影响接触DNA检验的因素。方法收集本辖区2016年1月至2016年10月提取并送检的188份接触DNA检材,按照检材载体性质、提取方法、送检时间、检出率等进行分类,采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析和χ2检验。结果188份接触DNA检材成功进行STR分型的有38份,检出率为20.21%;其中表面质软、粗糙的载体接触DNA检出率58.82%,高于其它载体接触DNA检出率组的差异具有统计学意义;直接原物提取的接触DNA检材检出率42.11%,高于脱落细胞粘取器提取、棉签拭子转移提取的检出率组的差异具有统计学意义;送检时间早的检材检出率高于送检时间晚的检材组且具有统计学意义。结论接触DNA检材的检出率受载体性质、提取方法、送检时间等因素影响,日常现场勘查时要注重发现检出率高的载体上的接触DNA选择适当的方法提取,并及时送检。 相似文献
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目的建立一种自动化提取脱落上皮细胞类生物检材DNA的方法。方法附着于不同载体上的脱落上皮细胞类生物检材共278份,应用Eppendorf epMotion 5075LH工作站结合DNA IQTM系统提取模板DNA,并用Identifiler试剂盒进行STR检验。结果在278份被检的生物检材,其中126份检材获得13个基因座以上的STR分型,不同类型的检材其检出率不相同,最高达73.44%,最低为10.89%。结论脱落上皮细胞类检材应用自动化工作站提取DNA模板可在法医日常检案中广泛应用。 相似文献
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1 案情简介2 0 0 3年 7月 2 3日 ,某地发生一起恶性强奸案 ,犯罪嫌疑人万某将其前女友骗至其家中 ,将该女灌醉后强奸 ,随后万某将其所饲养的雄性大丹犬的生殖器插入该女的阴道 ,并推犬的臀部 ,直至该犬射精。2 检验情况收检的检材包括受害人、犯罪嫌疑人、血痕、大丹犬的血痕 ,受害人的阴道擦拭物。阴道擦拭物酸性磷酸酶试验阳性 ,镜检可见精子。采用二步消化法提取阴道擦拭物中的精子DNA ,用chelex - 10 0树脂法提取受害人、犯罪嫌疑人及犬的血痕DNA ,分别用ProfilerPlus(ABI)、CanineI ,Version 3.0 (ABI)两个试剂盒对上述检材进… 相似文献
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混合精斑DNA三种提取方法的比较 总被引:3,自引:0,他引:3
在法医物证学上,对于混合斑检材,一般采用Chelex法[1,2]抽提DNA,由于得率和纯度较低,检测存在失败的可能。为了提高成功率,作者对检案过程中抽提DNA的步骤进行了优化,现报道如下。1材料与方法1.1检验材料1号检材为卫生巾,2号检材为卫生纸,3、4号检材均为蓝色内裤,其中3号检材较脏且混有血痕。分别剪取1~4号检材微量,涂片经伊红美兰染色,镜检,1、2、4号检材均检见人精子,3号检材检见大量上皮细胞及少量人精子。1.2仪器与试剂梯度PCR仪(德国,Eppendorf);DYY-Ⅲ-4型稳压稳流电泳仪(北京六一仪器厂);人STR六个双基因座复合扩增银染试剂… 相似文献
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应用抗 Gm(2)血清和抗 D-Gm(2)血清以及 Gm 标准对照血清,选择新鲜 ORh(D)红细胞,用凝集抑制试验,对北京地区269人血清或新鲜血痕进行检验。结果 Gm(2+)分布为29%,Gm(2-)分布为71%。对已确定 Gm(2)型的230份血痕,在室温放置14个月后再次检验,结果与第一次所测血型完全相同。同时对11起案件中的血痕检验了 Gm(2)因子,起到了排除嫌疑人或增加与案件相关联的作用。 相似文献
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在血痕种属检验中,通常采用较为灵敏和快速的环状沉锭法。当遇有被肥皂、洗衣粉等污染的血痕检材时则往往得不到正确结果。我们采用琼脂单向免疫扩散法对常见洗涤剂污染的血痕检材进行实验,取得了满意的结果。 1 器材与试剂 (1)人血样品(医院血库提供)。 (2)抗人血红蛋白血清(华西医科大学法医系提供,效价:1∶10000)。 (3)琼脂糖,1.5%和5%的肥皂液,1.5%和5%伪洗衣粉液,1.5%和5%的餐具洗洁精液(以上液体均用自来水配制而成)。 (4)加热磁性搅拌器、冰箱、培养皿。 2 方法 相似文献
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在性犯罪中最有效的取得证据的手段之一是对现场遗留的精斑及混合斑进行检验。但由于种种因素的影响 ,在实际检案中有许多性犯罪精斑检验为阴性 ,不能为性犯罪提供有力证据。笔者在性犯罪案件中注意提取与性犯罪有关的其他物证 (如血迹、唾液斑、阴毛等 ) ,通过作DNA检验 ,为案件侦破提供了重要证据。现报告如下 :一、材料自我室自 1 997年 1月~ 1 999年 1 2月受理的PCR检验强奸案件 6例 ,检材为血痕、唾液斑、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛等。二、方法1 .DNA提取 :血痕、唾液、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛采用chele - 1 0 0… 相似文献
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